兩種刺五加提取物對大鼠腦缺血/再灌注損傷后SOD和MDA水平的影響

張凱波 吳松泉

浙江省麗水學院醫學院（323000）

刺五加提取物和刺五加注射液在臨床上廣泛應用，具有明顯的抗腦缺血/再灌注損傷作用[1,2]。但同時亦有報道稱刺五加注射液引起各類不良反應及過敏反應[3,4]。探究其原因除了患者個體差異外，主要是因為刺五加制劑成分復雜，輸液過程中產生微粒變化。因此解決這一問題的關鍵是確定刺五加提取物中抗腦缺血/再灌注損傷的有效成分。本實驗以兩種不同的刺五加提取物分別干預腦缺血/再灌注損傷的大鼠，觀察自由基滅活酶和自由基產物的變化，以推斷刺五加抗腦缺血/再灌注損傷的有效部位。

1 材料與方法

1.1 實驗藥物

刺五加總黃酮和刺五加去總黃酮提取物，原藥材購自寶豐藥業，刺五加總黃酮和刺五加去總黃酮提取物由黑龍江中醫藥大學藥物研究所提取。

1.2 試劑

SOD臨床檢測試劑盒、MDA檢測試劑。

1.3 動物分組

SD大鼠32只，（300±20）g，雌雄各半，隨機分為4組，每組8只，分別為A組（模型組），B組（刺五加總黃酮組），C組（刺五加去總黃酮提取物組），D組（假手術組）。

1.4 給藥方法及動物模型制備

A、D兩組給予生理鹽水灌胃，B組C組分別以刺五加總黃酮和去總黃酮提取物灌胃，給藥劑量按體表面積比例計算得18mL/kg。各組均連續給藥1周后禁食不禁水24h后參考longa[5]方法并加以改進造大腦中動脈閉塞（MCAO）局灶性腦缺血模型，3h后拔出線栓實現再灌注，立即斷頭取腦。以1∶10比例制成腦組織勻漿，－4℃保存備用。

1.5 觀察指標與檢測方法

腦組織SOD含量以黃嘌呤氧化酶法測定。腦組織MDA含量以改良八木國夫法[6]測定。

1.6 數據處理

2 結 果

如表1所示，與D組比較A組大鼠腦組織SOD明顯下降，MDA水平明顯上升（P＜0.05）。與A組相比，B組大鼠腦組織SOD有顯著提高（P＜0.05），MDA水平顯著下降（P＜0.05）；C組大鼠腦組織SOD、MDA水平也有一定變化，但與A組比較無顯著性差異（P＞0.05）。

表1 局造性腦缺血/再灌注后各組SOD和MDA水平（±s）

表1 局造性腦缺血/再灌注后各組SOD和MDA水平（±s）

★與D組比較P＜0.05；* 與A組比較P＜0.05；☆A組比較P＞0.05

組別 n SOD（NU/mL） MDA（nmol/mol）A組 8 40.32±2.54★ 7.57±1.88★B組 8 56.57±2.83* 5.43±1.54*C組 8 42.13±1.96 ☆ 4.41±1.67☆D組 8 63. 48±3.23 1.79±0.85

3 討 論

腦缺血/再灌注損傷初期使機體爆發性產生了大量的自由基，清除自由基系統因此受到消耗和抑制，表現為超氧自由基清除劑活力迅速下降。SOD對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用，此酶能清除O2·，保護細胞免受損傷。SOD是體內主要的自由基清除劑，MDA是氧自由基與生物膜多聚不飽和脂肪酸發生脂質過氧化的產物，其產生量與氧自由基的量相平行，因而測定MDA最可反映氧自由基的水平，間接反映出細胞損傷的程度。腦缺血/再灌注損傷引起了整個機體氧化抗氧化系統的失衡，SOD和MDA參與了整個機體對腦缺血/再灌注損傷的反應，并與損傷的病程發展密切相關[7]。SOD活力與MDA含量在理論上是互相牽制，此消彼長的關系，SOD和MDA水平變化一方面是自由基清除和生成水平的直接體現，另一方面可以較好地反映腦神經細胞的損傷、修復情況。

本實驗中模型組大鼠腦組織SOD和MDA水平與假手術組比較有明顯變化驗證了這一理論。同時我們可以看到B組與A組比較，刺五加總黃酮能有效提高腦組織SOD含量，同時降低MDA水平，二者有比較有顯著性差異。而C組與A組比較雖然有數字的變化，但二者間在統計學上無顯著性差異。因此我們認為從影響自由基代謝的角度看，刺五加總黃酮具有抑制有害自由基產生、誘導自由基滅活酶生成的作用，是刺五加抗腦缺血/再灌注損傷的有效部位。

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