惡性黑色素瘤主動特異性免疫治療的臨床研究

西安交通大學醫學院第一附屬醫院腫瘤外科(西安710061)常東民 張 勇 陳德強 朱 琨 李 康 黨誠學

惡性黑色素瘤是(Malignant melanoma,MM)一 種惡性程度很高的腫瘤,其源于神經嵴黑素細胞,絕大多數發生于皮膚,占人體惡性腫瘤的 1%～ 2%,近年其發病率在世界范圍內呈增高趨勢[1～3]。傳統治療方法為早期廣泛手術切除,對于復發轉移患者可給予氮烯咪胺 (DTIC)、順鉑 (DDP)、卡莫司汀 (BCNU)和三苯氧胺等聯合化療及配合中醫藥治療[4]。上述方法雖然有一定療效,但對總的生存影響不大[5],2004年2月～2006年 5月,我科在經前哨淋巴結活檢證實不伴有區域淋巴結轉移的肢端惡性黑色素瘤患者中,采用冷凍后瘤苗回植聯合免疫佐劑及生物制劑的主動特異性免疫治療,取得了較好的臨床療效,現報道如下。

資料與方法

1 一般資料 45例經前哨淋巴結活檢陰性的肢端惡性黑色素瘤患者,男 27例,女 18例。 年齡21～ 69歲,中位年齡 39歲。原發灶位于甲床 2例,足底 31例,足趾背側12例,均為臨床Ⅰ期。 45例患者隨機分為觀察組28例和對照組17例,兩組一般臨床資料及病理學特征無顯著性差異,具有可比性。

2 研究方法 觀察組 28例采用冷凍后瘤苗回植聯合免疫佐劑及生物制劑治療。方法:冷凍破壞術:采用液氮冷凍破壞術,傾注浸泡法。1次冷凍包括6～ 8個快凍慢融周期,冷凍范圍超過病灶 1～ 1.5cm。冷凍瘤苗埋藏術:冷凍破壞癌瘤后將其切除并進一步冷凍滅活制成瘤苗,置無菌液氮罐中冷凍保存,術后1周、3周及 5周定期進行冷凍瘤苗回植患側腹股溝皮下埋藏術。以短小棒狀桿菌菌苗為佐劑[1,5]。生物治療:INFα 300萬 u,每周一、三、五用藥;IL-2 200～ 400萬 u,每周二、四、六用藥 ,共用藥 6～8周。對照組 17例患者用常規手術切除聯合生物制劑治療,INF α300萬 u,每周一、三、五用藥;IL-2 200～ 400萬 u,每周二、四、六用藥 ,共用藥 6～ 8周[1,5]。

3 觀察指標及統計學方法 治療前兩組均進行免疫功能檢查、T淋巴細胞亞群檢測(CD3、CD4、CD8)。2個月后兩組同時復查上述指標,并評價兩組3年總生存及無瘤生存率。采用 SPSS 13.0進行數據管理及統計分析。數值變量資料用均數±標準差表示。組間比較采用卡方檢驗,組間總生存及無瘤生存率采用Log-Rank檢驗。

結 果

1 兩組生存率比較 見表 1。觀察組比對照組中位存活時間顯著延長(P＜0.05)。觀察組3年總生存期(91.3%)及無瘤生存期 (87.5%);高于對照組的 71.3%及 54.7%(P均 ＜0.05)。

2 兩組免疫功能比較 見表 2。觀察組 CD3、CD4、CD4/CD8較對照組明顯升高(P均 ＜0.05)。

表1 兩組生存率

表2 兩組免疫功能

討 論

惡性黑色素瘤是一種免疫性腫瘤,其發生發展與機體免疫功能狀態有關,在治療方面除手術切除聯合放化療以外,免疫治療已成為主要措施。 Livingston[6]1995年首先用體外培養的黑色素瘤細胞制成疫苗并成功地用于臨床,開辟了對惡性黑色素瘤主動特異免疫治療廣泛而深入的研究。我們采用冷凍后瘤苗回植聯合免疫佐劑及生物制劑治療惡性黑色素瘤,結果顯示此療法可以提高患者中位生存率、3年總存活率及無瘤生存率,明顯優于常規手術切除聯合生物制劑治療。腫瘤瘤苗能激發機體產生特異性主動免疫效應,誘導免疫記憶應答,即誘導長壽命的抗腫瘤抗原的 T細胞,從而加強對腫瘤細胞的免疫監視功能,擴大高度免疫的 T細胞群。本組28例惡性黑色素瘤患者經自體瘤苗回植治療后 CD4水平升高、CD4/CD8比值增大,提示細胞免疫功能增強。

冷凍免疫作為一門新興的醫療技術在惡性腫瘤的治療中得到了迅速發展。低溫生物學研究表明,瘤細胞經冷凍滅活后,除失去其活力外還可釋放腫瘤特異性抗原激發宿主機體對該抗原的免疫應答。這些免疫應答具有嚴格的腫瘤和組織特異性。臨床應用表明,冷凍治療惡性黑色素瘤除了利用液氮低溫破壞受冷凍癌瘤組織外,同時還借助冷凍破壞癌瘤組織激發荷瘤縮主對該腫瘤的免疫效應,起到防止癌瘤細胞的轉移、擴散,甚至消除殘留癌瘤組織以及存在遠處轉移灶。短小棒狀桿菌等佐免疫佐劑的同時應用明顯改善了冷凍惡性黑色素瘤抗原免疫原性弱的問題,同時給予干擾素、白介素等生物制劑,進一步增強機體的免疫應答,激發單核細胞和巨噬細胞的活性,將可溶性抗原提呈給免疫效應細胞,從而殺死腫瘤細胞[7]。

冷凍免疫治療惡性黑色素瘤的臨床應用中尚未見嚴重的毒副作用的報道,說明其具有可靠的臨床安全性。復習以往文獻,盡管冷凍免疫在惡性黑色素瘤治療方面取得較好的效果,但作為一種主動特異性的治療手段,仍需進一步探索更高特異性和更強免疫原性的疫苗制劑,研發更為有效的免疫佐劑藥物及輔助生物藥物才能使惡性黑色素瘤治療獲得更大的進展。

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