Fascin蛋白及 NF-kB在宮頸鱗癌中的表達及其意義

韓耀偉,佟麗波,余繁榮

(佳木斯大學附屬第一醫院婦產科,黑龍江 佳木斯 154003)

隨著分子生物學技術的發展,同時存在的分子事件基因表達亦逐漸被認識,從中明確腫瘤的發生發展、侵襲和轉移是一個多步驟、多階段及多基因參與的分子生物學變化過程。fascin蛋白是一種結構獨特、進化保守的細胞骨架蛋白,是近年來腫瘤研究領域的熱點之一。它定位于細胞質、絲狀偽足、微棘中 ,在細胞內與 f-肌動蛋白結合,參與細胞與細胞之間、細胞與基質之間的相互作用,有助于細胞的遷移和運動。N F-kB廣泛存在于人體組織細胞中,通常與其抑制蛋自 IkB相結合,并以非活性狀態貯存于細胞質中。在諸如生長因子、致炎細胞因子、免疫受體、病毒與病毒蛋白等刺激因子作用下激活。從而在免疫、炎癥、細胞的生存、增殖分化和凋亡等方面起到廣泛而重要的作用。本課題主要以免疫組化方法聯合檢測 fascin蛋白和 N F-kB正常宮頸上皮組織、宮頸上皮內瘤變及宮頸鱗癌上皮組織中的表達,進一步探討fascin蛋白和 NF-kB在宮頸鱗癌組織表達的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集佳木斯大學第一附屬醫院病理科2004～ 2009年臨床和病理資料完整的22例宮頸鱗癌根治術組織標本,取材部位為腫瘤組織中心和10例標本切緣正常宮頸組織,28例宮頸上皮內瘤變病變組織。

1.2 主要試劑

鼠抗人 fascin單克隆抗體;兔抗人 NF kappa B/p50蛋白免疫組化多克隆抗體;SP免疫組化試劑盒(即用型 )。以上均為美國 Maxim公司產品,前者購自北京康為世紀生物有限公司,后二者購自福建邁新生物技術開發公司。

1.3 方法

所有標本均為手術切除新鮮標本,取材后中性甲醛固定,石蠟包埋,厚 4 μm連續切片,行 HE及免疫組織化學染色。

1.4 結果判定

fascin蛋白和 NF-KB抗原陽性物質呈棕黃色顆粒狀,fascin蛋白主要定位于細胞漿中;N F-KB主要定位于細胞漿中。染色結果判定參照1996年全國免疫組化技術與診斷標準化專題研討會意見:＜25%的細胞著色,陰性(-);25%～ 50%的細胞著色,弱陽性(+ );51%～ 70%的細胞著色,中度陽性(++);＞70%的細胞著色,強陽性(+++)。

1.5 統計方法

采用 SPSS11.0軟件包統計數據結果,具體應用i2檢驗。相關分析采用 Spearman等級相關。

2 結果

2.1 fascin蛋白和 N F-kB在宮頸鱗癌不同部位的表達

fascin蛋白、NF-kB的表達與宮頸鱗癌臨床病理因素的關系,見表1。

表1 fascin蛋白在三種不同宮頸上皮中的表達

2.2 fascin蛋白與 N F-KB表達的相關性

見表2。

表2 fascin蛋白、NF-kB在宮頸鱗癌組織表達的相關性

3 討論

本研究對標本進行免疫組化等實驗分析,發現在不同分化程度及臨床病理分期的宮頸鱗癌以及正常組織的腫瘤標志分子的不同表達,來了解宮頸鱗癌發生、發展的可能分子機制。fascin表達增高可以引起細胞膜的突起增多,且多表達于微棘以及遷移方向的最前緣,可引起細胞間黏附連接的解聚和細胞相互黏附活性減少[1～3],上述生物學特性決定了fascin蛋白可能參與多種腫瘤的侵襲與轉移。Fascin蛋白表達上調可作為一些癌癥判斷預后的標志,目前關于 fascin與腫瘤預后關系的研究較多 ,如在胃癌、大腸癌、食管癌、肺癌、乳腺癌、皮膚癌等惡性腫瘤的預后研究中,fascin的高表達常提示分化程度低及預后差。1986年 Sen和 Baltimore首先發現 NF-kB并對其進行了描述。N F-kB是最先在成熟的 B細胞中被發現的一種核蛋白。N F-kB通常與其抑制蛋白IkB相結合,并以非活性狀態貯存于細胞質中。N F-KB(IkB)激活作用的刺激因子涉及范圍很廣,主要包括生長因子 (如 N GF、 GM-CSF)、致炎 細胞 因子 (如 IL-1、 TN F-a)、免 疫 受體 (如 CD40、 FasL)、 神 經毒素、細菌 及其產 物LPS、病毒與病毒蛋白及某些理化因素 (如紫外線)等[4～7]。本研究還發現,fascin蛋白與 NF-KB在宮頸鱗癌細胞的表達呈正相關,即 NF-KB陽性率越高,fascin蛋白陽性率也高,從而可以推測 fascin蛋白與 NF-KB在宮頸鱗癌的發生、發展過程中存在相互關聯、共同作用。這是應該由于 fascin基因的啟動子和第一個內含子有22個 NF-kB和24個 TATA核心因子 (TATA core factor,TCF)的結合位點,轉錄因子與fascin基因的位點結合后 ,促進其轉錄,從而導致 fascin表達上調,進而促進宮頸鱗癌的浸潤和轉移。所以聯合檢測 fascin蛋白與 N F-KB在判斷腫瘤生物學行為及預后方面有更大意義。

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