牡丹皮水提取物及乙醇提取物的抗菌作用研究

傅若秋，孟德勝，胡大強，龍世林

(第三軍醫大學大坪醫院野戰外科研究所藥劑科，重慶 400042)

牡丹皮為毛茛科植物牡丹 Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮，具有清熱涼血、活血化瘀功效，主治濕毒發斑、癰腫瘡毒、吐血衄血、夜熱早涼等癥[1]。筆者研究了牡丹皮水提取物及不同濃度乙醇提取物對金黃色葡萄糖球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌的抑制作用，報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

牡丹皮500 g(本院中藥房提供)。供試菌種為金黃色葡萄糖球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌(本院檢驗科提供)。普通瓊脂平板、肉湯培養基、葡萄糖酚紅肉湯培養基(本院藥檢室提供)。

1.2 方法

1.2.1 提取方法

取牡丹皮100 g，碾碎，加100 mL蒸餾水浸泡10 min，然后煎煮30 min及20 min各1次，合并煎液，過濾，濃縮至濃度100%(即1 mL藥液含生藥量為1 g)，作為水提取物，備用。

取牡丹皮100 g，共4份，碾碎，分別加50%，70%，85%，95%的藥用乙醇100 mL，回流提取2 h及1 h各1次，合并煎液，過濾，回收乙醇，制成干膏，用無菌蒸餾水調濃度至100%(即1 mL藥液含生藥量為1 g)，滅菌，冷藏，作為乙醇提取物，備用。

1.2.2 供試菌懸液制備[2-3]

將供試菌種接種于普通瓊脂平板，置37℃恒溫箱中培養24 h，用接種環挑取少許供試菌，置肉湯培養管中，37℃培養6 h，再用肉湯調細菌濃度，使之含菌量約為0.5麥氏單位，即得供試菌懸液。

1.2.3 最低抑菌濃度(MIC)測定

采用二倍稀釋法，取13 mm×100 mm滅菌具棉塞的試管9支，編號，在每管中加無菌肉湯培養基2.0 mL，于第1管中加牡丹皮水或乙醇提取物2.0 mL，混勻后取出2.0 mL放入第2管，依此類推，至第9管取出2.0 mL棄去，即牡丹皮提取物被逐步稀釋成1∶2，1∶4，1∶8，1 ∶16，1 ∶32，1 ∶64，1 ∶128，1 ∶256，1 ∶512，往管中加供試菌懸液0.1 mL。每濃度做3個復管。置37℃恒溫培養箱中培養18～36 h，肉眼觀察結果。試管中液體顏色變成黃色為陽性，試管中液體顏色仍呈紅色為陰性。

1.2.4 最低殺菌濃度(MBC)的測定

從上述肉眼觀察的 MIC陰性管中取培養液轉種到瓊脂平板上，置37℃恒溫箱中培養24 h，觀察結果。培養基中無細菌生長的最低濃度即為牡丹皮試液的 MBC。

2 結果

牡丹皮不同提取物的 MIC和 MBC測定結果見表1。可見，牡丹皮水提取物及乙醇提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌具有較強的抑制作用和一定的殺滅作用，其中對金黃色葡萄球菌的抑制和殺滅作用較強。綜合分析抑菌效果，強度大小順序大致為水提取物、50%乙醇提取物、70%乙醇提取物、85%乙醇提取物、95%乙醇提取物。

表1 牡丹皮不同提取物抗菌作用測定結果[MIC/MBC]

3 討論

結果顯示，牡丹皮水提取物及各濃度乙醇提取物對3種常見致病菌均有不同程度的抗菌作用。已有研究表明[1]，丹皮酚可能為牡丹皮抗菌的主要成分。本研究為牡丹皮在臨床細菌感染治療中的應用提供了一定依據。

[1]陰 健，郭力弓.中藥現代研究與應用[M].北京:學苑出版社，1993:363-369.

[2]梁 薇，梁 瑩，應惠芳.桑葉水提物及醇提物抗菌作用的研究[J].時珍國醫國藥，2005，1(8):753.

[3]胡功允，張琪霞，謝旭一.比濁法測定抗生素微生物檢定試驗菌菌液濃度[J]. 西北藥學雜志，1997，12(3):104.