鴨病毒性肝炎卵黃抗體的作用及應(yīng)用

趙風(fēng)立 宋玉財 吳衛(wèi)東

（①山東青島科亞華動物藥業(yè) 266111 ②山東煙臺市動物衛(wèi)生監(jiān)督所 ③菏澤市畜牧站）

鴨病毒性肝炎(Duck virus hepatitis，DVH)病原為鴨肝炎病毒 (Duck epatitis virus，DHV)目前歸屬于小RNA病毒科的未確定種。鴨肝炎病毒對氯仿、乙醚、胰蛋白酶和PH3.0都有抵抗力，在56℃加熱60min仍可存活，在37℃中能抵抗2%來蘇兒作用1h和0.1%福爾馬林8h，在15～20℃中的1%福爾馬林或2%NaOH中能存活2h，在2%的漂白粉溶液中能存活3h，3%酚、碘制劑可使病毒滅活。在自然環(huán)境中，病毒可在污染的孵化器肓雛室中存活10周，在陰濕處糞便中存活37d以上，在4℃存活2年以上，在-20℃則可長達9年。鴨病毒性肝炎病毒有三種類型，其中Ⅰ型屬于RNA病毒科，病毒抵抗力強，在自然環(huán)境中可較長時間存活。II型屬于星狀病毒，III型屬于小RNA病毒。鴨病毒性肝炎病毒3種血清型之間無交叉保護作用。鴨病毒性肝炎病毒與鴨乙型肝炎病毒(屬嗜肝DNA病毒科)無任何相關(guān)性。

1 鴨卵黃抗體的產(chǎn)生

我國于1958年首次在上海地區(qū)某些鴨場發(fā)現(xiàn)鴨肝炎，迄今已流行半個多世紀，1984年郭玉璞等證實我國鴨肝炎流行株為I型。DHV-I型又稱古典株 ，此病毒流行甚廣，呈世界性分布，主要侵害3周齡以內(nèi)的雛鴨，發(fā)病急、傳播快、死亡率可達死亡率為50%～90%。近年來，美國、印度、法國等國家已發(fā)現(xiàn)Ⅰ型DHV的變異株，美國已對其分離物進行了比較，證明其確為I型DHV的一個變異株，命名為Barn-hardt株，與DHV-I型在中和試驗中呈部分交叉反應(yīng)。1992年Sandhu也發(fā)現(xiàn)一類毒株，與I型僅有部分血清學(xué)相關(guān)性，稱之為I型的變異株，命名為Ⅰa型。2007年，中國、韓國和臺灣地區(qū)的學(xué)者也先后報道和證實了DHV-I型的變異。

簡易的鴨舍、落后的設(shè)備、粗放的管理、傳統(tǒng)的技術(shù)很難生產(chǎn)出高質(zhì)量標準的鴨肉產(chǎn)品，農(nóng)村規(guī)模化飼養(yǎng)戶由于缺乏系統(tǒng)而全面的技術(shù)培訓(xùn)，生產(chǎn)過程中普遍存在著缺乏隔離、消毒、預(yù)防、治療等綜合防疫措施的全面落實，給鴨病毒性肝炎等傳染病的爆發(fā)提供了溫床。尤其是現(xiàn)在市場分離毒不斷出現(xiàn)變異毒株，給本病的防治帶來很大的困難。

雞、鴨、鵝等禽類的蛋在營養(yǎng)成分上大致相同，主要由蛋黃、蛋清(即蛋白)和蛋殼構(gòu)成。鴨蛋每個約重60～75g，其中蛋黃占32%，蛋清占57%，其余11%為蛋殼。其中蛋黃又由如下圖所示的成分所構(gòu)成：

抗體(免疫球蛋白，Ig)是機體受到外來抗原物質(zhì)刺激后，機體免疫系統(tǒng)細胞產(chǎn)生的可以特異性地識別和結(jié)合外來抗原并使之失活的一類球蛋白。家禽經(jīng)特定抗原免疫后，可產(chǎn)生相應(yīng)的特異性抗體進入血液循環(huán)，當(dāng)血液流經(jīng)卵巢時，特異性抗體在卵細胞中逐漸蓄積，并儲存于卵黃中，這種抗體稱為卵黃抗體(Immunoglobulin of yolk，IgY)，它是卵黃中唯一的免疫球蛋白，具有特異性和針對性，無毒副作用。

隨著養(yǎng)鴨業(yè)的發(fā)展，某些病原體的變異也越來越快，雖然疾病控制手段越來越多，也越來越先進，但疾病感染壓力卻越來越大，疾病互傳的可能性也越來越大，畜禽疾病仍舊是影響?zhàn)B殖效益和人民健康的重要因素之一。無論政府部門還是養(yǎng)殖業(yè)戶、組織都迫切需要有相應(yīng)的快速有效的對策來控制疾病的發(fā)展，降低死亡，減小損失。毋庸置疑，外源性的特異性抗體是治療

某些特定傳染病的最直接最快速最有效的方法。卵黃抗體作為一種價廉易得的外源性特異性抗體，其使用效果已經(jīng)在臨床獸醫(yī)學(xué)上得到了驗證和認同。從圖中可以看出，在治療鴨病毒性肝炎，使用卵黃抗體時，起到關(guān)鍵作用的是卵黃中的免疫球蛋白(IgY)，IgY的作用非常廣泛。

2 鴨卵黃抗體主要的作用

（1）特定的卵黃抗體能黏附于特定病毒的衣殼上，直接抑制病毒的生長繁殖；（2）可以黏附于細菌的菌毛上，使之不能黏附于黏膜上皮細胞，失去感染能力；（3）能夠促進單核巨噬細胞的吞噬作用(調(diào)理作用)；（4）中和細菌、霉菌等毒素的毒性(中和毒素)；（5）與病毒抗原結(jié)合使病毒失去感染宿主細胞的能力(中和病毒)。

3 鴨卵黃抗體的應(yīng)用

鴨病毒性肝炎卵黃抗體的作用即是蛋黃中免疫球蛋白的作用，蛋黃中所含有的大量脂蛋白及脂肪等物質(zhì)沒有任何治療作用且體積大，粘稠度高，注射困難且難以吸收，注射后對機體的應(yīng)激大，易造成過敏反應(yīng)，是外源性致熱原，加上注射后易造成注射部位局部組織出血、腫脹、壞死，壞死的組織也會導(dǎo)致機體發(fā)熱，而發(fā)熱會造成機體神經(jīng)調(diào)節(jié)、體液調(diào)節(jié)等功能的紊亂，從而導(dǎo)致鴨群采食量減少，抵抗力下降，繼發(fā)傳染性漿膜炎、大腸桿菌等疾病。大量的調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，目前市面上可見的粗制抗體幾乎都是地下作坊生產(chǎn)的“三無”產(chǎn)品，生產(chǎn)環(huán)境及產(chǎn)品質(zhì)量令人堪憂。這些粗制抗體不僅抗體效價難以保證，而且通常會污染禽呼腸孤病毒、禽淋巴白血病病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生因子、大腸桿菌、沙門氏菌、支原體等外源性致病原。在注射抗體預(yù)防或者治療鴨病毒性肝炎時，極有可能造成垂直傳播病原或其他一些細菌、病毒的擴散甚至疾病的暴發(fā)，帶來嚴重的經(jīng)濟損失。此外，由于非法造假者往往試圖通過添加大劑量的甲醛、青、鏈霉素等措施來延長其產(chǎn)品的保質(zhì)期，增加所謂的使用安全性，但結(jié)果往往造成更大的應(yīng)激和嚴重的藥物殘留。這就是鴨病毒性肝炎粗制抗體的購買者和使用者對粗制抗體的使用效果產(chǎn)生疑問的重要原因之一。

目前“有的鴨場從未發(fā)生過肝炎，種鴨根本沒有接觸過肝炎病毒，種鴨未曾注射過鴨肝炎疫苗”的情況已經(jīng)罕見，加上許多鴨場剛接雛就有肝炎死鴨，如按有的資料介紹的1～3日齡給雛鴨注射鴨肝炎疫苗已不可能，只能1日齡即注射鴨肝炎蛋黃抗體或血清。由于當(dāng)前鴨肝炎血清型已多樣化，需選用多血清型的鴨肝炎蛋黃抗體或血清。還應(yīng)在蛋黃抗體中加入核酸，或黃芪多糖注射液，或α-干擾素，在鴨的飲水中加入雙黃連口服液、葡萄糖水、維生素C等。市場上的鴨肝炎與其他病毒的二聯(lián)、三聯(lián)、四聯(lián)甚至五聯(lián)的蛋黃抗體對肝炎的療效較差。

臨床資料顯示：鴨肝炎蛋黃抗體在強毒污染的鴨場僅有7～9d的保護期，所以應(yīng)密切注視小鴨的動態(tài)，力爭在又一只肝炎死鴨出現(xiàn)后，立即加大劑量再注射蛋黃抗體和口服藥物，不要貽誤治療的最佳時機。在筆者的臨床實踐中，有許多肉鴨注射過3次高免蛋黃抗體才得以出欄。

精制就是將蛋黃中的免疫球蛋白進行分離純化的過程。已知蛋黃是由水溶相(Water soluble fraction， WSF)和水不溶相(Water insoluble fraction， WIF)構(gòu)成的乳濁液。WIF主要為脂蛋白構(gòu)成，而蛋黃抗體存在于蛋黃的WSF中。WSF中的脂蛋白類含量甚微，其物理性狀為近乎透明的透明液體。因此蛋黃抗體精制過程即是WSF的分離過程。信得科技集團的精制蛋黃抗體采用了物理、化學(xué)、生物等多重滅活技術(shù)，并結(jié)合使用酸化法、高速離心、超濾等現(xiàn)代生物技術(shù)HOF生產(chǎn)工藝，將蛋黃中的免疫球蛋白進行有效的分離純化。大量臨床使用案例表明，信得精制蛋黃抗體具有效價穩(wěn)定、效果確實、保存時間長和便于應(yīng)用的優(yōu)點。同時精制蛋黃抗體不會在注射部位殘留，對胴體品質(zhì)無任何影響。

精致抗體的優(yōu)點：（1）保護譜廣、治愈率高：本產(chǎn)品在制備過程中除采用了標準毒株外，還采用了國內(nèi)各養(yǎng)鴨密集區(qū)的超強毒株及變異株，對鴨病毒性肝炎變異地區(qū)亦有非常好的防治效果，對發(fā)病鴨群的治愈率達95%以上；（2）提純濃縮、抗體效價高：梯密度濃縮技術(shù)，精制提純到免疫球蛋白，效價是一般市售產(chǎn)品的4～5倍，達到1:1024～1280；（3）見效快，保護時間長：5～6h控制病情，降低死亡，恢復(fù)精神狀態(tài)，注射一次有效抗體效價能夠維持10d以上；（4）注射劑量小，應(yīng)激小，無毒副作用：將蛋黃中脂肪、脂蛋白分離去除，其性狀為近乎透明的無色液體，不含任何有害物質(zhì)和外源污染，安全性高，對機體無任何刺激及毒副作用，對胴體品質(zhì)無影響；（5）抗體粘稠度低，流動性好，使用時無需解凍，注射方便快捷，只需使用小號針頭，更有利于注射部位皮膚愈合；（6）抗逆性強，疫苗耐熱保護技術(shù)及疫苗專用包裝，效價穩(wěn)定，保存時間長：2～8℃條件保存18個月，常溫條件下保存6個月對抗體效價無任何影響。