產(chǎn)共軛亞油酸乳酸菌的選育和鑒定

張 京， 陳存社， 張 穎， 呼 德， 任雅琳

(北京工商大學(xué) 化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院， 北京 100048)

共軛亞油酸(conjugated linoleic acid，CLA)是亞油酸(LA)的位置和幾何異構(gòu)體混合物的總稱(chēng)，在脂肪酸鏈上碳的不同位置有兩個(gè)不飽和的共軛雙鍵. 它是人類(lèi)近20年來(lái)發(fā)現(xiàn)的最重要的功能性脂肪酸之一，具有抗癌[1-2]、促進(jìn)生長(zhǎng)、提高食物吸收率、增強(qiáng)免疫力和減少脂肪沉積[3]、抗粥狀動(dòng)脈硬化[4-5]等多種生理功能. 天然CLA主要存在于反芻動(dòng)物的肉制品和乳制品中，發(fā)酵制品中的CLA含量比相應(yīng)的非發(fā)酵產(chǎn)品中的含量高.

由于乳酸菌兼性厭氧，培養(yǎng)條件易于控制，無(wú)毒安全，同時(shí)乳酸菌含有的亞油酸異構(gòu)酶對(duì)作用底物具有很強(qiáng)的專(zhuān)一性，因此乳酸菌成為了生物合成CLA重點(diǎn)研究的菌種. 目前報(bào)道共有250株乳酸菌具有轉(zhuǎn)化LA生成CLA的能力. Ogawa J.等人通過(guò)研究嗜酸乳桿菌AKU 1137最早提出了亞油酸轉(zhuǎn)化生成共軛亞油酸的機(jī)理[6]. Akinori Ando, Jun Ogawa等人以植物乳桿菌JCM 1551的洗滌細(xì)胞作為蓖麻油酸產(chǎn)生CLA的催化劑，在最適條件下反應(yīng)99 h，5.0 g/L蓖麻油產(chǎn)生2.7 g/L CLA (產(chǎn)率0.027 g/L/h)；反應(yīng)171 h，30 g/L蓖麻油產(chǎn)生7.5 g/L CLA (產(chǎn)率0.044 g/L/h)[7]. 張中義等人也從酸菜汁中篩選出1株生成CLA能力較強(qiáng)的植物乳桿菌，發(fā)酵液中CLA生成量達(dá)到267.5 mg/L[8]. 郭焱等對(duì)徳氏乳桿菌保加利亞亞種1.148 2進(jìn)行誘變處理，篩選出一株共軛亞油酸高產(chǎn)菌株1 616 u，并優(yōu)化其培養(yǎng)條件，使發(fā)酵液中可積累共軛亞油酸最高可達(dá)11.61 mg/L[9].

本實(shí)驗(yàn)采用紫外分光光度法[10-12]，從13株實(shí)驗(yàn)室保存的乳酸菌中篩選具有轉(zhuǎn)化LA生成CLA能力的菌株，并對(duì)其中高產(chǎn)菌株進(jìn)行鑒定. 實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基……