乳腺癌組織中nm23、PS2蛋白的表達及臨床意義

張恒

近年來乳腺癌的發病有年輕化的趨勢。盡早的篩選出高、低危組人群進行有針對性的治療對于改善預后尤為重要。nm23是一種腫瘤轉移抑制基因，其蛋白表達水平與腫瘤的浸潤轉移能力有關，高表達者具有低轉移性［1］。PS2蛋白是雌激素誘導蛋白的一種，其表達能確切地反映乳腺癌對激素的依賴［2］。2008年5至6月，我們采用免疫組化SP法檢查了60例乳腺癌患者腫瘤組織和50例乳腺良性疾病患者乳腺組織中的um23、PS2蛋白?，F報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2002年5月至2003年5月我院收治的60例乳腺癌患者，年齡29～73歲，平均52.3歲;病理分級按Carfl'-Bloom-Richardson系統進行分級，I級7例，Ⅱ級26例，Ⅲ級27例;臨床分期采用2001國際TNM分期標準：I期ll例，Ⅱ期40例，Ⅲ期9例;同側腋窩淋巴結轉移20例，無淋巴結轉移43例;雌激素受體(ER)陽性44例，ER陰性19例，術前均未進行新輔助化療。所有乳腺癌病例均行改良或保乳根治術，手術切除標本經甲醛固定、取材、常規脫水及包埋，為觀察組。另取50例乳腺良性疾病患者的手術切除標本為對照組。

1.2 nm23、PS2蛋白檢測方法所有標本均經過10%甲醛固定，石蠟包埋，石蠟切片機3pm連續切片。采用免疫組化SP兩步法檢測nm23蛋白和PS2蛋白的表達情況。所采用鼠抗人nm-23單克隆抗體、鼠抗人PS2蛋白單克隆抗體和免疫組化SP染色試劑盒為美國Maxim公司生產。用PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照，以已知陽性的切片作為陽性對照。nm23蛋白以細胞質內出現棕黃色顆粒為陽性染色?；静恢邽?分，著色淡者為1分，著色適中者為2分，著色深者為3分。著色細胞占計數細胞百分率≤5%為0分，6%～25%為1分，26% ～50%為2分，≥51%為3分。將每張切片著色程度得分與著色細胞百分率得分相乘，即為陽性系數。陽性系數為0～1分為(-)，2～3分為(+)，4～6分為(++)，7～9分為(+++)。PS2蛋白的陽性表達定位于細胞質。染色強度分為3級：1級淺棕色;3級深褐色;2級介于級和3級之間。陽性細胞占總腫瘤細胞的比例≤10%為(-)，11% ～25%為(+)，26%-50%為(4++)，≥51%為(+++)。(+)及以上者為PS2蛋白陽性表達。

1.3 統計學方法 采用SPSS 13.0統計軟件 組間比較采用t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

觀察組nm23蛋白、PS2蛋白陽性率分別為80.00%(48/60)和70.00%(42/60)，對照組分別為98.16%(49/50)和96.00%(48/50)，兩組相比，P均 ＜0.05。乳腺癌組織中nm23、PS2蛋白表達與腫瘤臨床病理指標的關系見表1。觀察組nm23蛋白、PS2蛋白均陽性者37例(A組)，nm23蛋白陽性PS2蛋白陰性11例(B組)，nm23蛋白陰性PS2蛋白陽性5例(C組)，nm23白、PS2蛋白均陰性10例(D組)，兩者的表達存在正相關關系，χ2=9.84，r=0.955，P ＜0.01。A、B、C、D組分別有34、9、4、6例患者術后5年無瘤生存，兩兩比較除A、D組患者5年生存率比較P＜0.05外，其余各組兩兩比較，P 均 ＞0.05。

3 討論

腫瘤的發生在很大程度上歸咎于癌基因和抑癌基因的異常及由此引起的蛋白產物的質和量的變化，這些變化最終引起細胞的生長、增殖、分化、成熟、衰老和死亡的異常，從而導致腫瘤的發生。

3.1 nm23蛋白表達與腫瘤臨床病理參數的關系nm23基因是Steeg等［3］在1988年采用消減雜交法從7個轉移潛力不同的K-1735鼠黑色素瘤細胞株中分離鑒定出來的，其在低轉移細胞株中的表達強度是高轉移細胞株內10倍;有淋巴結轉移者的癌細胞nm 23蛋白、PS2蛋白表達與乳腺癌臨床病理參數的關系注：同一臨床病理參致內比較。P＜0.05胞均有低水平的nm23 RNA表達，遠處轉移者的癌細胞有較高水平的nm23 RNA表達。Belev等［4］的研究也顯示，nm23蛋白陽性表達與淋巴結轉移呈負相關，與預后呈正相關，nm23蛋白陽性者淋巴結轉移少，5年生存率高。本研究結果顯示nm23蛋白在乳腺良性疾病中的表達要高于在乳腺癌組織中的表達。在乳腺癌組織中nm23蛋白的表達與年齡無關;與組織學分級、臨床分期、淋巴結轉移呈負相關。組織學分級越低、臨床分期越早、無淋巴結轉移者nm23蛋白陽性率越高，反之nm23蛋白陽性率越低，癌細胞轉移浸潤能力強，發生轉移的危險性高，預后差，與文獻報道研究結果一致［5］;與ER狀態呈正相關，ER陽性乳腺癌nm23蛋白表達陽性率高于ER陰性者。因此，nm23蛋白低表達或無表達可能與乳腺癌發生轉移有關，可作為乳腺癌轉移潛能的判斷指標，通過對nm23蛋白表達程度的檢測，有助于判斷腫瘤轉移情況和評估預后［6］。

3.2 PS2蛋白表達與腫瘤臨床病理參數的關系在乳腺癌細胞內，PS2蛋白只雌激素控制下才能被轉錄，從而認為PS2蛋白一種乳腺癌雌激素誘發蛋白。PS2蛋白的表達依靠腫瘤中的ER的存在。該蛋白表達與細胞分化有關。國內楊新華等［9］研究發現PS2蛋白的表達與患者年齡、病理類型和腋窩淋巴結轉有關，與腫瘤大小移無關。本研究實驗結果也提示PS2蛋白在不同年齡階段患者中的表達存在差異性，其在中青年組的表達水平明顯高于老年組，這也說明了雌激素刺激對PS2蛋白表達的調控作用［10］。本研究結果提示不同病理類型的乳腺癌組織PS2蛋白的表達差異無統計學意義，這可能與實驗方法、陽性判定標準及病例數量有關。本研究結果還提示PS2蛋白的表達與組織學分級呈負相關，與ER表達呈正相關，與文獻報道一致。

3.3 nm23蛋白和PS2蛋白表達與患者預后的關系國內外的很多文獻報道nm23蛋白的表達水平與患者的預后有關，高表達患者5年生存率高，陰性或低表達者預后較差。本研究結果顯示兩者均陽性患者5年無瘤生存率要高于均陰性患者，這也又一次印證了nm23蛋白與PS2蛋白檢測在指導乳腺癌患者治療與判定患者預后方面的價值。

綜上所述，nm23蛋白和PS2蛋白表達之間可能存在著相互協同的關系。nm23蛋白陰性和PS2蛋白陰性的乳腺癌患者細胞惡性化程度高，更容易發生淋巴結轉移，而兩者均陽性的患者則其分化程度更高，惡性程度更低，不易發生腋窩淋巴結轉移，且更容易通過內分泌治療獲益。兩者聯合檢測可以作為獨立指標來估計乳腺癌的生物學行為，在區分乳腺癌高、低危患者及預測乳腺癌患者預后方面更有經驗交流意義。

［1］Maure CA，Graber HU，Friess H.Reduced expression of the metastasis suppressor gene KAI 1 in advanced colon cancer and its metastasis，1999(05).

［2］Elston CW.Ellis IO The value of histological grade in breast cancer：experience from a large study with long-term follow-up，2002(03).

［3］Steeg PS.Bevilacqua G.Kopper L Evidence for a novel gene associated with a low tumor metastatic potential，1988(03).

［4］Belev B.Alerie I.Vrbanec D nm23 gene product expression in invasive breast cancer immunohistochemical analysis and clinicopathological correlation，2002(04).

［5］Kapitanovic S.Cacev T.Berkovic M nm23-H1 expression and loss of heterozygosity in colon adenocarcinoma，2004(12).

［6］Gong SJ.Rha SY.JEUNG HC.Bilateral breast cancer：differential diagnosis using histological and biological parameters，2007(7).

［7］Kroger N.Milde langosch K.Prognostic and predictive effects of immunohistochemical factors in high-risk primary breast cancer patients，2006(1).

［8］Al Ahwal MS.HER-2 positivity and correlations with other histopathologic features in breast cancer patients-hospital based study，2006(2).

［9］楊新華，姜軍，卞修武.乳腺癌PS2蛋白表達的臨床意義.第三軍醫大學學報，2003(23).

［10］薄愛華，蘆廣萍，閆愛春，雷杰.EGFR和VEGF在乳腺癌中表達的臨床意義.中國腫瘤臨床，2007(23).