微血管生成在腦膠質瘤中央與外周分布關系的探討

羅勇 林少華

（中山市第一人民醫(yī)院神經(jīng)外科 廣東中山 5284000）

眾所周知,腫瘤的生長、轉移是血管依賴性的。腦膠質瘤生長同樣也依賴于持續(xù)和廣泛的新生血管生成，而腦膠質瘤又不斷刺激新生血管生成以保證其生長。本研究采用免疫組化SP法檢測微血管密度MVD在腦膠質瘤中央及外周的計數(shù)情況，運用統(tǒng)計學進行分析比較，探討微血管生成在腦膠質瘤中央及外周的分布關系，為了解腦膠質瘤侵襲性生長的生物學行，并在以微血管為靶點的抗腦膠質瘤的治療指導方面為提供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院從2005年至2009年經(jīng)病理證實為腦星型細胞瘤的石蠟標本42例，其中Ⅰ級星型細胞瘤16例、Ⅱ級星型細胞瘤8例、Ⅲ級星型細胞瘤10例，Ⅳ級星型細胞瘤8例；男性27例，女性15例，男女比例為1.8：1。

1.2 免疫組織化學方法

本實驗采用鏈霉素抗生物蛋白－過氧化酶免疫組織化學染色法，即S-P法。所用的CD34抗體以及SP試劑盒均購自福州邁新生物技術開發(fā)公司。免疫組織過程中，以PBS置換一抗染色作為陰性對照，用已知的CD34染色陽性的乳腺癌切片作為陽性對照。

1.3 血管內(nèi)皮細胞染色的判斷和MVQ計數(shù)

染色以在腫瘤間質血管內(nèi)皮細胞胞漿出現(xiàn)棕褐色顆粒為陽性，凡呈現(xiàn)棕褐色的單個內(nèi)皮細胞或內(nèi)皮細胞群均作為一個血管計數(shù)，管腔直徑>8個紅細胞的血管不計數(shù)。參照Niu等[1]的方法，在低倍鏡下（100×）全面觀察切片，尋找高血管密度區(qū)，然后在高倍視野內(nèi)（200×）計數(shù)微血管的數(shù)目。記錄3個視野內(nèi)的微血管數(shù)，取其平均值作為該病例的MVQ值。

1.4 統(tǒng)計學處理

應用SPSS 13.0軟件包進行統(tǒng)計學處理，采用配對樣品t檢驗分析，以P＜0.01判斷為有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 MVD的計數(shù)

腦膠質瘤中央?yún)^(qū)MVD為(25.84±4.11)，腦膠質瘤外周部MVD為(42.13±5.50)，配對t檢驗分析分析，2組數(shù)據(jù)的差異有統(tǒng)計學意義(表1)。

表1 MVD在腦膠質瘤中央?yún)^(qū)與外周部的t檢驗分析(±s)

表1 MVD在腦膠質瘤中央?yún)^(qū)與外周部的t檢驗分析(±s)

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2.2 MVD在腦膠質瘤中央?yún)^(qū)與外周部的分布關系

腦膠質瘤中央?yún)^(qū)的微血管密度（MVD）明顯低于外周部。

3 討論

微血管密度（micro vessel density,MVD）是一個反映腫瘤小血管生成的重要指標本[2]。采用對血管內(nèi)皮細胞抗原的免疫組織化學技術染色進行微血管定量的方法（即MVD測定），能較準確地反映腫瘤的血管生成。在內(nèi)皮細胞的眾多標記物中，抗人原始造血細胞抗原（CD34）單克隆抗體對淋巴細胞和基質細胞不存在交叉反應，比Ⅷ因子和CD31更具敏感性和特異性，微血管染色較Ⅷ因子、CD31定位更準確[3]。血管生成（angiogenesis）是指在原有微血管（毛細血管和小靜脈）的基礎上通過“出芽”方式形成新的毛細血管。實體瘤的生長亦和成熟組織的生長、重建、再生一樣伴隨著血管生成。腫瘤血管生成是腫瘤生長和轉移的形態(tài)學基礎,它不僅向腫瘤提供充足的營養(yǎng),同時也向機體輸出腫瘤細胞,導致腫瘤細胞的惡性性長和轉移，所以腫瘤的血管生成與它的生物學行為息息相關。本實驗結果顯示：腦膠質瘤組織中微血管染色呈棕褐色，清晰可辨，切片背景清晰，為準確計數(shù)MVD提供保障。腦膠質瘤中央?yún)^(qū)MVD為(25.84±4.11)，腦膜瘤外周部MVD為(42.13±5.50)，腦膠質瘤中央?yún)^(qū)的微血管密度（MVD）明顯低于外周部,這也解析了腦膠質瘤具有侵襲性生長的特性。本實驗對微血管生成在腦膠質瘤中分布規(guī)律的研究結果，為了解腦膠質瘤侵襲性生長的生物學行，并在以微血管為靶點的抗腦膠質瘤的治療指導方面為提供臨床參考。

[1]Niu XY,Wang ZR,Zhang YF,et al.Relationship between NOS expression and angiogesis in gallbladder carcinoma tissue[J].Fourth MilMed Univ,2003,24(3):265～268.

[2]Kerbel RS.Tumor angiogenesis,past,present and the near future[J].Carcinogenesis,2000,21:505～515.

[3]顧應江,夏祥國.缺氧誘導因子-1的表達與腦膜瘤血管生成的關系[J].國際神經(jīng)病學神經(jīng)外科學雜志,2006,35(5):402～405.