乳腺癌 COX-2、bFGF的表達及臨床意義

王 新,許秋實,李 壯,王 博,周 昱

(1.佳木斯大學附屬第一醫院腫瘤科,黑龍江 佳木斯 154003;2.佳木斯大學2007級普外專業研究生,黑龍江 佳木斯 154007)

環氧化酶(cyclooxy genase,COX)是前列腺素(prostaglandinum,PG)[1]生物合成過程中的一個關鍵酶,廣泛存在于核膜和微粒體膜上,在生理條件下不表達或低表達,而在病理狀態下呈高表達,經研究表明 COX-2及其催化產物參與多種惡性腫瘤的發生和發展。為探討 COX-2 bFGF與乳腺癌的關系及臨床意義,我們采用免疫組化染檢測 COX-2、bFGF在乳腺癌組織中的表達情況,并對其表達與臨床病理各因素之間的關系進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選材2004— 03～ 2005— 03在佳木斯大學附屬第一醫院手術切除并經病理證實的原發性乳腺癌組織石蠟包埋標本38例。病人均系女性 ,年齡29～ 70歲 ,平均53歲 ,術前未經抗腫瘤治療。另在乳腺組織良性病變中取材20例正常乳腺組織作對照。并根據國際抗癌聯盟(UICC)和美國腫瘤聯合會(AJCC)聯合制定的 TNM分期法[2]分為 I期 10例,Ⅱ 期19例,Ⅲ期9例 ,其中有淋巴轉移者 20例;另按乳腺癌 SBR癌組織 (細胞 )學分類標準[3],分為 I級 12例 ,Ⅱ 級 14例,Ⅲ 級12例。

1.2 實驗方法及結果判定

1.2.1 COX-2組

①SP法免疫組織化學染色[4]：1)首先脫蠟和水化;2)PBS沖洗15min;3)滴加在 3%的過氧化氫;4)PBS沖洗15min;5)抗原修復;6)沖洗15min;7)滴入山羊血清封閉液;8)滴加Ⅰ 抗 (鼠抗人環氧化物酶 -2單克隆抗體 );9)沖洗15min;10)滴加羊抗小鼠 IgG二抗;11)再次沖洗 15min;12)DAB顯色 10min;13)PBS沖洗10min;14)蘇木精復染2min;15)進行后期制作。

②結果判定標準：選用 Fromowitz分級法[5](A)根據染色深度不同計分,不著色為0分;淡黃色 1分;棕黃色2分;棕褐色或強烈著色者記為 3分。(B)陽性細胞數量計分：低于5%為0分,6%～ 25%為 1分,26%～ 50%為2分,51%～ 75%為3分,大于75%為4分。(C)最后將染色強度記分與陽性細胞數量百分比記分相加之和再分為4級：強陽性(+++)6～ 7分 ,中等陽性 (++ )4～ 5分 ,弱陽性 (+ )2～ 3分 ,陰性 (-)0～ 1分。

1.2.2 bFGF組

①實驗方法：SP法免疫組織化學染色,方法同 COX組;使用 A10782R兔抗人 bFGF多克隆抗體一抗代替鼠抗人COX-2單克隆抗體;羊抗兔 IgG二抗代替羊抗小鼠 IgG二抗。②結果判定標準：方法同 COX組。

1.3 統計學處理

使用 SPSS11.5軟件統計實驗結果。對 COX-2、bFGF、VEGF表達與臨床病理因素關系的數據處理及 COX-2與bFGF表達關系的數據處理采用卡方檢驗。

2 結果

2.1 COX-2和 bFGF在乳腺癌中的表達及其與臨床病理參數的關系

分析對 COX-2、bFGF的表達情況及其與乳腺癌臨床病理特征之間的相互關系 ,結果表明：COX-2、bFGF、的表達與腫瘤體積、臨床分期、病理分級、淋巴結轉移情況關系較為密切,而與腫瘤的發病年齡無明顯相關性(見表1)。

表1 COX-2和 bFGF在乳腺癌中的表達及其與臨床病理參數的關系

2.2 乳腺惡性腫瘤中 COX-2陽性表達與 bFGF陽表達之間的關系

通過對 COX-2和 bFGF免疫組化驗查的數據進行分析,結果表明：二者在乳腺組織惡性腫瘤中的的表達呈高度的一致性即在 COX-2高陽性表達率組,bFGF因子的陽性表達率也相對較高(詳見表2)。

表2 乳腺癌中 COX-2的表達與 bFGF表達間的關系

3 討論

乳腺癌在婦女群體中的發病率中僅次于子宮癌,已成為現代社會女性健康的第二大殺手,是女性最常見的惡性腫瘤之一,嚴重影響婦女身心健康。每年全世界約50萬婦女死于乳腺癌 ,其中僅在我國死亡人數就超過 5萬[6]。并且隨著人們生活水平的日益提高,月經初潮的提前、生育、哺乳的減少,近年乳腺癌發病率逐年增長,這一趨勢引起了人們越來越多的重視。近年來臨床病理學研究表明：早期發現、早期診斷、早期治療,是治愈乳腺癌的關鍵手段。目前,COX-2、bFGF的表達與乳腺癌間關系研究尚少,其具體機制亦不完全清楚。因此,在本實驗的目的即研究 COX-2、bFGF在乳腺癌中的表達和臨床病理意義。在試驗過程中使用 S-P免疫細胞方法檢測了38例乳腺癌組織和20例乳腺正常組織中 COX-2、bFGF的表達情況,結果發現 COX-2、bFGF與乳腺癌患者的腫瘤直徑、臨床分期、組織學分級、淋巴結轉移關系密切。綜合分析 COX-2和 bFGF在乳腺癌中的表達情況對乳腺癌的研究具有重要的意義,通過抑制 COX-2和 bFGF的高表達來抑制乳腺癌的發生、發展、增殖、轉移可能會成為一項有效的乳腺癌輔助治療措施。

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