不同產地青風藤中青藤堿的含量比較

瞿發林，董文燊，劉 蓉，楊 婷，湯莉娜

(中國人民解放軍第102醫院，江蘇 常州 213003)

青風藤為防己科植物青藤 Sinomenium acutum(Thunb.)Rehd.et Wils.及毛青藤 Sinomenium acutum(Thunb.)Rehd.et Wils.var.cinereum Rehd.et Wils.的干燥藤莖，主要分布于河南、安徽、江蘇、浙江、福建、廣東、廣西、湖北、四川、貴州、陜西等地[1]。青風藤的主要化學成分為青藤堿、雙青藤堿、木蘭花堿、尖防己堿、四氫表小檗堿、異青藤堿、土杜拉寧、清風藤堿、dl-丁香樹脂酚、十六烷酸甲酯、N-去甲基尖防已堿、白蘭花堿、光千金藤堿，以及β-谷甾醇、豆甾醇。筆者采用高效液相色譜法[2-3]測定了不同產地青風藤的青藤堿含量，報道如下。

1 儀器與試藥

Waters系列高效液相色譜儀，Waters CapLC2487雙λ吸光度檢測器，Empower2數據處理系統(美國Waters公司);FA1004電子分析天平(上海精密科學儀器有限公司天平儀器廠);AE240S型電子分析天平(梅特勒-拖利多儀器有限公司);SB5200型超聲波發生器(上海必能信超聲有限公司)。青風藤(常州市華爾神中藥飲片廠，并經中國人民解放軍第102醫院瞿發林主任藥師鑒定);青藤堿(中國藥品生物制品檢定所，批號為0774-200206);甲醇(色譜純)，乙二胺(分析純)，水(重蒸餾水)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱:Lichrospher C18柱(150 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:甲醇-水-乙二胺(40∶60∶0.2);流速:1.0 mL/min;檢測波長:262 nm;柱溫:30℃;進樣量:20 μL。在此條件下，色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 對照品溶液制備

精密稱取青藤堿對照品12.5 mg，置25 mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液(1 mL含青藤堿0.5 mg)。

2.3 方法學考察

標準曲線繪制:精密吸取對照品溶液 1.0，2.0，4.0，6.0，8.0 mL，分別置10 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，分別編號為1，2，3，4，5號，原液作為6號。照高效色液相色譜法，依次進樣20 μL測定，以進樣量為橫坐標、峰面積為縱坐標，按最小二乘法進行直線回歸，得回歸方程 Y=2×107X-57424，r=0.9998(n=6)。結果表明，青藤堿進樣量在1～10 μg范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗:取青藤堿對照品溶液(1.0 mg/mL)，連續進樣5次。結果峰面積的 RSD為0.99%(n=5)。

穩定性試驗:吸取同一份供試品溶液，分別于0，2，4，6，8 h時進樣20 μL。結果峰面積的 RSD為1.17%(n=5)。

重復性試驗:取江蘇產(批號為070227)青風藤藥材粉末，精密稱取5份，按供試品溶液制備方法制備溶液并依法測定。結果樣品的青藤堿平均含量為8.31 mg/g，RSD為1.37%(n=5)。

加樣回收試驗:精密稱取江蘇產(批號為070227)青風藤藥材粉末6份，約0.25 g，精密稱定，再分別加入青藤堿對照品貯備液，依法制備供試液品溶液并測定含量，計算回收率。結果見表1。

表1 青藤堿加樣回收試驗結果(n=6)

2.4 樣品含量測定

取青風藤適量，粉碎后過三號篩，取藥材粉末約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇20 mL，密塞，稱定質量，超聲處理(功率250 W，頻率20 kHz)20 min，放冷，再稱定質量，用70%乙醇補足減失的質量，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。依法測定，按外標一點法計算含量，結果見表2。

3 討論

結果表明，不同產地的青風藤中青藤堿含量有差異，即使是同一產地，因采集的時間不同含量也有差異。5批青風藤藥材的青藤堿含量最高值為1.90%，最低值為0.58%，差別較大，但都不低于0.5%，符合藥典規定。在試驗中觀察到，青藤堿含量與藥材飲片的色澤有一定關系，飲片表面呈綠褐色的藥材中青藤堿含量較高，呈棕褐色或灰褐色的藥材含量次之，而表面呈灰黃色的藥材含量較低。

表2 不同產地樣品中青藤堿含量(n=3)

采用高效液相色譜法測定不同產地青風藤的青藤堿含量，方法簡便、可靠，為優選藥材提供了參考。

[1]江蘇新醫學院.中藥大辭典(上冊)[M].上海:上海科學技術出版社，1986:1234-1236.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業出版社，2005:135.