上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白在乳腺髓樣癌中的表達及其預后研究

田陽斌，馮選明，唐永仙

(四川省攀枝花市中心醫(yī)院:1.乳腺外科;2.病理科 617067)

髓樣癌在乳腺癌中較為少見，占乳腺癌的7%及35歲以下年輕婦女乳腺癌的11%[1]。本研究通過應用免疫組織化學法檢測乳腺髓樣癌中上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達，結(jié)合臨床病理特征，探討兩者的表達與乳腺髓樣癌生物學行為及其預后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標本來源于本院1998～2008年收治的49例行手術(shù)切除并經(jīng)病理組織學證實為乳腺髓樣癌患者。病例全部為女性，年齡30～46歲，平均 39.1歲。術(shù)前未接受任何治療。按照2003年版UICC臨床分期:Ⅰ+Ⅱ期26例，Ⅲ+Ⅳ期15例。按照參考文獻[2]提出的髓樣癌分類標準進行分類:典型髓樣癌21例，非典型髓樣癌28例。

1.2 試劑與方法 鼠抗人上皮鈣依賴黏附素、β-連環(huán)蛋白單克隆抗體及SP試劑盒均購于福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。采用免疫組織化學SP法染色，操作步驟按照試劑盒說明書進行。用PBS液代替一抗作為陰性對照。

1.3 結(jié)果判定標準 上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的著色部位主要均為細胞膜，少數(shù)有胞質(zhì)著色。以細胞膜和(或)細胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒染色為陽性信號，以陽性細胞數(shù):≥10%作為陽性判斷標準。陽性細胞數(shù)10%～25%為弱陽性(+)，＞25%～50%為中度陽性(++)，50%以上為強陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計學處理 應用S PSS11.5軟件進行數(shù)據(jù)分析，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白在乳腺典型髓樣癌及非典型髓樣癌中的表達 上皮鈣依賴黏附素在乳腺典型髓樣癌及非典型髓樣癌中表達陽性率分別為95.2%(20/21)和64.3%(18/28);β-連環(huán)蛋白在乳腺典型髓樣癌及非典型髓樣癌中表達陽性率分別為85.7%(18/21)和53.6%(15/28)。兩者在乳腺典型髓樣癌中的表達陽性率明顯高于非典型髓樣癌，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

2.2 49例乳腺髓樣癌中上皮鈣依賴黏附素與β-連環(huán)蛋白表達的關(guān)系 隨著上皮鈣依賴黏附素表達強度的增加，β-連環(huán)蛋白表達陽性率也逐漸增高，且表達強度逐漸增強(表1)，兩者呈正相關(guān)(P＜0.05)。

表1 49例乳腺髓樣癌患者上皮鈣依賴黏附素與β-連環(huán)蛋白表達的關(guān)系

2.3 上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達與乳腺髓樣癌臨床病理特征的關(guān)系 上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達與乳腺髓樣癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期有明顯關(guān)系，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越多、臨床分期越高，上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白表達陽性率越低，呈負相關(guān)(P＜0.05);但兩者的表達與患者年齡、腫瘤大小及有無遠處轉(zhuǎn)移差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見表2。

表2 49例乳腺髓樣癌患者上皮鈣依賴黏附素與β-連環(huán)蛋白表達與臨床病理特征的關(guān)系

3 討 論

乳腺髓樣癌的組織學類型分為典型髓樣癌與非典型髓樣癌，兩者組織結(jié)構(gòu)及細胞形態(tài)類似，但預后差異顯著，文獻報道乳腺典型髓樣癌10年存活率為92%，而非典型髓樣癌僅為53%[2]。病理發(fā)現(xiàn):在乳腺典型髓樣癌中腫瘤與周圍乳腺組織有明顯的界限，瘤體呈膨脹性生長，而非典型髓樣癌腫瘤邊緣呈灶性或浸潤性生長[3]。上皮鈣依賴黏附素是一類依賴于鈣離子的細胞表面糖蛋白，主要參與同種細胞間的連接，對維持上皮細胞間的完整性、極性、形態(tài)和組織結(jié)構(gòu)起重要作用[4]。上皮鈣依賴黏附素主要分布于各種上皮組織中，其編碼基因位于16q22～q23.1[5]。它的高表達使腫瘤呈膨脹性生長，瘤細胞之間保持密切的接觸，難以脫離原發(fā)瘤侵入周圍組織及血管，從而抑制腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，故預后較好。本實驗中，乳腺典型髓樣癌的上皮鈣依賴黏附素表達陽性率明顯高于非典型髓樣癌，提示乳腺典型髓樣癌瘤組織的膨脹性生長與上皮鈣依賴黏附素的高表達有關(guān)，非典型髓樣癌瘤組織的浸潤性或灶性生長與上皮鈣依賴黏附素的低表達有關(guān)。上皮鈣依賴黏附素也是與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系最密切的一種細胞因子，特別是對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的乳腺癌患者預后價值更大[6-7]。本實驗結(jié)果顯示乳腺髓樣癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性、臨床分期越低，上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達陽性率越高;相反乳腺髓樣癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性、臨床分期越高，上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達陽性率越低。前者預后明顯好于后者。上皮鈣依賴黏附素可被視為一個獨立的乳腺髓樣癌預后指標。

連環(huán)蛋白是上皮鈣依賴黏附素發(fā)揮正常功能所必需的。上皮鈣依賴黏附素通過α、β、γ-連環(huán)蛋白經(jīng)羥基端在細胞內(nèi)與細胞骨架的微絲連接形成復合體而發(fā)揮功能[8]。β-連環(huán)蛋白是整個復合體功能的主要調(diào)控因子，它的高表達使得上皮鈣依賴黏附素的作用得以充分發(fā)揮[9]。本實驗中，β-連環(huán)蛋白在乳腺典型髓樣癌中的表達陽性率明顯高于非典型髓樣癌，且與上皮鈣依賴黏附素表達強度呈正相關(guān)，提示β-連環(huán)蛋白的表達差異與乳腺典型髓樣癌及非典型髓樣癌不同的生長方式有關(guān)，Charpin等[10]在對髓樣癌的研究中亦認為，典型髓樣癌上皮鈣依賴黏附素及β-連環(huán)蛋白的高表達限制了腫瘤的生長、浸潤，使其預后較好。但近年也有文獻報道，β-連環(huán)蛋白的過表達標志著腫瘤的不良預后[11-13]。因此，β-連環(huán)蛋白能否成為影響乳腺髓樣癌的預后指標尚有爭議。

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