腦卒中患者抗心磷脂抗體檢測的臨床意義

王麗萍 韓丙遵 王洪英

山東省高密市中醫院檢驗科（261500）

抗心磷脂抗體（anticardiolipin antibody，ACA）是一種以血小板和內皮細胞膜上帶負電荷的心磷脂作為靶抗原的一種自身抗體，是直接溝通免疫和凝血兩大生理系統的橋梁之一，是迄今所知直接誘發血液高凝狀態的唯一自身抗體。ACA與腦卒中有關是近幾年血管病免疫功能變化方面的新課題，近年來不少學者認為該抗體與血栓形成、血小板減少、自然流產或宮內死胎等關系密切。但它與腦血栓形成的關系研究報道較少，為了明確ACA在腦卒中發病中的作用，我們應用ELISA法對288例急性腦血管病患者和131例健康體檢者的ACA含量進行了檢測，探討ACA與急性缺血性腦血管病的關系。

1 資料與方法

1.1 病例選擇

290例患者中，腦供血不足患者51例，男29例、女22例，年齡39～78歲，平均年齡（58.6±13.4）歲；短暫性腦缺血發作患者42例，男24例、女17例，年齡35～78歲，平均年齡（55.9±13.4）歲；腦梗死患者131例，男75例、女56例，年齡26～86歲，平均年齡（63.5±15.3）歲；腦出血患者66例，男35例、女31例，年齡35～80歲，平均年齡（59.1±14.5）歲。所有患者均按全國腦血管病學術會議制定的診斷標準確診，腦卒中患者全部經頭顱CT或磁共振(MRI)證實。全部病例均為起病后2周內的住院患者。

1.2 對照組

健康體檢者131例，男性81例，女性50例，年齡26～71歲，平均年齡（57.9±13.9）歲。

1.3 實驗方法

ACA IgG、IgA、IgM試劑盒由美國Trinil公司生產，以酶聯免疫吸附法（ELISA）測定。①待測樣本、標準、陽性對照分別用樣本稀釋液1∶20稀釋；②各孔分別加入樣本、標準、陽性對照、陰性對照各100μL，空白孔加入樣本稀釋液100μL，25℃孵育30min；③用洗滌液（1∶20稀釋）洗3次，每次均需注滿各孔，靜置2min，在吸水紙上扣干；④每孔各加入酶結合物100μL，25℃孵育30min，用洗滌液洗3次，扣干；⑤每孔各加入底物液100μL，25℃孵育15min，加入終止液100μL終止反應，450nm波長酶標儀（荷蘭產Multiskan MK3）讀取OD值，計算結合指數（Bigding Index，BI）。BI=（待測樣本OD-空白OD）/（標準OD-空白OD）×K，K為試劑盒因子系數。報告方式：BI＜0.90為陰性，0.90≤BI≤1.10為弱陽性，BI＞1.10為陽性。

1.4 統計學方法

數據采用SPSS10.0統計軟件處理，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。數據以均數加減標準差（±s）表示。

2 結 果

2.1 腦卒中患者ACA測定結果

131例腦梗死患者中，ACA陽性53例，占40.46%，其中單純ACA IgG陽性30例，占22.90%，ACA IgM陽性16例，占12.21%，二者均陽性7例，占5.34%；42例短暫性腦缺血患者中，僅 ACA IgG陽性1例，占2.38%，與腦梗死組相比有顯著差異（P＜0.01）；51例腦供血不足患者僅ACA IgM陽性1例，占1.96%，與腦梗死組相比有顯著差異（P＜0.01），與短暫性腦缺血組相比無差異（P＞0.05），以上兩組分別與正常對照組相比無差異（P＞0.05）；66例腦出血患者ACA陽性8例，占12.12%，其中單純ACA IgG陽性6例，占9.09%，ACA IgM陽性2例，占3.03%，顯著低于腦梗死組（P＜0.01），但卻高于其他兩組和正常對照組（P＜0.05）。可見，腦梗死患者的ACA陽性率顯著高于非腦梗死患者。所有研究對象均未檢出ACA IgA陽性者。結果見表1。

表1 腦卒中患者ACA測定結果

2.2 ACA陽性與缺血性腦卒中的年齡和梗死灶之間的關系

我們的研究發現，在131例腦梗死患者中，年齡在34歲以下的12例患者ACA均陽性。同時還發現多灶梗死的ACA陽性率為50.9%，較單灶梗死的陽性率26.8%高，二者比較有顯著性差異（P＜0.05）。提示年齡因素參與了腦卒中的發病，對年齡較輕的ACA陽性者應引起重視，積極預防。

2.3 對腦梗死患者發病后第1、第2、第3和第4周分別檢測ACA，結果發現隨著時間的變化，ACA陽性例數逐漸減少，陰性率逐漸增加。將第1周的結果與第2、第3和第4周結果進行比較，除第2周無差異外（P＞0.05），第3和第4周均有顯著性差異（P＜0 01），推測ACA量的變化與腦梗死的轉歸密切相關，即ACA血中含量的減少與病情的發展呈正相關，病初含量高，此后逐漸減少，同時我們的研究還發現，ACA IgA在血液中的含量低，與腦卒中未見必然聯系。

2.4 對131例腦梗死患者在住院期間和出院后2年內進行隨訪，回訪中共再發腦梗死23例，其中第一次發病ACA陽性的55例有17例再發腦梗死，ACA陰性的74例有2例再發腦梗死。ACA陽性的腦梗死患者出院2年內腦梗死的再次發病率為30.91%，遠較ACA陰性患者的再次發病率2.70%為高（P＜0 01）。ACA陽性再發腦梗死的例數與ACA陰性的再發腦梗死例數相比有顯著性差異（P＜0.01）。

3 討 論

3.1 ACA具有抗磷脂活性，可與磷脂的負電或中性部分結合，而磷脂是細胞、許多凝血因子、神經元髓鞘等的主要成分。ACA作用于血管內皮細胞、血小板和神經元膜上的磷脂抗原并與之結合，改變其細胞結構，影響細胞功能，可引起包括偏頭痛、血小板減少、自發性流產、網狀青斑、肺動脈高壓、復發性深靜脈血栓形成、多發性腦梗死和脫髓鞘病等一系列臨床綜合征。ACA與多數帶負電荷的磷脂如磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇等均有交叉反應，而與帶兩性電荷的磷脂如磷脂酰乙醇胺、神經鞘磷脂等則無交叉反應。近年的研究認為，ACA可能與遺傳有關[1]。

3.2 一般認為多種機制參與了血栓形成的過程[2]，ACA引起血栓形成的機制可能是：②ACA與血小板膜磷脂結合，誘發免疫反應，導致血小板膜損傷；②ACA抑制PGI2活性和纖維蛋白原降解，使纖溶系統激活；③ACA選擇性地作用于血小板或血管內皮上的磷脂，抑制花生四稀酸的釋放，使PGI2生成受抑制，從而促進了血小板的聚集；④ACA的IgG部分影響激活的蛋白C（PrC）活性，從而導致PrC抗血凝功能的缺陷，使血液處于高凝狀態，促進血栓形成；⑤當凝血酶原轉化成凝血酶時，需要凝血酶原激活物（包括磷脂、凝血因子Ⅱ、Ⅴ、鈣離子等）的激活，而ACA針對激活復合物中的磷脂發生反應，使磷脂活性喪失，凝血酶原轉變為凝血酶時間延長，導致血栓形成[3]。ACA的這些特征可能與血栓性疾病有關，對其確切機制的深入研究，有可能闡明腦血管病新的發病機制。

3.3 近年來的研究提示，自身免疫可能對動脈粥樣硬化的發生和發展起重要作用，用免疫學方法可以復制出類似人類動脈粥樣硬化的動物模型。據此，Poston及Klimona提出了腦動脈粥樣硬化的免疫損傷學說。另外，在動脈粥樣硬化及高血壓的患者體中也檢出了多種自身抗體。由于動脈粥樣硬化是多種急性腦血管病的共同病理基礎和主要原因，所以腦出血的患者中也會有ACA陽性的患者，我們檢測到腦出血患者的ACA陽性率為10.29%，但大大低于腦梗死組。ACA是血液中獲得性免疫球蛋白的一種，主要為IgG、IgM。ACA中同型IgG比同型IgM陽性率高，文獻報道為82%對11%，一致率為7%[4]。我們的檢測結果也證實了這一點。

3.4 本文通過對血栓性腦梗死患者與腦出血、短暫性腦缺血、腦供血不足及健康對照者的觀察認為，ACA與血栓形成關系密切，ACA陽性患者血栓發生率高，檢測ACA可以是血栓性腦梗死發生的高危人群的篩選試驗，同時也為進行早期預防性干預提供了可能。隨著病情轉歸，腦梗死患者ACA陰轉率也明顯增高，說明ACA與腦梗死的轉歸也密切相關。通過回訪資料顯示，腦梗死患者ACA陽性者2年再發率與陰性者腦梗死再發率對比有顯著性差異，說明ACA陽性的腦梗死患者遠期復發率高。這就為腦梗死患者的轉歸找到一種可能的預測指標，即將ACA陽性患者作為遠期復發的高危人群進行干預。本研究還發現，年齡偏輕的腦梗死患者，ACA陽性率明顯增高，表明ACA參與了該類患者的致病過程。目前認為血栓前狀態與青壯年腦卒中關系甚大，如無明顯原因，特別是缺乏心原性栓塞時，有早發腦卒中家族史或反復缺血史者，均應做ACA檢查。我們對ACA陽性的腦梗死患者，已試用抗凝治療，以求降低腦梗死的發生率，效果如何，有待積累更多的研究資料證明

[1] Levine SR. Recurrent stroke and thrombo-oculusive events in the antiphospholipia syndrome [J]. Ann Neurol,1995,38(1):119.

[2] 田錦勇.抗心磷脂抗體與缺血性腦血管病的關系[J].貴陽醫學院學報,2003,28(3):219-222.

[3] 馬金棟,邰俊榮,高穎,等. 急性冠脈綜合征患者抗心磷脂抗體檢測的臨床意義[J]. 中華急診醫學雜志,2006,15(10):933-935.

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