細菌培養標本涂片鏡檢的意義

駱永年 梁 捷

黑龍江省大慶市杜爾伯特縣衛生監督所（166200）

隨著現代科技的飛速發展，臨床檢測技術也在不斷更新，正向著自動化、快速、準確的方向發展。而作為微生物學檢驗的細菌培養，雖有自動細菌培養儀的開發應用，但仍不能向其它檢驗項目 那樣快速、準確地回報結果。細菌培養快速慢、結果準確度不高仍然是微生物學檢驗的兩大難題。然而，注重細菌培養前標本涂片鏡檢，對評價標本留取質量，快速提供信息診斷信息，指導細菌培養方向，加強質量控制都有著極為重要的意義。可有效地提高細菌培養速度和準確性。

1 培養前標本留取質量的評價

標本留取質量，直接影響細菌的培養結果的準確性。

如標在留取過程中被其它部位的常在菌、定植菌群污染，還進行培養鑒定，就會導致病源學診斷上錯誤，誤導臨訂治療。所以細菌培養前必需作涂片鏡檢來評價標本留取質量，只有合格的標本才能進一步進行培養鑒定。

1.1 自然留取的尿液標本應以不高離心濕片直接鏡檢進行質量評價，觀察10個以上油鏡視野，平均每個視野有1個以上細菌者，說明感染的可能性大，作進一步培養。還要觀察細菌的種類，如果有3種以上細菌同時存在，則標本可能被污染，應重新留取。

1.2 對于痰標本，應在培養前作革蘭染色鏡檢評價留取質量，基標準為：扁平上皮細胞≤10個/低倍鏡視野，白細胞≥25個/低倍鏡視野，細菌形態在兩種以下為合格痰標本，另外有些標本白細胞數量上沒有≥25個/低倍鏡視野，但見到了明顯形態，染色特征的致病菌，如流感嗜血桿菌、肺炎克雷伯菌等，應進行培養并向臨床回報涂片檢查結果。注重痰標本培養前質量評價，可大大提高培養陽性率和結果的可靠性。

1.3 對于深部位的傷口、中耳、子宮內膜感染留取的膿汁、分泌物標本，出應進行涂片染色質量評價。如有大量磷狀上皮存在則說明留取過程中被污染，不能再進行培養。

2 為臨床直接提供診斷信息

根據標本來源部位和臨訂懷疑診斷疾病，培養菌標本涂片做適當染色鏡檢，對急性感染癥的快速診斷有重要的實用價值。

2.1 臨床懷疑細菌性腦膜炎患者的腦脊液標本，離心后沉淀做涂片革蘭染色鏡檢，如發現有典型形態、染色特征的腦膜炎雙球菌、新型隱球、流感嗜血桿菌等，可直接向臨床回報鏡檢所見細菌的形態與染色特征，并初步懷疑是哪種細菌。

2.2 陰道、尿道、前列腺分泌物或膿法標本培養前做革蘭染色鏡檢，如見到白細胞內，外有典型的革蘭陰性腎形雙球菌，結合臨床癥狀即可快速診斷為淋病。臨床疑為真菌感染的陰道分泌物標本培養前可做涂片墨法染色鏡檢察院，如在墨色背景下查到不著色有肥厚夾膜的酵母真菌，即可向臨床回報真菌的形態染色特點，為臨床作出快速診斷。

2.3 深部位感染標本，在培養前做革蘭涂片染色鏡檢，如發現菌體淡染、染色不一的革蘭陰性桿菌、球桿菌等常為厭氧菌，結合標本來源部位、感觀性狀（有惡臭、膿血等）向臨床回報所見細菌的形態，染色特性并疑為氧菌，以便臨床快速、正確選擇抗厭氧菌藥物治療。

2.4 標本培養前涂片鏡檢，還可觀察到白細胞的種類與數量，如見到大量多形核白細胞和較多細菌則說明是急性細菌感染，如白細胞數量較少并以單個核細胞為主則說明為慢性感染。此住信息為臨床診斷也極為重要，應及時回報。

3 指導培養方向，縮短培養時間

細菌培養前標本涂片染色觀察細菌的形態，染色特點，結合標本留取部位和臨床初步診斷。初步確認是那一類細菌，并向這一類細菌方向培養與鑒定。可以直接選用鑒別培養基和專用分離培養基接種分離培養。大大縮短檢測時間，避免培養的盲目性。如腦脊液標本涂片染色觀察到革蘭陰性短小桿菌，則應疑為水磨石嗜血桿菌，直接接種到巧克力平板上培養。尿液標本如涂片見到桿菌則直接接各在亞酸鉀平板上分離鑒定。

4 細菌培養質量控制的重要手段

細菌培養前涂片觀察到某細菌，而培養結果為陰性或是培養生長的細菌與涂片觀察到的細菌在形態和染色特點上不一致，不能再向臨床回報該結果，應及時從如下幾方面查找原因：①厭氧菌標本采集、運送等技術操作不當，淋球菌等脆弱細菌未及時接種培養，較長時間放置在自然環境中都可造成細菌的死亡，而使培養出現假陰性。②已經應用抗生素治療的標本中殘余抗生素抑制了細菌的生長。③培養基成分比例、pH值等不能達到要求，就不利于細菌的生長，甚至使細菌發生形態、染色性質的變異，另外，培養基所處環境氣體成分、溫度的變化都會影響細菌的生長。④細菌實驗室內消毒不徹底，用過的培養物和培養基不及時處理，操作者無菌操作觀念淡薄，可造成實驗室內污染。使用權得培養結果與涂片結果不一致。

有了培養前標本涂片鏡檢，就可以及時發現問題，分析原因，解決處理，提高了細菌培養的可信度。