紫外分光光度法測定牛黃上清膠囊中膽酸的含量

陳 琦

吉林省長春中醫藥大學附屬醫院(130021)

牛黃上清膠囊是由人工牛黃、薄荷、菊花等19味中藥組成的中藥復方制劑，具有清熱瀉火、散風止痛的功效。臨床上用于治療熱毒內盛、風火上攻所致的頭痛眩暈、目赤耳鳴、咽喉腫痛、口舌生瘡、牙齦腫痛、大便燥結[1]。具有服用劑量少，療效肯定等優點。本品的質量標準收載于《中華人民共和國藥典》(2005版)[1]中。本品中人工牛黃含有效成份膽酸，其含量的測定是控制人工牛黃質量的一個重要指標，但是均未收錄牛黃上清膠囊中膽酸的含量測定方法，只含膽酸的定性鑒別。為能更好地控制本制劑質量，本文采用紫外分光光度法測定牛黃上清膠囊中膽酸的含量。

1 儀器與試劑

德國賽多利斯儀器有限公司BP211D型十萬分之一電子天平，美國瓦里安公司紫外可見分光光度計(Cary 50 UV-Vis)，電熱恒溫水浴鍋(江蘇南通縣通海電器廠)等；膽酸標準品(中國藥品生物制品檢定所)批號為0078-9312，牛黃上清膠囊(A藥業，批號為090813、090821、090830)，硫酸溶液(取水65mL，加濃硫酸50mL，搖勻，即得)。

2 方法與結果

2.1 溶液的制備

2.1.1 標準溶液的制備

精密稱取膽酸標準品25mg，置25mL量瓶中，加60%冰醋酸使溶解，并加至刻度，搖勻。精密吸取5mL，置另一25mL量瓶中，加60%冰醋酸至刻度，搖勻，備用。

2.1.2 樣品溶液制備

取牛黃上清膠囊10粒，精密稱定，求得平均裝量，取內容物研細，精密稱取約相當于5粒內容物的重量，置25mL量瓶中，加60%冰醋酸適量，置70℃水浴中不斷振搖，加熱20min，取出，放冷，過濾，加60%冰醋酸至刻度，搖勻，備用。

表1 精密度考察

表2 重現性考察

表3 回收率實驗結果 mg

表4 牛黃上清片中每片膽酸的含量

2.2 測定波長的選擇

精密吸取膽酸標準液1mL，置具塞刻度試管中，加硫酸溶液14.0mL，搖勻，置70℃水浴中加熱10min，取出放冷，以相應的試劑為空白，掃描，200～800nm波長范圍內測定吸收光譜。結果膽酸對照品溶液在385nm波長處有最大吸收峰，故以385nm為測定波長。

2.3 標準曲線的制備

精密吸取膽酸標準液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分別置具塞刻度試管中，加60%醋酸到l.0mL，再加硫酸溶液14.0mL，搖勻，置70℃水浴中加熱10min，取出放冷，照分光光度法(附錄Ⅴ)在385nm波長處測定吸收度A，以A為縱座標，濃度C為橫座標，繪制標準曲線，得回歸方程為Y = 1.7993 X + 0.0135，r = 0.9996。結果表明，膽酸濃度在0.0386～0.1980mg/mL范圍內濃度與吸收度有良好的線性關系。

2.4 精密度實驗

取膽酸對照品溶液，按上述的方法重復測定6次吸光度的RSD為0.20%，見表1。

2.5 重現性試驗

分別精密吸取膽酸標準液0.6mL 6份，按標準曲線項下操作，測得吸光度的RSD為0.23%，加表2。

2.6 溶液的穩定性試驗

取標準曲線項下的膽酸溶液，按上述條件每間隔20min測定一次吸收度，結果表明在5h內吸收值穩定。

2.7 回收率測定

精密稱取樣品細粉約5粒重量及膽酸標準品約0.3mg，置25mL量瓶中，按樣品溶液制備項下操作，所得濾液按標準曲線項下測定，結果見表3。

2.8 樣品測定

取3批樣品，按樣品溶液制備項下操作，平行制備3份，所得濾液按標準曲線項下測定吸收度，并根據回歸方程計算每粒牛黃上清膠囊中膽酸含量(mg)，見表4。

3 討 論

按方法同時制備空白樣品溶液，在200～800nm的波長范圍內掃描，無紫外吸收，不干擾膽酸的含量測定，故選擇385nm波長作為膽酸的含量測定的檢測波長。

牛黃上清膠囊的原標準中無膽酸的含量測定，為更好控制該品種的質量，經多次測定，牛黃上清膠囊中膽酸的含量限度為不低于0.34mg/片。

通過上述方法學考察，建立了牛黃上清膠囊中膽酸的含量測定方法，使其質量標準更趨嚴謹科學完整，并且該方法簡便快捷，結果準確，重現性好，回收率高，能有效控制牛黃上清膠囊的質量。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典.一部[M].北京:化學工業出版社,2005.