TP-ELISA聯合PCR法在梅毒血清學檢驗上的應用

姜 丹

南京愛爾眼科醫院（210000）

當前應用在梅毒血清學上的檢驗方法主要有梅毒酶聯免疫吸附試驗法（TP-ELISA法）、梅毒膠體金法（SYP法）、梅毒螺旋體制動試驗法（TPI法）、甲苯胺紅不加熱血清試驗法（TRUST法）、熒光密螺旋體抗體吸收試驗法（FTA- ABS法）、梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA法）、梅毒螺旋體抗體明膠顆粒凝集試驗法（TPPA法）和聚合酶反應法（PCR法）等十余種，在臨床實驗室使用的方法一般是TP-ELI SA、TRUST和PCR法，而臨床檢驗室則使用的較少。因為檢驗的方法較多，各種方法在臨床方面的應有價值有一定特殊性，如何將這些方法運用于臨床梅毒的檢測，這是在臨床實驗室當中急切需要解決的重要問題[1]。本次研究對所采用的循證檢驗方法進行了深入的探討，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

依據梅毒診斷的標準，確定梅毒潛伏的早期患者共計19例，Ⅰ期梅毒為10例，Ⅱ期梅毒共計23例，Ⅲ期梅毒共計4例，在經過臨床治愈以后，進行梅毒復查的病例總計12例，進行健康體檢者人數共計30例。

TP-ELISA 試劑是廈門新創生產，TRUST 試劑是上海榮盛生產，而PCR 試劑是由中山醫科大學達安基因診斷中心生產。

1.2 方法

采用TP-ELISA、TRUST和PCR[2]3種方法對上面的71 例標本根據試劑盒上的相關說明書操作，進行平行的檢測。3種方法產生的敏感度、陽性率與特異性的相關計算將分別進行。最后采用的是χ2檢驗來進行各組之間的顯著性檢驗，這種檢驗方法能夠充分顯示出之間的顯著性。

2 結 果

98 例血清標本采用TP-ELISA、TRUST與PCR 方法來進行檢測，其結果見表1。本實驗結果可以發現，使用TP-ELISA、TRUST和PCR 3種方法來檢測梅毒的敏感度，其中TRUST 是最低，PCR最高，其特異性TRUST最低，而TP-ELISA與PCR則全部達到了100%。TRUST 和本次實驗所相關聯的疾病具有明顯交叉反應，產生假陽性，顯示其特異性較差，而對早期梅毒、Ⅰ期與Ⅲ期梅毒反而出現了假陰性，顯示其敏感度比較差。

3 討 論

現代臨床在實驗檢測方面具有很多特點，如多參數分析、自動化、高質量控制、流水線檢測、床邊檢測、微量標本檢測等方便快速，但是我們要看到現代臨床試驗在診斷方面仍然面臨一些挑戰。當前國際醫學界正在關注的熱點是循證醫學，隨著循證醫學的逐漸興盛，在臨床醫學的研究及實踐方面發生了很大的轉變，這也促使臨床治療模式發生了改變。循證醫學的應用面已經擴大到醫療衛生的各個層面之中，產生了很多分類，如循證檢驗醫學、循證內科、循證診斷、循證決策和循證外科等。實行循證檢驗醫學所采用的5個主要步驟是：①明白要進行分析的臨床疑問是什么，在循證醫學的范圍之內要明確臨床中具體的疑問點。②圍繞著具體的疑問來實行系統查閱相關的文獻資料與最新證據，在進行文獻資料的查找時，要注意緊緊圍繞著具體的疑問來展開，這樣能夠將查找范圍進一步縮小，提高針對性。③對相關的數據要實行批判性的評價，對于有用性和可靠性的關鍵參數要進行認真的分析，在對相關數據進行批判性的分析時，要強調上面的談到的有用性與可靠性，以便尋找出最佳的證據。④將已經作出相關評價的結論運用到臨床實踐當中去。在對相關數據進行批判性的評價后，要看這一評價運用到臨床中去的時候，能否起到有效的作用，這也是進行實驗的最終目的。⑤對實驗的臨床實踐實行認真細致評價。實驗的批判性評價在作出以后，要進行臨床方面的大面積推廣，因此必須要對臨床的實踐效果進行認真細致的評價，這樣能夠保證臨床上的實用價值，保證在實際應用中的安全性[3]。

循證檢驗醫學將運用于臨床醫學檢測的經驗進一步上升到了科學的高度，并且能夠解決現代檢驗、診斷等所面臨的多種困難與挑戰。所以，臨床檢驗醫學的研究方面一定要做到科學化，統計的方法一定要正確，只有這樣才能夠為臨床疾病在診治和后期的預防上提供科學有效的證據。檢驗醫學與臨床醫學都應該遵守客觀規律和科學的事實證據，兩者要有機結合在一起，才能進一步推動實驗診斷的發展。目前，檢驗醫學的發展十分迅速，最新的檢測儀器、指標與項目等都不斷出現。新的實驗方面的檢查要進行充分評價，并進一步確定其可靠性，這樣才能夠進一步推動醫療決策的制定和今后經濟效益的著力點，以期待進一步運用到醫療實踐當中。比如說現在使用的全自動生化分析儀和全自動血液分析儀，這兩種儀器取代了以前的手工操作，并將很多種檢測項目所使用的檢測方法也進行了進一步的改進，這使得檢驗的最終結果更為準確、可靠。血凝儀的推廣使用，使內源凝血系統、外源凝血系統與各種凝血因子的實際情況檢測變得更為簡便與快捷。另外PCR技術的使用，使得結核病原體的檢測，從原先的40d逐漸減少到了當前的幾個小時，這些先進的技術在經過了循證以后漸漸推廣到臨床之中，這對臨床方面的作用是非常具備推廣價值的[4]。

表1 98 份血清標本3種方法檢測結果（例）

[1]李成輝,賈乃光.淺論循證醫學[J].中日友好醫院學報,2004,18(2):123-124.

[2]張世英,洪幫興,司徒潮滿等.熒光定量PCR技術在霍亂弧菌檢測中的應用[J].中國公共衛生,2004,19(3):345-346.

[3]劉媛.淺析新形勢下循證檢驗醫學的現實意義[J].西南軍醫,2006,8(2):63-64.

[4]王蘭.如何解決臨床檢驗工作中的常見問題[J].實用醫技雜志,2006,13(23):4196-4197.