復方地利乳膏的制備及含量測定

陳立，陳宇星，林佳(.福建醫科大學省立臨床醫學院/福建省立醫院，福州市35000；.福建中醫學院藥學系，福州市35008)

神經性皮炎是一種臨床常見的皮膚功能障礙性疾病，具有明顯的皮膚損害，癥狀主要表現為劇烈瘙癢，故可嚴重影響患者的生活質量。臨床使用地塞米松磷酸鈉與鹽酸利多卡因進行皮下淺層局部注射給藥治療，療效顯著。其中地塞米松磷酸鈉具有抗炎抗過敏的作用，可減輕和防止組織對炎癥的反應，從而減輕炎癥的表現；鹽酸利多卡因作為公認的強效局部麻醉藥，可阻斷神經傳導，用于皮膚局部鎮痛及麻醉，減少劇烈瘙癢給患者帶來的痛苦。但上述給藥方法具有一定的局限性:(1)皮下淺層注射要嚴格掌握其深淺度，患者無法自行給藥；(2)其為創傷性給藥，部分患者會產生恐懼心理從而影響給藥的依從性。因此，將地塞米松磷酸鈉、鹽酸利多卡因作為主成分制成乳膏，可直接涂于神經性皮炎的皮損部位[1]，避免上述給藥方式帶來的局限性。為此，本文就其制備及含量測定方法報道如下。

1 材料

1.1 儀器

LC-2010AHT型高效液相色譜(HPLC)儀(日本島津公司)；pH計(瑞士Mettle-toledo公司)；JB-2型溶液軟膏攪拌器(上海崇明東平醫藥設備廠)；KQ-500B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；TU-1221型紫外-可見分光光度儀(北京普析通用儀器有限責任公司)。

1.2 試藥

地塞米松磷酸鈉標準品(批號:100016-200712，含量:91.1%)、鹽酸利多卡因標準品(批號:100341-200301，含量:93.5%)均由中國藥品生物制品檢定所提供；復方地利乳膏(福建省立醫院自制，批號:20090318、20090319、20090320，規格:每50 g含鹽酸利多卡因0.5 g、地塞米松磷酸鈉0.05 g)；地塞米松磷酸鈉原料藥(天津天藥藥業股份有限公司，批號:DNa081001，含量:98.1%)；鹽酸利多卡因注射液(上海禾豐制藥有限公司，批號:081206，規格:每5 mL含鹽酸利多卡因0.1 g)；三乙胺、甲醇、乙腈均為色譜純；其它試劑為分析純。

2 處方與制備

2.1 處方

鹽酸利多卡因10 g、地塞米松磷酸鈉1 g、單硬脂酸甘油酯70 g、液體石蠟100 g、蜂蠟25 g、硬脂酸80 g、甘油120 g、羥苯乙酯1 g、乳化劑辛基苯酚聚氧乙烯醚(OP)30 g、薄荷醇適量，純化水加至1000 g。

2.2 制備

采用乳化劑后加法，稱取處方量各成分置于同一容器中，加熱至92～95℃，于攪拌器下攪拌，轉速300～350 r·min－1；當溫度降至80～84℃時，加入乳化劑OP，繼續攪拌，待溫度降至40℃以下時，加入薄荷醇，攪拌至冷凝，即得。

3 含量測定[2，3]

3.1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱:HYPERSIL ODS-2(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相:0.75%三乙胺溶液(磷酸調節pH至3.0)-甲醇-乙腈(45∶55∶5)；檢測波長:242 nm；進樣量:20 μL；流速:1.0 mL·min－1。理論板數按地塞米松磷酸鈉峰計大于5000，鹽酸利多卡因大于3000，2主峰與雜質峰的分離度均大于4，2主峰間的分離度大于12。取“3.2”項下3種溶液以及溶劑(流動相)在該色譜條件下進樣，色譜見圖1。

3.2 溶液的制備

3.2.1 標準品溶液的制備:精密稱取地塞米松磷酸鈉標準品約10 mg，置于25 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，得甲液；精密稱取鹽酸利多卡因標準品約20 mg，置于50 mL容量瓶中，并從甲液中精密量取5 mL至上述容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為標準品溶液。

3.2.2 供試品溶液的制備:精密稱取樣品約1 g，置于25 mL容量瓶中，加流動相適量，超聲10 min后，加流動相至刻度；將其置于水浴中加熱30 min后，冷卻至室溫；過濾，取續濾液作為供試品溶液。

3.2.3 陰性樣品溶液的制備:按處方量制備不含2主藥的空白基質，同“3.2.2”項下方法制備，得陰性樣品溶液。

3.3 專屬性試驗

取溶劑(即流動相)與“3.2”項下3種溶液，按“3.1”項下色譜條件進行測定，色譜顯示供試品溶液出現的2主峰與標準品溶液出現的2主峰的保留時間均一致，陰性樣品溶液在2主峰位置處均未出現其它的雜質峰，說明此方法可避免其它成分和輔料的干擾，可用于樣品中地塞米松磷酸鈉與鹽酸利多卡因的含量測定。色譜見圖1。

3.4 線性關系考察

取同一份標準品溶液，以流動相稀釋成含地塞米松磷酸鈉32.38、36.43、40.47、44.52、48.58 μg·mL－1及鹽酸利多卡因304.16、342.18、380.20、418.22、456.24 μg·mL－1的系列濃度溶液，按“3.1”項下色譜條件進樣，記錄色譜，以標準品濃度(C，μg·mL－1)為橫坐標，峰面積(A)為縱坐標，進行線性回歸，得地塞米松磷酸鈉、鹽酸利多卡因的回歸方程分別為A地＝32001C地－18536(r＝0.9999)、A利＝5291.1C利－27668(r＝0.9999)。結果表明，地塞米松磷酸鈉、鹽酸利多卡因檢測濃度的線性范圍分別為32.38～48.58 μg·mL－1、304.16～456.24 μg·mL－1。

3.5 精密度試驗

取同一份標準品溶液，按“3.1”項下色譜條件，連續進樣6次，記錄色譜，以峰面積計算。結果，得地塞米松磷酸鈉、鹽酸利多卡因的RSD分別為0.08%、0.21%，表明進樣精密度良好。

3.6 重復性試驗

取同一批樣品共稱取6份，按“3.2.2”項下方法制備供試品溶液，并按“3.1”項下色譜條件進行測定，以地塞米松磷酸鈉與鹽酸利多卡因的含量計算。結果，地塞米松磷酸鈉、鹽酸利多卡因的RSD分別為0.5%、0.3%(n＝6)，表明方法重復性良好。

3.7 穩定性試驗

取樣品1份，約1 g，按“3.2.2”項下方法制備供試品溶液，并按“3.1”項下色譜條件于0、2、4、6、24 h內進行測定，測得地塞米松磷酸鈉、鹽酸利多卡因的RSD分別為0.05%、0.07%，表明供試品溶液在24 h內穩定性良好。

3.8 回收率試驗

取空白基質9份，約1 g，精密加入不同比例處方量的地塞米松磷酸鈉、鹽酸利多卡因標準品，按“3.1”項下方法測定含量，計算回收率，結果見表1。

表1 回收率試驗結果Tab 1Results of recovery test

3.9 樣品含量測定

分別取3批樣品，按“3.2.2”項下方法制備供試品溶液，再按“3.1”項下條件進樣，測定并計算含量，結果見表2。

表2 樣品標示含量測定結果Tab 2Determination of labeled contents of samples

4 討論

4.1 處方設計

制劑中地塞米松磷酸鈉具有抗炎、抗過敏、免疫抑制等作用，可減輕炎癥表現；鹽酸利多卡因具有較強的彌散力和組織穿透性，可抑制瘙癢與疼痛，且作用快，持續時間長，還可改善局部血流；薄荷醇具有止癢止痛、促透、增強麻醉的作用。三者相輔相成，在減輕炎癥的同時，還能緩解瘙癢、皮損后疼痛的癥狀，另鹽酸利多卡因的改善局部血流作用還可加快皮膚組織的修復。

本品在基質的選擇上采用水包油(O/W)型乳膏基質，該基質質地細膩、有光澤感，具有適當的黏稠性，易均勻涂布于皮膚或黏膜上，不融化，但能軟化。因O/W型乳膏基質具有易洗除、穿透性好、易發揮藥效等作用而成為透皮給藥的理想基質[4]。

本乳膏以硬脂酸與單硬脂酸甘油酯為輔助乳化劑，OP為主要乳化劑。OP制成的乳膏能形成一層乳化膜，增加乳膏的保濕作用，其穩定性高，不易受強電解質、無機鹽類的影響，耐酸、耐堿、耐熱方面均顯示優良特性。因此，由其制得的乳膏穩定性好并具有光澤，表明OP是一種優良的乳化劑[5]。

4.2 乳膏制備

常規的O/W型乳膏的制備，是將乳化劑按其性質加入到相應的水相或油相中。為提高其乳化成功率，本品采用乳化劑后加法制備，即:當油相加入水相充分攪勻后，在攪拌下，加入OP。此法所制得的基質質地細膩、光澤性好，操作輕松、簡便，工藝可控[6]。

由于薄荷醇遇熱易揮發，故本品在制備過程中薄荷醇應以溫度降至40℃時加入為宜。

攪拌速度也是制備乳膏的一個重要方面。攪拌速度過快易產生大量氣泡，過慢又容易析出粗顆粒。曾有報道[7]提出:攪拌速度可按照基質中水相量的多少來調節:量多(水相量大于75%)以300～600 r·min－1為宜，量較多(水相量在65%～75%)以600～900 r·min－1為宜。本處方水相量為72%，考慮到試驗階段為小處方量，其轉速降低為350 r·min－1，制得的乳膏質量良好、性質穩定；在顯微鏡下觀察，乳滴均勻分布，偶見小水泡。

4.3 含量測定

在選擇含量測定方法時，曾利用紫外分光光度法測定本品含量，此法簡單且能在實驗室現有條件下完成，但通過紫外掃描，發現2主分間存在干擾，無法測定。為尋找一種合適、簡便的含量測定方法，經參考2005年版《中國藥典》收載的地塞米松磷酸鈉與鹽酸利多卡因含量測定方法，擬改用HPLC法[8]。在HPLC法的預試驗階段，因考慮到2者的最大吸收波長比較接近，故選擇梯度洗脫進行分離測定，結果，雖然2成分能夠被分離開，但二者分離時間相差甚遠，鹽酸利多卡因在5 min時洗脫出柱，而地塞米松磷酸鈉在20 min才開始洗脫分離。有關資料[9]顯示，在流動相(三乙胺-甲醇-乙腈為55∶40∶5)下，地塞米松磷酸鈉的出峰時間應在6 min左右。考慮到試驗效率等方面問題，決定參考2005年版《中國藥典》，采用2種流動相系統，對2組分分別進行測定[8]。結果發現，2主分在流動相(三乙胺-甲醇-乙腈為55∶40∶5)下也能被洗脫分離，且出峰時間減少；通過微調流動相的比例，發現增加甲醇的量有助于地塞米松磷酸鈉提早出柱，對鹽酸利多卡因則影響不大，故最終選擇(三乙胺-甲醇-乙腈＝40∶55∶5)作為流動相體系。在該流動相體系下，鹽酸利多卡因在4 min出柱，地塞米松磷酸鈉在8 min出柱；2個峰之間還存在一較大吸收的雜質峰，可能為羥苯乙酯。

用HPLC法測定本制劑中2成分含量，不僅專屬性強，精密度、重復性均高，且方法準確、快速。經方法學驗證，表明本法可用于復方地利乳膏的含量測定。

[1]刁雨輝，袁榮剛，周建平.復方利多卡因乳膏體外透皮吸收研究[J].中國藥科大學學報，2002，33(6):489.

[2]沈少林.鹽酸利多卡因乳劑的制備與質量控制[J].中國藥房，2006，17(1):29.

[3]錢方，黃偉.HPLC法測定復方地塞米松乳膏中地塞米松的含量[J].藥學服務與研究，2002，2(4):253.

[4]呂東.皮膚外用軟膏基質變更的考慮要素[J].中國新藥雜志，2008，17(12):1085.

[5]沈鴻，張繼明.乳膏基質不同處方的篩選[J].中國醫院藥學雜志，2005，25(9):877.

[6]李艷民，鄭林，林滔.3種乳化法對水包油型乳膏基質質量的影響[J].中國實用醫藥，2008，3(26):172.

[7]鐘松陽.O/W乳膏基質配制方法的改進及質量考察[J].西北藥學雜志，2002，17(2):75.

[8]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(二部)[S].2005年版.北京:化學工業出版社，2005:185.

[9]范玉峰，詹新衛，胡守蓮，等.HPLC法測定復方地塞米松丁卡因乳膏中醋酸地塞米松和鹽酸丁卡因的含量[J].中國藥事，2007，21(8):596.