芪芎健腎顆粒對大鼠系膜增生性腎小球腎炎的療效研究

霍淑杰，趙 刃

（1.華北煤炭醫學院研究生，唐山 063000；2.唐山市中醫醫院腎內科，唐山 063000）

芪芎健腎顆粒是臨床治療系膜增生性腎小球腎炎的經驗方，由黃芪、川芎、山藥、山茱萸、澤瀉、茯苓、益智仁、牛膝等組成，具有益腎健脾、活血消腫的功效。為了驗證其抑制炎癥，保護腎臟的作用，筆者做了芪芎健腎顆粒對系膜增生性腎小球腎炎（MSPGN）的實驗，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗藥物 1）治療組：芪芎健腎顆粒，由唐山市中醫醫院制劑室制作，（制劑批準文號：冀藥制字Z20050835）。2）對照組：腎炎康復片，由天津同仁堂集團股份有限公司提供，（國藥準字z10940034）。3）模型組：生理鹽水，由唐山市中醫醫院提供。

1.2 實驗動物 選用Wistar大鼠50只，雄性，體質量150～160 g，由北京維通利華實驗動物有限公司提供，動物許可證編號為SCXK（京）2005—0013，在本院的動物實驗中心的屏障實驗室飼養。

1.3 實驗試劑 完全弗式佐劑，由Sigma公司生產。不完全弗式佐劑，由Sigma公司生產。葡萄球菌腸毒素（SEB），由解放軍軍事科學院生產。牛血清白蛋白（BSA），由Sigma公司生產。

1.4 觀察指標 大鼠24 h尿蛋白定量（日立7150全自動生化分析儀）、腎功能（TGL-16型冷凍低溫離心機）和腎臟病理形態學的改變（超薄切片機、奧林巴斯顯微鏡）。

1.5 實驗方法 實驗動物適應性喂養1周后,按隨機數字表隨機分為5組，空白組、模型組、腎炎康復片組、芪芎健腎顆粒低劑量組(簡稱芪低組)、芪芎健腎顆粒高劑量組（簡稱芪高組），每組10只。除正常對照組外，其余各組參照劉震[1]的報道制備MsPGN模型以牛血清白蛋白20 mg配成水溶液隔日灌胃1次，到12周末。實驗第1天經皮下分點注射完全弗式佐劑0.2 mL（其中含BSA 2 mg），第8天注射不完全弗式佐劑0.2 mL（其中含BSA 2 mg），實驗的第8天和第15天分別從尾靜脈注射葡萄球菌腸毒素（SEB）0.4 mg/kg體質量配成的水溶液各1次。

1.6 給藥方法 從第5周開始，芪芎健腎顆粒低劑量治療組、芪芎健腎顆粒高劑量治療組按藥理學實驗動物給藥方法[2]計算，均以成人劑量（kg體質量）的10倍和15倍灌胃給藥。腎炎康復片組也以成人劑量（kg體質量）的10倍方法給藥，模型組給予相同劑量的生理鹽水。芪芎健腎顆粒低劑量治療組0.5 g/d、芪芎健腎顆粒高劑量治療組0.75 g/d、腎炎康復片組0.24 g/d，在此過程中，根據大鼠的體質量調整劑量。

1.7 統計方法 統計分析使用SPSS 13.0統計軟件處理。計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用單因素方差分析方差齊時組間兩兩比較用LSD法，方差不齊時組間兩兩比較用Dunett’s T3法以P<0.05為有統計學意義。

2 實驗結果

2.1 芪芎健腎顆粒對大鼠系膜增生性腎小球腎炎的尿蛋白治療結果 正常對照組與其他各組比較均有顯著差異（P＜0.05），說明造模成功。其余各組比較無明顯差異，提示造模大鼠病損基本一致，存在可比性。造模后第12周：芪芎健腎顆粒低劑量組、芪芎健腎顆粒高劑量組與模型組相比，大鼠24 h尿蛋白定量顯著少于模型組（P<0.05），有統計學意義；芪芎健腎顆粒高劑量組與腎炎康復片組相比，大鼠24 h蛋白定量有顯著性差異（P＜0.05），有統計學意義。見表1。

表1 24 h尿蛋白定量的改變的比較(±s)Tab.1 Comparison of changes of urine protein in 24 hours(±s)mg/24 h

表1 24 h尿蛋白定量的改變的比較(±s)Tab.1 Comparison of changes of urine protein in 24 hours(±s)mg/24 h

注：與正常組相比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型組相比較，*P<0.05，**P<0.01；與腎炎康復片組比較，＃P<0.05，＃＃P>0.05。

組別空白組模型組芪低組芪高組腎炎康復片組n 1010101010第4周1.1383±0.70484.8454±2.9424△5.0198±2.0646△4.3772±1.6374△4.9172±2.5132△第8周1.6517±1.29625.2165±3.1135△3.1742±2.47992.7716±1.1208△4.6422±2.9826△第12周1.4452±1.46996.3683±1.86003.0650±1.0572*2.1878±1.0428*﹟4.4040±1.7865*

2.2 芪芎健腎顆粒對大鼠系膜增生性腎小球腎炎的腎功能治療結果

2.2.1 尿素氮（BUN）的變化 表2中可以看出，造模后12周，空白組與模型組、治療組及對照組比較BUN均有顯著差異（P<0.05），提示大鼠在造模12周后出現了腎功能損害。芪芎健腎顆粒低劑量組、芪芎健腎顆粒高劑量組、腎炎康復片組與模型組比較，BUN均明顯降低（P<0.05），提示芪芎健腎顆粒低劑量組、芪芎健腎顆粒高劑量組與腎炎康復片組對大鼠腎功能均有一定的保護作用。芪芎健腎顆粒低劑量組、芪芎健腎顆粒高劑量組中BUN含量稍高于腎炎康復片組，但3組比較無明顯差異（P>0.05），無統計學意義。

表2 芪芎健腎顆粒對各組大鼠腎功能檢驗結果的比較(±s)Tab.2 Results of renal function in rats of each group(±s)

表2 芪芎健腎顆粒對各組大鼠腎功能檢驗結果的比較(±s)Tab.2 Results of renal function in rats of each group(±s)

注：與正常組相比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型組相比較，*P<0.05，**P<0.01；與腎炎康復片組比較，＃P<0.05。

組別空白組模型組芪低組芪高組腎炎康復片組n 1010101010 BUN（mmol/L）5.548±0.78467.351±1.0951△6.093±0.9255△*6.070±0.5758△*6.038±0.4258△*CR（μmol/L）43.7±6.7590.6±4.595△57.8±1.989△*51.6±3.204△*63.0±2.357△*

2.2.2 血肌酐（CR）的變化 在CR方面,造模后12周，空白組與模型組、治療組及對照組比較均有顯著差異（P＜0.05），提示大鼠在造模 12 周后出現了腎功能損害。芪低組、芪高組、腎炎康復片組與模型組相比，有顯著性差異（P＜0.05），有統計學意義，說明芪芎健腎顆粒有改善腎功能的作用。芪芎健腎顆粒低劑量組、芪芎健腎顆粒高劑量組與腎炎康復片組比較，雖無明顯差異（P＞0.05），但芪芎健腎顆粒低劑量組、芪芎健腎顆粒高劑量組含量均稍低于腎炎康復片組，尤其是芪芎健腎顆粒高劑量組最少。說明芪芎健腎顆粒對改善腎功能的作用優于腎炎康復片。見表2。

2.3 腎臟組織病理學觀察結果 空白組大鼠腎小球及腎小管均正常；模型組系膜細胞彌漫增生，每個系膜區細胞數平均4～7個，系膜基質增多，系膜區的寬度大于毛細血管直徑，腎小球毛細血管官腔有的受壓變窄或閉塞，有的出現結構破壞，血管消失，腎小管無變形，腎間質無水腫。

芪芎健腎顆粒高劑量組：大鼠腎臟病理得到明顯改善，組織中可見腎小球系膜細胞增多不明顯，每個系膜區系膜細胞大約2～3個，基質增生不明顯，系膜區寬度小于毛細血管直徑，毛細血管通暢，腎小球毛細血管基底膜無異常，腎小管未見變形，腎間質無水腫。

腎炎康復片組：與模型組相比，腎臟病理明顯減輕，與正常組相比，可見部分腎小球系膜細胞和系膜基質輕度增生，系膜區細胞比模型組減少，每個系膜區系膜細胞大約3～4個，系膜區寬度小于毛細血管直徑，腎小球毛細血管管腔受壓不明顯，毛細血管基底膜無明顯改變，腎小管無變形，腎間質無水腫。

3 討論

目前對系膜增生性腎小球腎炎的藥物治療臨床上西醫對輕癥患者采用對癥治療，重癥以糖皮質激素、細胞毒藥物等及對癥治療方法，存在一定的毒性和不良反應如糖皮質激素易造成血糖及血壓升高，久服后易出現股骨頭壞死；細胞毒藥物易造成肝功能異常、白細胞減少等，因此，人們把目光轉向中藥。中藥毒副作用低，能提高機體免疫力，不易產生耐藥性，為近年來研究的熱點。

系膜增生性腎小球腎炎，中醫辨證多屬“水腫”、“腰痛”等范疇，本病起病緩慢，反復發作，日久遷延不愈，導致脾腎氣虛。脾、腎臟腑功能失調，脾虛運化水濕功能失調，則水濕泛濫、溢于肌膚發為水腫；腎主水，腎氣虛氣化不利，則水無以制而發為水腫。腎氣虛，腎失封藏，精微不能固澀而下流則小溲泡沫增多（蛋白尿）。氣虛無力推動血行，加之久病入絡，造成瘀血內阻腎絡，腰失所養則出現腰痛。治療以健脾益腎，活血消腫為主，以扶正祛邪。黃芪補益脾腎，益氣升陽?！秲冉洝酚性啤瓣柼搫t寒”、“久病成瘀”，故用川芎行氣化瘀，活血通絡，黃芪與川芎共為君藥。山茱萸補肝固精，山藥健脾養胃，補肺益腎且瀉利濕，澤瀉利尿補陰益氣，清濕熱，可治由腎陽虛，下元溫煦氣化失職的水腫。茯苓既可滲濕利水，增澤瀉之效，又可健脾寧心助山藥黃芪之功。益智仁暖腎固精縮尿，又可溫脾止瀉攝唾。故可治療氣虛腎失封藏、精微不能固澀而下流的泡沫。牛膝具有活血通經補肝腎、強筋骨、利尿通淋引血下行作用。各藥合用，使之滋補而不留邪，降濁而不傷正，補中有泄，寓泄于補中，相輔相成。筆者通過大鼠模型觀察芪芎健腎顆粒對系膜增生性腎小球腎炎的療效，并與全國公認的治療慢性腎炎的中成藥腎炎康復片進行對照，由實驗結果發現，高、低劑量組芪芎健腎顆?？梢燥@著降低蛋白尿，血肌酐、尿素氮的含量，改善腎臟病理組織，說明芪芎健腎顆?？梢越档偷鞍啄?，抑制系膜細胞增生和基質的增多，提高人體免疫力，保護腎功能。

[1] 劉 震,周樹錄,譚建三，等.大鼠系膜增殖型腎小球腎炎模型的改[J].華西醫科大學學報,1996,27(2):182-183.

[2] 徐叔云.藥理實驗方法學 [M].北京：人民衛生出版社，1991：1535-1536.