噻嗪酮在柑橘和土壤中的殘留分析方法

李小嬌，龔道新，成應(yīng)向，游靈寧

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源環(huán)境學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410028;2.湖南省環(huán)境保護(hù)科學(xué)研究院，湖南 長(zhǎng)沙 410004)

噻嗪酮 (buprofezin)，不屬于苯甲酰脲類化合物［1］，但能抑制昆蟲的幾丁質(zhì)合成，具有很強(qiáng)的觸殺和胃毒作用，對(duì)作物有一定的內(nèi)滲能力。噻嗪酮由噻二嗪類昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑噻嗪酮制成，是蛻皮抑制劑，具有高選擇性、高殺若蟲活性，接觸藥劑的害蟲死于蛻皮期。噻嗪酮對(duì)雄性大白鼠急性經(jīng)口LD50為2 198 mg·kg－1，雄性大白鼠急性經(jīng)皮毒性大于5 000 mg·kg－1，根據(jù)世界衛(wèi)生組織 (WHO)提出的農(nóng)藥毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，噻嗪酮屬于低毒類農(nóng)藥［2］，對(duì)皮膚和眼睛無(wú)刺激作用。噻嗪酮對(duì)鞘翅目、部分同翅目以及蜱螨目具有持效的殺幼蟲活性。可有效地防治柑橘上的蚧科、盾蚧科和粉蚧科害蟲。

我國(guó)2000年的柑橘產(chǎn)量已占世界的11.5%，是世界上三大柑橘生產(chǎn)國(guó)之一，但是出口量不到世界的3%，主要原因就是因?yàn)檗r(nóng)藥殘留超標(biāo)［3］。因此，研究建立噻嗪酮?dú)埩袅康姆治龇椒ㄊ种匾１痉椒ㄒ允兔押捅獮樘崛瑯悠方?jīng)提取、濃縮和定容后直接上機(jī)檢測(cè)，操作步驟簡(jiǎn)單，成本較低，而且方法不僅適用于柑橘，還可對(duì)環(huán)境樣品土壤中的噻嗪酮?dú)埩袅窟M(jìn)行檢測(cè)。國(guó)際食品法典委員會(huì) (CAC)標(biāo)準(zhǔn)，噻嗪酮在番茄中的最大允許殘留量為 1.0 mg·kg－1［4］，我國(guó)限定噻嗪酮在柑橘中的最大殘留限量 (MRL)參照值全果中為0.3 mg·kg－1［5］。

1 材料和方法

1.1 儀器

采用HP-6890型氣相色譜儀 (ECD檢測(cè)器)，SHY-2AS水浴恒溫振蕩器 (江蘇大地自動(dòng)化儀器及環(huán)保設(shè)備廠)，TP-220A電子天平 (湘儀天平儀器設(shè)備有限公司)，SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵(浙江黃巖求精真空泵廠)，布氏漏斗，梨形抽濾瓶，具塞三角瓶，分液漏斗，50 mL量筒，100 mL量筒，50 mL燒杯，100 mL燒杯，1.0 mL、2.0 mL、5.0 mL、10.0 mL移液管等常用實(shí)驗(yàn)儀器。

1.2 試劑

石油醚 (A.R.級(jí))、丙酮 (A.R.級(jí))、氫氧化鈉、鹽酸。

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品:噻嗪酮 (99.6%)。

1.3 分析方法

1.3.1 柑橘樣品提取方法

試驗(yàn)樣品分別取橘皮、橘肉和全果，按四分法取樣勻漿搗碎后供測(cè)。

橘皮、橘肉、全果:稱取已經(jīng)搗碎的柑橘樣品20 g置于250 mL具塞三角瓶中，加入60 mL丙酮，在水浴恒溫振蕩器中振蕩30 min，經(jīng)過(guò)布氏漏斗減壓抽濾，用60 mL丙酮洗滌殘?jiān)统闉V瓶，取全部濾液轉(zhuǎn)入250 mL具塞三角瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至5 mL以下，倒入250 mL分液漏斗中，用10 mL石油醚分2次洗具塞三角瓶，合并洗液至分液漏斗中，再用60 mL濃度為0.25 mol·L－1的鹽酸分3次分配提取，棄去石油醚層，加入16 mL濃度為1 mol·L－1的氫氧化鈉溶液，再用60 mL石油醚分3次提取，合并提取液，用10 g無(wú)水硫酸鈉脫水，在45℃水浴上用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干，用石油醚定容至10 mL，待GC-ECD檢測(cè)。

1.3.2 土壤樣品提取方法

稱取柑橘土壤樣品20 g置于250 mL具塞三角瓶中，加入60 mL丙酮，在水浴恒溫振蕩器中振蕩30 min，經(jīng)過(guò)布氏漏斗減壓抽濾，用60 mL丙酮洗滌殘?jiān)统闉V瓶，取全部濾液轉(zhuǎn)入250 mL具塞三角瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至5 mL以下，倒入250 mL分液漏斗中，用10 mL石油醚分2次洗具塞三角瓶，合并洗液至分液漏斗中，再用60 mL濃度為0.25 mol·L－1的鹽酸分3次分配提取，棄去石油醚層，加入16 mL濃度為1 mol·L－1的氫氧化鈉溶液，再用60 mL石油醚分3次提取，合并提取液，在45℃水浴上用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干，用石油醚定容至10 mL，待GC-ECD檢測(cè)。

1.3.3 氣相色譜檢測(cè)條件

氣相色譜儀:HP6890型，帶電子捕獲檢測(cè)器。色譜柱:HP-5石英彈性毛細(xì)管柱 (5% Pheny1 Methy1 Siloxane，30.0 m ×360 μm ×0.25 μm)，載氣:氮?dú)?(99.999%)，柱溫:210℃，進(jìn)樣口溫度:260℃，檢測(cè)器溫度:260℃，柱流量 5 mL·min－1，補(bǔ) 償 流 30 mL·min－1。 進(jìn) 樣 量:1 μL。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

外標(biāo)法定量 (峰面積):準(zhǔn)確稱取0.010 2 g噻嗪酮的標(biāo)準(zhǔn)品，用5 mL丙酮溶解，再用石油醚稀釋定容至 100 mL，即為 100 μg·mL－1的標(biāo)準(zhǔn)母液，用梯度稀釋法配制成標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，噻嗪酮的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 (x，μg·mL－1) 分別為 0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 μg·mL－1的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，并在選定的GC-ECD檢測(cè)條件下檢測(cè)，測(cè)定出標(biāo)準(zhǔn)工作溶液所對(duì)應(yīng)色譜峰的峰面積 (y)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析和處理得到噻嗪酮的回歸方程式為:y=53.775x－3.165，相關(guān)系數(shù) (R)為0.999 1。這表明，噻嗪酮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液與其相對(duì)應(yīng)的色譜峰面積在所選的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，完全可以用來(lái)進(jìn)行噻嗪酮的定量分析。噻嗪酮的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1所示。

2.2 方法檢測(cè)限

在上述氣相條件下，按照上述樣品的處理方法及檢測(cè)器條件測(cè)得果皮、果肉、全果和土壤中最低檢測(cè)濃度為0.005 mg·kg－1，噻嗪酮的最小檢出量為 1 ×10－11g。

2.3 方法回收率

圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

在空白樣品中，進(jìn)行添加噻嗪酮標(biāo)準(zhǔn)溶液回收率實(shí)驗(yàn)，每個(gè)濃度設(shè)置5個(gè)平行樣，當(dāng)噻嗪酮的添加濃度為0.05、1.0、2.5 mg·kg－1時(shí)，采用選用的分析與檢測(cè)方法測(cè)定噻嗪酮在柑橘和土壤的添加回收率，實(shí)驗(yàn)詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。噻嗪酮在柑橘樣品中的回收率:果皮在95.55%～99.55%;果肉在97.06%～100.84%;全果在96.17% ～97.38%;土壤在95.41%～102.10%。噻嗪酮在柑橘樣品中的標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍:果皮在5.10～6.42 mg·kg－1;果肉在3.30～5.84 mg·kg－1;全果在5.93～8.72 mg·kg－1; 土壤在 2.45 ～ 8.79 mg·kg－1。噻嗪酮在柑橘樣品中的變異系數(shù):果皮在5.12% ～6.72%;果肉在3.30%～6.01%;全果在6.10%～9.07%;土壤在2.45% ～9.21%。噻嗪酮的添加回收率、標(biāo)準(zhǔn)偏差及變異系數(shù)均在農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則允許的范圍內(nèi)，結(jié)果說(shuō)明所選定的方法完全符合農(nóng)藥殘留量分析與檢測(cè)的技術(shù)要求［6－7］。

2.4 氣相色譜圖

如圖2～10所示。

表1 噻嗪酮在柑橘果實(shí)和土壤中的添加回收率

圖2 噻嗪酮標(biāo)準(zhǔn)樣品

圖3 柑橘全果樣品

圖4 土壤空白樣品

圖5 土壤添加樣品

圖6 土壤樣品

圖7 果肉空白樣品

圖8 果肉添加樣品

圖9 果肉樣品

圖10 果皮樣品

3 小結(jié)

采用氣相色譜法測(cè)定噻嗪酮在柑橘和土壤中的殘留量，方法操作比較簡(jiǎn)單，雜質(zhì)干擾能夠得到很好的分離，而且回收率、變異系數(shù)均符合要求，線性關(guān)系良好，能夠滿足農(nóng)藥殘留分析的要求。噻嗪酮屬于低毒類農(nóng)藥，在蔬菜、水果和茶葉等農(nóng)產(chǎn)品中使用較多，所以，研究建立噻嗪酮?dú)埩袅康臋z測(cè)方法顯得尤其重要，對(duì)我國(guó)安全農(nóng)產(chǎn)品的檢測(cè)來(lái)說(shuō)有重要的應(yīng)用價(jià)值。

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