紫杉醇對兔耳增生性瘢痕組織的影響

段紅梅 吳志遠 江黎明

增生性瘢痕的形成是由于皮膚創傷后的愈合過程中，成纖維細胞過量增殖和膠原纖維過度增生的結果。增生性瘢痕的防治是現代醫學的難題之一，尋找治療和預防瘢痕增生和藥物具有重要的意義。Morris證實兔耳腹面皮膚全層缺損后產生瘢痕組織類似人皮膚增生性瘢痕［1］。國內李薈元等［2］建立了兔耳瘢痕模型，為瘢痕研究提供了一種很好的實驗工具。隱丹參酮是從中藥丹參中提取的重要活性成分，具有抗氧化，抗動脈粥樣硬化、抗腫瘤作用。本研究旨在探討紫杉醇對兔耳瘢痕組織的影響，為瘢痕防治提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料 紫杉醇購于云南柯菲平醫藥有限公司。

1.2 動物 新西蘭大白兔24只，體重2.3～2.8 kg，雌雄兼用，購自廣東醫學院實驗動物中心。

1.3 實驗方法 兔適應性喂養24 h，用氯胺酮肌注麻醉，用量為1 mg/kg。在兔雙側腹側分別做2個邊長為1 cm的正方形切口，完整切除全層皮膚，直至軟骨膜表面。用灼熱鐵絲燒灼創緣四周皮膚，創面貼敷創可貼。觀察疤痕形成情況，21 d時將兔耳疤痕隨機分為4組，每組n=12。分別于疤痕內基底部及疤痕灶內注射不同濃度的藥物或生理鹽水，注射用量為40 ml。A組:注射生理鹽水;B組:注射濃度為9 mg/L的紫杉醇;C組:注射濃度為27 mg/L的紫杉醇;D組:注射濃度為81 mg/L的紫杉醇。繼續喂養，28 d時，同樣在麻醉條件下切取瘢痕組織標本，測定瘢痕增生情況。

1.4 觀察指標 28 d時，將收取瘢痕組織及周圍正常組織標本于低倍鏡下用測微尺測出耳腹側正常皮膚厚度(a)、耳軟骨厚度(b)、耳背皮膚厚度(c)、耳增生塊全厚度最大徑(d)，按以下公式測算出瘢痕增生指數(Hypertophic Index，HI):HI=［d-(b+c)］/a。

1.5 統計學方法 采用SAS軟件包(由廣東醫院統計學教研室提供)進行配對t檢驗和方差分析。

2 結果

2.1 瘢痕形成情況 在兔耳腹側形成創面后，傷口約13～15 d后愈合，愈合過程中上皮化時即能觸到硬塊，此硬塊不斷高于皮面，淡紅色，增生范圍不超過原創沿，19～22 d時增生到最高峰，厚度約為兔耳腹面皮膚厚度的2.8倍。

2.2 瘢痕增生指數對比情況 結果顯示:紫杉醇的濃度分別為 0 mg/L，9 mg/L，27 mg/L，81 mg/L 時，作用于兔耳瘢痕組織7 d后瘢痕增生指數分別(2.86±0.13)、(2.36±0.23)、(1.98±0.33)、(1.56±0.22)，瘢痕增生指數隨藥物濃度的增加而減少，與藥物濃度呈負相關，P=0.008，劑量組與對照組差異有統計學意義(P＜0.01)。

3 討論

增生性瘢痕的組織特征為成纖維細胞過度激活增殖同時伴隨大量的膠原合成堆積［3］。膠原的產生在瘢痕形成過程中起著決定性作用［4］。膠原代謝是一個多因素參與的復雜生物反應過程，包括膠原的合成和分解代謝［5］。嚴重創傷、燒傷及外科手術后常常遺留增生性瘢痕，影響外觀和功能。其發病機理尚未徹底闡明，也缺乏理想的治療方法。傳統的治療如手術切除、類固醇激素、抗代謝藥、免疫抑制劑和放射療法等，均因術后易復發或嚴重的全身性副作用而限制了臨床應用［6］。篩選出療效確切、副作用小的抗瘢痕纖維化的有效藥物具有重要的臨床意義。但對于藥物防治瘢痕增生的研究手段，主要有三種途徑:一是細胞培養，尤其是成纖維細胞培養，通過藥物對成纖維細胞的作用來進行篩選;二是將人的病理性瘢痕組織移植到裸鼠的皮下，研究藥物對瘢痕組織作用產生的變化;三是通過藥物臨床實踐來總結有關藥物防治和瘢痕的經驗。這些方法已經取得了一定的成績。本實驗采用了兔耳瘢痕動物模型，使藥物對于瘢痕防治的研究手段有了進一步的發展。通過對兔耳增生塊瘢痕增生指數的測定，結果顯示，紫杉醇明顯抑制兔耳瘢痕增生，瘢痕增生指數隨藥物濃度的增加而減少，與藥物濃度呈負相關，與生理鹽水對照組間差異有統計學意義。我們認為紫杉醇可能通過兩個途徑抑制瘢痕的增生:(1)直接抑制成纖維細胞的生長增殖，從而減少膠原的合成和分泌;(2)增加膠原酶產生、增強膠原酶活性，促使已形成的膠原纖維降解和纖維重吸收。紫杉醇具有藥性作用強，副作用小，有望成為預防和治療人皮膚增生性瘢痕的有效藥物，但尚需體內實驗和臨床進一步研究證明。

［1］Morris DE，Wu Zhao LL，et al.Acute and chronic animal models fof excessive dermal scaring:quantitative studies.Plastic Recon-str Surg，1997，100(3);674-681.

［2］李薈元，劉建波，夏煒，等.增生性瘢痕動物實驗模型的建立與應用.中華整形外科雜志，2001，17(5):276-278.

［3］胡大海，陳壁，朱雄翔，等.P物質上調正常人真皮成纖維細胞TGF-β1的 mRNA 表達.中華整形外科雜志，2002，18(4):234-236.

［4］李高峰，羅成群.低氧對瘢痕形成的影響.中華整形外科雜志，2003，19(5):238-386.

［5］吳志遠，羅少軍，江黎明.諾新康對人皮膚瘢痕基因表達的影響.廣州醫藥，2007，6(38):22-23.

［6］商慶新，張滌生.丹參和川芎嗪對成纖維細胞生長的體外抑制實驗.中國修復重建外科，1998，12(6):321-323.