復方伊維菌素乳液的毒性試驗研究

姜曉文，張春燕，于文會*，馮國峰，徐 利

（1.東北農業大學動物醫學學院，哈爾濱 150030；2.哈爾濱和平獸藥有限公司，哈爾濱 150039）

復方伊維菌素乳液是一種口服的廣譜驅蟲藥，其主要成分為伊維菌素和阿苯達唑。伊維菌素為新型大環內酯類抗生素類驅蟲藥，具有廣譜、高效、低毒等優點，對馬、牛、羊、豬的消化道和呼吸道線蟲，馬盤尾絲蟲的微絲蚴以及豬腎蟲等均有良好的驅蟲效果。對馬胃蠅和羊鼻蠅的各期幼蟲以及牛羊的疥螨、癢螨、毛虱、血虱、腭虱以及豬疥螨、豬血虱等外寄生蟲具有良好的殺滅作用[1-2]，是畜牧生產中應用最廣泛和使用量最大的一種廣譜、高效、安全、理想的抗體內外寄生蟲藥物[3]。阿苯達唑，廣泛用于治療及預防人和動物所患的鉤蟲、蛔蟲、鞭蟲、蟯蟲、旋毛線蟲、絳蟲及囊蟲等寄生蟲病[4]。為了獲得更安全高效的驅蟲效果，將動物體內寄生蟲感染率降至更低水平，制成復方伊維菌素乳液。本文通過對復方伊維菌素乳液的毒性試驗研究，為臨床用藥安全提供依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

Wistar大白鼠80只，大白鼠180～220 g，雌雄各半，購自哈爾濱醫科大學實驗動物中心。試驗前，在實驗室環境下飼養7 d。

1.2 主要藥品和試劑

復方伊維菌素乳液（哈爾濱和平獸藥廠提供）；丙氨酸氨基轉移酶（ALT/GPT）試劑盒（購自四川省邁克科技有限責任公司）；天門冬氨酸氨基轉移酶（AST/GOT）試劑盒（購自上海申索佑富醫學診斷用品有限公司）；尿素氮（BUN）試劑盒（購自南京建成生物工程研究所）；肌酐（CR）液體試劑盒（購自西化儀北京科技有限公司）。

1.3 急性毒性試驗

大白鼠40只，隨機分4組，每組10只，稱重，每組分別按 1.5、3、6 和 12 mL·kg－1劑量（LD100=50 mL·kg－1，哈爾濱和平獸藥廠提供數據）一次口服復方伊維菌素乳液，給藥前禁食12 h，給藥后禁食3 h，但要保證正常給水。

觀察試驗大白鼠的臨床癥狀及死亡情況，并計算大白鼠的死亡率（P），按改良寇氏法公式進行計算[5]：LD50=lg－1[Xm－i（∑P－0.5）]，LD50的平均可信限=LD50±（LD50的 95%可信限的高限－低限）/2，LD50的 95%平均可信限=LD50±4.5LD50·SX50，其中 SX50為LD50的標準誤，其中n=各組動物數，ΣP2=各組死亡率平方的總和。

1.4 亞急性毒性試驗

大白鼠40只，隨機分4組，稱重，一組為對照組，其余三組為試驗組，試驗每組分別按0.2、0.4和0.6 mL·kg－1劑量口服復方伊維菌素乳液，對照組以0.6 mL·kg－1劑量灌服生理鹽水，給藥前禁食12 h。連續14 d，停藥后觀察14 d。試驗過程中，觀察試驗大白鼠的臨床癥狀及生命體征。通過眼球采血，檢測血液常規和肝腎功能。剖檢尸體，觀察心、肝、腦、肺、腎、脾、睪丸/卵巢等臟器；取不同臟器組織做病理切片。

1.5 數據處理

試驗數據應用SPSS 13.0統計軟件進行分析，結果用平均數±標準差（X±S）表示。

2 結果與分析

2.1 急性毒性試驗結果

LD50的平均可信限=4.241±1.518 mL·kg－1（見表1）。由表1可知，乳房伊維菌素乳液用藥劑量和大白鼠死亡率呈線性正相關增長。當藥物濃度達到4.241 mL·kg－1時，大白鼠的死亡率到達50%。

表1 LD50試驗數據Table 1 Results of determination of LD50

2.2 亞急性毒性試驗結果

2.2.1 大白鼠的一般狀況及體重變化

中、低劑量組動物采食量無明顯影響，給藥7 d，高劑量組（0.6 mL·kg－1）大白鼠有呆滯表現，且有部分大白鼠出現糞便變軟。在體重變化方面，高劑量組體重下降明顯，與對照組相比差異明顯（P＜0.05），而中、低劑量組與對照組相比，體重變化無顯著差異（P＞0.05）（見表 2）。

表2 對各組大白鼠體重影響的檢測結果Table 2 Effects of ivermectin emulsion compound on rats'body weight

2.2.2 大白鼠血細胞的變化

高劑量組白細胞顯著低于對照組（P＜0.05），中、低劑量組白細胞與對照組相比無顯著差異（P＞0.05）。各劑量組紅細胞（RBC）和血小板（PLT）與對照組比較差異不顯著（P＞0.05）（見表 3）。

2.2.3 大白鼠血液生化指標的檢測結果

高劑量組、中劑量組、低劑量組谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）、肌酐（CR）、 尿素氮（BUN）與對照組比較無明顯差異（P＞0.05）（見表4）。

表3 血液學檢查結果Table 3 Results of blood examination

表4 血液生化檢測結果Table 4 Results of blood biochemistry examination

2.2.4 大白鼠部分臟器病理組織學觀察結果

將試驗組和對照組的大鼠處死后，取心、肝、腎、脾等器官，肉眼觀察未發現明顯出血、壞死等病變。同時對上述組織做組織切片，400倍光學顯微鏡觀察，也未發現組織變性、壞死及間質炎細胞浸潤等病理損害性改變，與對照組比較，均未見明顯差異。結果見圖1～4。

圖1 肝臟的組織切片（HE，10×10）Fig.1 Liver biopsy

圖2 腎臟的組織切片（HE，10×10）Fig.2 Kidney biopsy

圖3 脾臟的組織切片（HE，10×10）Fig.3 Spleen biopsy

圖4 心臟的組織切片（HE，10×10）Fig.4 Myocardial biopsy

3 討論

邵新璽等報道，伊維菌素大鼠急性經口試驗LD50為140 mg·kg-1，在較高劑量時對受試大鼠動物體重及肝、腎、脾功能有一定影響;該送檢藥物亞慢性經口對大鼠最大無作用劑量為0.4 mg·kg-1[6]。徐霞等研究表明，伊維菌素注射劑的LD50為24.2493 mg·kg-1[7]。因為伊維菌素具有廣譜高效性，較高的安全性等優點，在畜牧生產中得到了廣泛的應用。

但是近年來，偶有因用量過大引起動物中毒的報道；少數犬種敏感，正常用量即可出現中毒癥狀；也有個別犬種偶見過敏，引起死亡的報道[8]。為更好地利用伊維菌素的優點，增加藥物療效，進一步降低藥物毒性，人們正致力于改變其劑型或藥物配伍的研究。如伊維菌素脂質體，與其他藥物配伍使用，制成長效注射劑等[7,9]。

阿苯達唑主要對線蟲、絳蟲和吸蟲具較強驅殺作用，是廣譜、高效、低毒的驅蟲藥。為更好地利用伊維菌素的優點，將伊維菌素和阿苯達唑復合用藥，以達到更好的預防家畜體內外寄生蟲病的目的。方悅怡等報道應用國產伊維菌素伍用阿苯達唑治療鉤蟲、鞭蟲、蟯蟲感染效果顯著，對鞭蟲療效明顯優于阿苯達唑，對鉤蟲、蟯蟲療效明顯優于伊維菌素，并且有排蟲快、不良反應少而輕等優點[10]。

復方伊維菌素乳液是以伊維菌素和阿苯達唑為主要成分的是一種新型藥物，為了給臨床用藥提供理論依據，本試驗通過對復方伊維菌素乳液的急性和亞急性毒理試驗對其毒性進行了研究。急性試驗表明該藥毒性弱、毒性反應小，LD50的平均可信限為4.241±1.518 mL·kg-1。亞急性毒性試驗中，中、低劑量組體重、血常規、血液生化指標及組織切片均正常，高劑量組體重及白細胞數低于對照組，但均未見明顯的毒性反應。說明將伊維菌素和阿苯達唑復合用藥，未見其毒性增強的試驗結果。但本次試驗對復方伊維菌素乳液在生殖毒性、致畸、繁殖等方面未進行研究，關于這方面的毒性，今后有待于進一步研究。

4 結論

通過復方伊維菌素乳液的急性和亞急性毒理試驗，表明復方伊維菌乳液毒性弱、反應小，是一種安全的口服驅蟲藥。

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