萬積成 唐曉賓 張麗麗 (北京萬華生物工程有限公司 100081)
母豬的早期妊娠診斷是提高母豬繁殖效率和畜牧業生產效益的重要技術措施,尤其是配種后20d前后的早期妊娠診斷是母豬繁殖技術中十分重要的內容。通過診斷,可以盡早的確定為妊娠母豬,以便及時采取措施,如未妊娠再進行配種,使之妊娠。這對于縮短母豬的產仔間隔、減少空懷期、提高繁殖率具有重要意義,經濟價值很大。本文總結歸納了母豬妊娠診斷的技術,并對各種技術的優勢與弊端進行分析說明,對母豬妊娠診斷的新技術及發展方向加以展望。
1.1 觀察配種后的表現 詢問畜主豬何時發情、配種、人工授精或本交、以往妊娠配種次數、本次配種次數、最后一次何時配種、最后一次配種是否再發情、配種后食欲是否增加等;看母豬的腹部下垂與否、乳房是否腫脹等。如果母豬配種21d后不再發情或者配種后性情變得溫順、安靜,食欲逐漸增加,膘情好轉,皮毛變得光亮緊湊,腹圍增大,行動變得小心穩重,陰戶下聯合處逐漸收縮緊閉,明顯的向上翹,配種10d后,陰道顏色變白并附有濃稠粘液,觸之澀而不潤,這些都是母豬已經妊娠的表現[1,2]。此法不需要任何儀器與試劑,完全靠檢驗者的經驗來進行判斷,雖然簡便,但是準確率不高。
1.2 外部接觸法 先進行抓癢,使其臥下。用左手挾住最后兩對乳房之上的兩側腹壁,并上、下、左、右滑動。妊娠2個月時最易摸清胎兒,母豬過肥則難以奏效[1]。
1.3 直腸檢查 根據豬在妊娠期子宮角、子宮頸以及子宮壁等的變化情況來進行診斷。盡管此法準確率高,但由于豬較牛體格小,很難將手伸入直腸,且保定困難,費時費力,所以此方法在實踐中意義不大[1]。
1.4 掐壓腰背部法 母豬配種21d后,掐第9胸椎到第2腰椎之間,用拇指和食指掐壓母豬出現凹背反射而無凹屈反射,說明已經妊娠;母豬出現凹屈反射而無凹背反射,說明沒有妊娠。此方法是憑借經驗,準確率不高。
1.5 尿液檢查法 在母豬配種10d后,取清晨尿液10ml置于玻璃杯中,加入5%~7%碘酊1ml,煮沸后,如尿液呈現紅色,說明已經妊娠;出現淺黃色或褐色,且冷卻后顏色很快消失,說明未妊娠[2,3]。
1.6 激素法 母豬妊娠后,卵巢上的周期黃體維持下來且分泌孕酮的功能增強,因而體內孕激素水平很高,不會被外源的雌性激素誘發發情,因此在母豬配種后通過注射各種激素:孕馬血清促性腺激素、已烯雌酚、雌二醇等,注射后妊娠母豬不會表現發情,而未懷孕母豬則會表現發情征兆[4,5]。此種方法確診率高,不會造成母豬流產,母豬產仔數及仔豬發育均正常,但是需要專業人員操作,農村散養戶對藥劑的使用量及注射方法都沒有很好的把握,不適合小型養殖規模的農戶使用。
1.7 超聲波診斷法 超聲波診斷法是以高頻聲波對動物的子宮進行探查,然后將其回波放大后以不同形式轉化成不同的信號顯示出來,目前應用的診斷儀主要有A超、B超、多普勒超聲三種。A超在70年代備受青睞,目前應用較少。B超是目前使用最多最先進的超聲波診斷儀。超聲波診斷妊娠具有無損傷、安全、準確等優點,但是價格昂貴,且損壞后不易修理,需要專業人員操作,目前只能在規模化豬場應用。(1)A超:是利用超聲波來檢查充滿積液的子宮,聲波從妊娠的子宮反射回來,并被轉換成聲音信號或示波器屏幕上的圖像,或通過二極管形成亮線。這種儀器體積較小,操作簡便,幾秒鐘便可得出結果,適合基層豬場使用。但膀胱積液、子宮積膿和子宮內膜水腫容易造成假陽性診斷結果。另外,這種診斷儀應注意其應用的對象,一些對大家畜使用的診斷儀應用于豬時,可能會使所有的被測對象都呈陽性。(2)B超:B型超聲診斷儀可通過探查胎體、胎水、胎心搏動及胎盤等來判斷妊娠階段、胎兒數、胎兒性別及胎兒狀態等。具有時間早、速度快、準確率高等優點,但價格昂貴、體積大,只適用于大型豬場定期檢查。(3)多普勒:該儀器可通過測定胎兒和母體血流量、胎動等做較早期診斷。當周圍環境中有噪音干擾或直腸探查部位有糞便阻塞時會出現假陰性診斷。此種方法一般需要用不同妊娠期探查的錄音進行比照[6]。
2.1 血漿孕酮測定 未妊娠而有發情周期的母豬,在發情期的第16d左右,外周血漿孕酮濃度下降,因此可在配種后16~24d檢測,若血漿孕酮含量仍很高,則為妊娠的征象。豬妊娠22d時血漿孕酮含量一般在5mg/mL以上。但此方法不利于推廣的原因為采集血樣困難[7]。
2.2 血漿和尿中雌激素測定 豬妊娠25~30d以后,血液和尿中雌激素含量大大高于未妊娠豬,故可用來診斷妊娠。尿中雌激素可用化學方法測定;血液內雌激素則用放射免疫法。雖然應用這些方法準確率高,但由于儀器設備費用太大,操作技術復雜,且采集血、尿樣品不便,所以在實踐中很難被推廣[8]。妊娠30d就能從血中測出硫酸雌酮,未妊娠豬則測不出來。血液中硫酸雌酮含量最高的時間是配種后24~26d,這時測定效果最好。
2.3 陰道活組織檢查 上皮細胞的層數和形態與內分泌狀況有密切關系。妊娠第26d上皮細胞平行排列成兩行,細胞核濃縮,染成黑色,無乳頭間栓。未妊娠豬有許多層次的上皮細胞,有大量的乳頭間栓,制作組織切片檢查。雖然該方法準確率在90%以上,但操作復雜,檢查費時,不能立即獲得結果,實用性不大[1]。
2.4 血小板計數法 文獻報道,血小板顯著減少是早孕的一種生理反應,根據血小板是否顯著減少就可對配后數小時至數天內的母畜作出超早期妊娠診斷[9,10]。該方法具有時間早、操作簡單、準確率高等優點。尤其是為胚胎附植前的妊娠診斷開辟了新的途徑,易于在生產實踐中推廣和應用。在母豬發情配種前(當天)和配種后第1~11d從耳緣靜脈采血20μl,置于盛有0.4ml血小板稀釋液的試管內,輕輕搖勻,待紅細胞完全破壞后再用吸管吸取一滴充入血細胞計數室內,靜置15min后,在高倍鏡下進行血小板計數。配種后第7d是進行超早期妊娠診斷的最佳血檢時間。血小板數在第7d降到最低點(250±91.13)×103mm3試驗母豬經過2個月后進行實際妊娠診斷,判定與血小板計數法診斷的妊娠符合率為92.59%,未妊娠符合率83.33%,總符合率93.33%[9]。馬群山等試驗符合率為89.53%[10]。李玉龍等所得總符合率為93.85%[9]。
該方法雖有時間早,準確率高等優點,但應排除某些疾病所導致的血小板減少。例如,肝硬化,貧血,白血病及原發性血小板減少性紫癜等癥。
根據母豬妊娠期孕酮周期性變化的規律,利用膠體金免疫層析法原理,以孕酮作為檢測目標物,以孕酮水平判斷母豬是否妊娠。在母豬配種后19、20、21、22d要密切觀察豬的行為表現,一旦發現豬有發情的表現應立即進行檢測,試劑板出現一條紅線為陰性,確定為未懷孕,要及時配種,可避免假發情情況如果沒有發情表現則第23d為最后檢測時間,配在試劑板出現一條紅線為陰性,表示未懷孕,可避免由于乏情延誤診斷,出現兩條紅線為陽性,可確定豬已懷孕,應進入妊娠期管理。此方法具有準確率高、操作簡便、檢測迅速、常溫儲存、攜帶方便、對母體和胎兒安全無害等特點,而且只取豬尿進行檢測,取樣方便,結果讀取簡單,不需要專業人員操作,因此特別適合小規模豬場和散養戶使用,實用性強,推廣應用前景良好。
綜上所述,母豬早期妊娠診斷的方法很多,也各有利弊,各種養殖戶要根據自己的養殖規模與特點選擇適合自己的診斷方法。日本學者菅原七郎曾提出家畜早期妊娠診斷的5條原則[11,12]:(1)在妊娠后不久的時間內盡早地進行診斷;(2)妊娠和未妊娠母畜診斷的準確率應達到85%以上;(3)方法簡便;(4)對妊娠母畜和仔畜安全無害;(5)經濟實用。所以簡便而有效的進行早期妊娠診斷,是畜牧工作者長期以來試圖解決的問題之一,因為盡早發現空懷,盡早采取措施復配,才不致錯過配種季節。對母豬而言,每耽誤5.5個發情周期就少產1窩。母豬配種后20d前后的早期妊娠診斷,是母豬繁殖技術中十分重要的研究內容。因此早期妊娠診斷技術在養豬生產中具有很大的研究應用價值和推廣價值。
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