復(fù)方苦參注射液對肺癌患者化療后細(xì)胞免疫功能的影響

張世強(qiáng) 陳冬波 王保慶 張?zhí)m勝 王自全

徐州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科,江蘇徐州 221006

惡性腫瘤患者機(jī)體免疫功能通常發(fā)生紊亂,而化療在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時對機(jī)體免疫功能也造成一定程度的影響[1]。本研究應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)對83例肺癌化療患者外周血中T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性進(jìn)行測定,觀察靜脈滴注復(fù)方苦參注射液對肺癌化療患者外周血細(xì)胞免疫功能的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年 8月—2010年 5月本科收治的Ⅲb～Ⅳ期肺癌患者83例,所有病例均經(jīng)細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)病理證實為原發(fā)性肺癌,且Karnofsky評分＞60分,無其他腫瘤病史以及無嚴(yán)重的可能影響治療計劃按期完成的內(nèi)科疾病。將患者隨機(jī)分為觀察組和化療組。觀察組39例,其中男27例,女12例,平均年齡42～74歲;鱗癌 15例,腺癌 21例,腺鱗癌 2例,大細(xì)胞癌1例,采用化療聯(lián)合靜脈滴注復(fù)方苦參注射液治療;化療組44例,其中男29例,女 15例,平均年齡45～69歲;鱗癌17例,腺癌23例,腺鱗癌2例,大細(xì)胞癌2例,僅采用常規(guī)化療。兩組病例年齡、性別及病理類型經(jīng)比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。另外選擇31例健康人作為對照組,所有研究對象均于清晨抽取空腹靜脈血8 ml待檢。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 觀察組患者于化療前2～3 d開始用復(fù)方苦參注射液20 ml加入0.9%氯化鈉250 ml中靜脈滴注,每日1次,14 d為1個周期,共治療3～4個周期。兩組患者均采用NP化療方案。具體如下:長春瑞濱25 mg/m2,第 1天、第8天,靜脈滴注;順鉑25 mg/m2,第1天～第3天,靜脈滴注。兩組化療期間均輔助相同的止吐及保護(hù)胃黏膜藥,未使用任何生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑或其他對免疫功能有影響的藥。

1.2.2 試驗方法

1.2.2.1 觀察指標(biāo) 分別抽取肺癌患者和健康人的外周血,觀察自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)活性、T淋巴細(xì)胞亞群 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+在化療前后的變化。

1.2.2.2 檢測方法 熒光抗體標(biāo)記所測物,抗體組合為 :CD3-CY5、CD8-PE 和 CD3-FITC 、CD56-PE,避光反應(yīng)15～20 min,制成單細(xì)胞懸液。全血樣本先用甲酸溶血,離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)離子濃度,1.0%多聚甲醛固定,3 000 r/min離心,5 min×2,加生理鹽水溶解稀釋后上流式細(xì)胞儀檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,數(shù)據(jù)以±s表示,組間比較采用 t檢驗,以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 化療前外周血T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性比較

83例肺癌患者化療前 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK細(xì)胞水平均低于健康對照組(P＜0.01),差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

表1 化療前肺癌組與對照組外周血T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性比較(%,±s)

表1 化療前肺癌組與對照組外周血T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性比較(%,±s)

與對照組比較**P＜0.01

組別 n CD3+ CD4+ CD4+/CD8+ NK對照組 31 62.01±6.53 45.76±6.80 1.76±0.34 24.11±8.38肺癌組 83 57.92±5.72** 41.50±5.72** 1.47±0.42** 19.95±6.74**

2.2 化療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性比較

化療組和觀察組患者化療后外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+NK細(xì)胞水平較化療前降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),但觀察組各項指標(biāo)均顯著高于化療組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組化療前后T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性比較(%,±s)

表2 兩組化療前后T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性比較(%,±s)

與化療前比較*P＜0.05;與化療組比較△P＜0.05

組別 n CD3+化療前 化療后CD4+化療前 化療后CD4+/CD8+化療前 化療后NK化療前 化療后化療組 4457.74±5.133.09±4.65* 40.37±6.0934.82±5.76* 1.49±0.37 1.21±0.27* 20.17±6.9315.44±5.37*觀察組 3958.26±4.87 56.07±5.14*△ 42.09±6.13 37.81±6.02*△ 1.52±0.41 1.34±0.31*△ 19.82±6.79 17.95±5.72*△

3 討論

我國肺癌的發(fā)病率逐年升高,大部分患者就診時已處于腫瘤晚期,需要行腫瘤內(nèi)科化療。有研究[2-4]發(fā)現(xiàn),化療在殺滅腫瘤細(xì)胞的同時也伴隨因化療引起的負(fù)面效應(yīng),免疫功能降低是主要并發(fā)癥之一,而在腫瘤的治療過程中,保護(hù)機(jī)體免疫狀態(tài)與殺傷腫瘤細(xì)胞具有同等重要的地位。傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論認(rèn)為扶正培本、活血化瘀、清熱解毒的中藥能保護(hù)或提高機(jī)體的免疫功能,調(diào)動機(jī)體自身的抗癌能力,從而達(dá)到延長患者生存期、改善生活質(zhì)量的作用。近年來,已有許多研究[5-7]證實,對化療患者采用中醫(yī)藥輔助治療能減輕藥物毒性和各種治療的不良反應(yīng),可以有效保護(hù)人體的免疫功能。

復(fù)方苦參注射液為純中藥抗癌藥,其主要成分為苦參堿、氧化苦參堿等多種生物堿。近年研究[8-10]表明,苦參類生物堿具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性,可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞向正常細(xì)胞分化,具有促凋亡作用,可顯著提高細(xì)胞免疫功能,是良好的免疫調(diào)節(jié)劑。本研究結(jié)果顯示,肺癌患者化療前 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK細(xì)胞數(shù)均低于健康對照組,提示肺癌患者的機(jī)體免疫功能明顯低于正常人,而且進(jìn)一步分析表明單純化療組和觀察組患者化療后外周血CD3+、CD4+、NK細(xì)胞含量以及CD4+/CD8+水平較化療前繼續(xù)降低,說明化療損傷了肺癌患者免疫機(jī)能,從而導(dǎo)致其免疫功能進(jìn)一步下降。而化療后觀察組肺癌患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK細(xì)胞數(shù)均顯著高于單純化療組,說明化療的同時應(yīng)用復(fù)方苦參可改善化療對肺癌患者的免疫抑制狀態(tài),使機(jī)體的免疫功能特別是細(xì)胞免疫功能增強(qiáng),間接發(fā)揮了對腫瘤細(xì)胞的抑制與殺傷作用。

復(fù)方苦參減輕化療對肺癌患者免疫抑制的機(jī)制尚不清楚,中醫(yī)學(xué)對于腫瘤的致病因素有“正氣不足,而后邪氣踞之”的認(rèn)識,其“正氣”一定程度包括了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的免疫防御功能。崔澂等[11]研究發(fā)現(xiàn),氧化苦參堿可通過降低Colon26腫瘤細(xì)胞分泌TGF-β1和IL-10,從而下調(diào)Colon26對T細(xì)胞增殖、活化及對T、NK細(xì)胞ζ鏈表達(dá)的抑制,在一定程度上逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的免疫抑制。

因此,復(fù)方苦參對改善肺癌化療患者的細(xì)胞免疫功能有重要意義,對肺癌化療患者有一定的臨床應(yīng)用價值,建議在臨床中進(jìn)一步推廣和應(yīng)用。

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