氣相色譜法測定砂仁中乙酸龍腦酯的含量

隆 穎，栗建明

（1.廣東省藥品檢驗所，廣東廣州 510180；2.廣州市藥品檢驗所，廣東廣州 510160)

砂仁為姜科植物陽春砂Amomum villosum Lour.、綠殼砂Amomum villosum Lour.var.xanthioides T.L.Wu et Senjen或海南砂Amomum longiligulare T.L.Wu的干燥成熟果實，具有化濕開胃，溫脾止瀉，理氣安胎的的功效，用于濕濁中阻，脘痞不饑，脾胃虛寒，嘔吐泄瀉，妊娠惡阻，胎動不安。揮發油成分是砂仁重要的藥效物質基礎，其中乙酸龍腦酯為砂仁揮發油中主要成分[1]，具有鎮靜、鎮痛、抗感染、止瀉等藥理作用[2]。筆者采用氣相色譜法建立了乙酸龍腦酯的含量測定方法，并對不同產地的砂仁中乙酸龍腦酯的含量進行測定。

1 儀器與試藥

SHIMADZU GC-2010氣相色譜儀；電子天平（Sartorius CP225D）；KQ-300DA型數控超聲波清洗器；乙酸龍腦酯對照品（中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，批號：110759-200303）；試劑均為分析純；砂仁樣品26批產自廣東、海南、廣西等地。

2 方法與結果

2.1 色譜條件[2]

Agilent DB-1（30 m×0.25 mm，0.25 μm）石英毛細管柱；載氣為高純度氮氣；流速：1.3 ml/min；溫度：100℃，氣化室溫度：230℃；火焰離子化檢測器（FID）；檢測器溫度：250℃。 GC圖譜見圖1。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 取乙酸龍腦酯對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每毫升含0.3 mg的溶液，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備 取砂仁粉末（過三號篩）約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇25 ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率300 W，頻率 40 kHz）30 min，放冷，無水乙醇補足減失的重量，搖勻，過濾，制成供試品溶液。

2.3 線性關系考察

精密吸取乙酸龍腦酯對照品溶液（6.0185 mg/ml），配制成系列對照品溶液。分別精密吸取1 μl，注入氣相色譜儀，按含量測定方法測定，以對照品濃度（X）為橫坐標，測得的峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：Y=1000000X-9636（r=0.9999）。結果表明，乙酸龍腦酯進樣濃度在0.0301～1.2037 mg/ml范圍內與其峰面積呈良好的線性關系。

2.4 精密度試驗

精密吸取乙酸龍腦酯對照品溶液1 μl，連續進樣6次，按照上述色譜方法測定，計算對照品峰面積的平均值為219831.2，RSD=0.4%，結果表明該法精密度良好。

2.5 重現性試驗

同一批樣品適量，按照“2.2.2”項下方法制備樣品溶液，精密吸取1 μl，進樣，按照上述色譜方法測定6次，計算平均含量為10.02 mg/g，RSD=2.0%，結果表明該法重現性良好。

2.6 穩定性試驗

取“2.2.2”項下供試品溶液，分別在放置 0、2、4、6、8、12、24 h后進樣，按照上述色譜方法測定，結果24 h內7次測定平均峰面積為526948.3734，RSD=1.5%。結果表明樣品在24 h內基本穩定。

2.7 加樣回收率試驗

取同一批已知含量（10.0194 mg/g）的樣品6份，各加入一定量的乙酸龍腦酯，按含量測定方法確定，計算乙酸龍腦酯回收率。結果平均回收率為101.30%，RSD=2.20%，見表1。

表1 回收率試驗結果（n=6）Tab.1 Results of recovery test(n=6)

2.8 樣品含量測定

取26批樣品，按照“2.2.2”項下方法制備樣品溶液，分別精密吸取1 μl，注入氣相色譜儀，按上述方法進行測定，結果見表2。

表2 樣品含量測定結果（%，n=3）Tab.2 Content determination results of samples(%，n=3)

3 討論

砂仁藥材收載于《中國藥典》2005年版一部，以其主要成分揮發油含量測定作為質量鑒定的重要指標[3]，但揮發油為混合物，組成和性質均不穩定，作為定量標準不完善。砂仁的主要功效成分為揮發油，而乙酸龍腦酯為砂仁的揮發油中的主要成分。傳統認為砂仁的主要有效成分是揮發油，許多實驗也證實了砂仁揮發油顯著的藥理活性[4-5]。乙酸龍腦酯是砂仁揮發油中的主要成分，含量可高達80%以上[6-8]，又具有與砂仁功效主治相關的藥理作用，這對于砂仁質量研究具有重要意義。

在預試驗中，筆者曾考察了揮發油提取法、超聲提取法、回流提取法以及浸泡過夜提取法等幾種提取方法，結果以超聲提取法效果最佳。本方法操作簡便，測定準確，同時可以消除雜質成分的干擾。

[1]余競光,孫蘭,周立東,等.中藥砂仁化學成分研究[J].中國中藥雜志,1997,22(4):231.

[2]李曉光,葉富強,徐鴻華.砂仁揮發油中乙酸龍腦酯的藥理作用研究[J].華西藥學雜志,2001,16(5):356-358.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].二部.北京:化學工業出版社,2005:177.

[4]邱賽紅,首第武,陳立峰,等.芳香化濕藥揮發油部分與水溶液部分藥理作用的比較[J].中國中藥雜志,1999,24(5):297-299.

[5]王紅武,張明發,沈雅琴,等.砂仁對消化系統藥理作用的實驗研究[J].中國中醫藥科技,1997,4(5):284.

[6]徐國鈞.常用中藥材品種整理和質量研究[M].福州:福建科學技術出版社,1994:633.

[7]徐春明.HPLC法測定鹽酸美他環素片的含量[J].藥學與臨床研究,2008,16(4):121-123.

[8]羅陽.高效液相色譜法測定獸用氧氟沙星注射液中氧氟沙星的含量[J].分析儀器,2008,(6):289-290.