穩定期支氣管擴張癥患者誘導痰中TNF-α、IL-8的表達及其臨床意義

楊國儒 張紹坤 張 勇 潘建亮 魏本松

支氣管擴張癥是由慢性氣道損傷引起支氣管管壁肌肉和彈力支撐組織結構破壞所引起的一支或多支支氣管不可逆性擴張，臨床表現為反復咳嗽、咳膿性痰、呼吸困難、肺部感染或反復咯血。研究顯示，支氣管擴張癥有3個病理特點即氣道感染、氣道炎癥和酶的活動[1]。以中性粒細胞氣道浸潤為主要特征的慢性炎性反應是所有類型支氣管擴張癥的主要特征之一。氣道炎癥性疾病中，由于炎性因子如TNF-α等的釋放趨化因子IL-6、IL-8等的表達，中性粒細胞的黏附、浸潤，大量活性氧的產生、各種蛋白酶的釋放，最終導致組織的損傷。急性期支氣管擴張癥患者治療前后誘導痰中TNF-α、IL-8的表達水平明顯升高[2]。但穩定期支氣管擴張癥患者氣道炎癥水平究竟如何，為此，我們對40例穩定期支氣管擴張癥患者誘導痰液中IL-6、IL-8、中性粒細胞水平進行測定，并報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取經HRCT確診的穩定期支氣管擴張病例40例，支氣管擴張診斷標準：①反復咳嗽，咳膿痰，咯血病史；年發作次數3次以上。②長期慢性咳嗽，咳膿痰，痰液靜置分3層（上層為泡沫、中層為黏液、下層為膿性物和壞死組織）。③固定部位干濕性音。④胸部高分辨率CT（HRCT）檢查，支氣管壁增厚并柱狀囊狀擴張。穩定期指咳嗽、咳痰、氣短等癥狀穩定，痰培養均陰性。其中柱狀擴張16例，囊狀擴張9例，混合性擴張15例。將40例健康體檢者作為正常對照，其中男21例，女19例，年齡23～52歲（平均41歲）。兩組研究對象的年齡及性別差異無顯著性。

所有入組對象行血常規及紅細胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）、丙種反應蛋白（C-reactie protein，CRP）檢查，測定肺功能，誘導痰液。痰液用2500rmp離心15min，取上清液放入-70℃冰箱保存，記錄誘導痰液中性粒細胞占白細胞百分比（Neu/Leu%）。用酶聯免疫吸附法（enzyme linked immunoabsorbent assay，ELISA）測定上清液中的TNF-α和IL-8的濃度。

1.2 方法

采用SPSS11.5統計軟件進行統計分析，用配對t檢驗比較穩定期支氣管擴張癥患者與正常對照組痰液Neu/Leu%、IL-8 和TNF-α水平的變化，用Dunnett t檢驗比較穩定期支氣管擴張癥患者和正常對照組痰液Neu/Leu%、IL-8、TNF-α水平的變化。直線相關性分析探討穩定期支氣管擴張癥患者痰液中IL-8、TNF-α與Neu/ Leu%和一秒用力呼氣量（forced expiratory volume in a second，FEV1.0）占預計值百分數（FEV1.0%pre）的相關性。取α=0.05為檢驗水準。

2 結 果

2.1 誘導痰中Neu/Leu%水平的比較

穩定期患者痰液Neu/Leu%水平高于高于正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。

2.2 誘導痰中TNF-α水平的比較

穩定期患者痰液TNF-α水平高于正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.01），見表1。

2.3 誘導痰中IL-8水平的比較

穩定期患者痰液IL-8水平高于正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。

2.4 FEV1.0%pre的比較

穩定期患者FEV1.0%pre明顯低于正常對照組（P＜0.01）。

表1 穩定期支氣管擴張癥和正常對照組誘導痰中TNF-α比較（±s）

表1 穩定期支氣管擴張癥和正常對照組誘導痰中TNF-α比較（±s）

組別 例數 Neu/Leu(%)TNF-α(pg/mL)IL-8(pg/mL)穩定期 32 44.20±9.66 48.25±9.52 2.12±0.51正常對照組 28 32.18±4.10 5.69±0.85 0.74±0.09 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

3 討 論

支氣管擴張的形成是支氣管肺組織感染后，炎性細胞不斷積聚并釋放炎性介質，使支氣管壁黏膜充血、水腫、分泌物增多，破壞支氣管壁平滑肌細胞和彈性組織，使管壁日漸失去彈性、出現異常擴張。穩定期支氣管患者其發病基礎為支氣管壁的炎癥損傷和支氣管阻塞的相互作用。炎癥造成阻塞，阻塞又導致感染或引起感染的持續存在，二者相互作用均可導致支氣管局部發生炎性反應。

近年的研究結果顯示，支氣管擴張癥患者支氣管黏膜中有大量中性粒細胞和T細胞的浸潤[3]，深部痰標本發現彈性蛋白酶和中性粒細胞過氧化物酶、IL-6、IL-8、TNF-α濃度升高[4]。中性粒細胞在支氣管擴張癥的發病機制中發揮了中心作用，主要通過釋放毒性產物（如彈性蛋白酶、混合金屬蛋白酶）消化溶解氣道彈性蛋白、基底膜膠原和糖蛋白損傷破壞氣道黏膜的結構和功能[5]?；颊咛抵械膹椥杂驳鞍酌傅乃脚c痰量、肺功能和氣道的細胞因子的表達有相互關系。高濃度IL-6直接損傷血管內皮細胞，促進免疫黏附、微血栓形成，抑制內皮修復，使血管受損及高通透狀態延遲。IL-8是中性粒細胞移行、達到炎癥部位的重要的趨化因子，活化的中性粒細胞自身也產生IL-8，進一步引起中性粒細胞聚集，形成自身的炎癥反應放大回路[6]。因此，減輕支氣管擴張癥氣道中中性粒細胞分泌，IL-6、IL-8的表達是阻斷或減輕支氣管擴張癥氣道炎癥及支氣管肺組織損傷的一個重要環節。

本文通過對40例穩定期支氣管擴張癥患者進行誘導痰液炎性介質測定，結果發現即使穩定期患者咳嗽、咳痰癥狀減輕，咳痰量減少，但其痰液中的IL-6、IL-8及中性粒細胞水平與對照組間差異均有統計學意義（P＜0.05），提示在其病程中始終存在氣道炎性反應，在緩解期IL-6、IL-8及中性粒細胞仍有重要作用，是導致氣道炎癥遷延不愈的重要原因。而穩定期支氣管擴張癥患者痰液中炎性介質水平仍明顯高于正常對照，這就為治療支氣管擴張需要長期抗炎治療提供充足的依據。已有學者對穩定期支氣管擴張患者采用吸入糖皮質激素治療，取得一定療效，而激素的抗炎效應是肯定的[7]。

[1]Tsang KW,Chan K,Ho P,et al. Sputum elastase in steady-state bronchiectasis[J].Chest,2000,117(2): 420-426.

[2]魏本松,楊國儒,潘兆寶.支氣管擴張癥患者痰中IL-8和TNF-α測定的意義[J].濰坊醫學院學報,2008,28(6):511-513.

[3]Watt AP,Brown V,Courtney J,et al. Neutrophil apoptosis,proin fl am matorymediation and cell counts in bronchiectasis[J]. Thorax,2004,59(3):231-236.

[4]Ho JC,TipoeG,Zheng L,et al.In vitro study of regulation of IL-6 production in bronchiectasis[J].Respir Med,2004,98(4):334-341.

[5]吳其標,曹世宏.中性粒細胞彈性蛋白酶在支氣管擴張癥發病中的作用及治療對策[J].國外醫學內科學分冊,2004,31(12):519-521.

[6]Pang G,OrtegaM,Zighang R,et al. Autocrinemodulation of IL-8 production by sputum neutrophils in chronic bronchial sepsis[J].Am J Respir Crit Care Med,1997,155(2): 726-731.

[7]Martinez-Garcia MA,Perpina-Tordera M,Roman-Sanchez P,et al.Inhaled steroids improve quality of life in patientswith steadystate bronchiectasis[J].Respir Med,2006,100(9): 1623-1632.