青皮揮發油超臨界 CO2萃取的GC-MS測定

，，

(1.咸陽師范學院化學與化工學院，陜西 咸陽 712000；2.甘肅農業大學生命科學技術學院，甘肅 蘭州 730070；3.蘭州石油機械研究所，甘肅 蘭州 730050)

青皮(Pericarpiumcitrireticulataeviride)為蕓香科植物橘(CitrusreticulataBlanco)及其栽培變種的干燥幼果或未成熟果實的果皮，具有疏肝破氣、消積化滯、散結消痰之功效[1]，揮發油是其主要的活性成分之一[2]。目前利用水蒸氣蒸餾提取青皮揮發油的研究已有報道[2,3]，而超臨界CO2萃取所得揮發油的成分分析則較少。作者采用超臨界CO2流體萃取青皮揮發油，通過氣相色譜-質譜聯用技術對其化學成分進行分析鑒定，并以面積歸一化法測定了各組分的相對含量，擬為進一步開發利用該植物資源提供參考。

1 實驗

1.1 試藥與試劑

青皮，購自甘肅省蘭州黃河中藥批發有限公司，產地廣西省，經鑒定為蕓香科植物橘(CitrusreticulataBlanco)的干燥幼果；無水硫酸鈉、乙醚均為分析純。

CO2，食品級(純度>99.95%)，蘭州市裕隆公司。

1.2 儀器

HA 121-50-01型超臨界萃取裝置，江蘇南通華安超臨界萃取有限公司；Finnigan Trace GC Ultra/DSQ型氣相色譜-質譜聯用儀，Thermo Electron Corporation；Xcalibur數據處理系統。

1.3 超臨界CO2萃取[4,5]

稱取80目青皮藥粉400 g，投入1 L萃取釜中，設定萃取壓力25 MPa，萃取溫度35℃；分離釜I壓力8 MPa，溫度55℃；分離釜Ⅱ壓力6 MPa，溫度35℃；調節CO2流量20 L·h-1，萃取1.5 h后收集分離釜Ⅰ和分離釜Ⅱ中的提取物，以乙醚溶解，經無水硫酸鈉干燥后供GC-MS分析。

1.4 GC-MS分析

氣相色譜條件：色譜柱DB-5 MS石英毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；程序升溫條件：初始溫度60℃，保持3 min，以15℃·min-1的速率升至280℃，保持5 min；載氣：高純He(≥99.9%)；進樣量：1 μL；分流比：20∶1；氣化室溫度：250℃；進樣口溫度：250℃；載氣流量：1.0 mL·min-1；溶劑延遲：3 min。

質譜條件：電離方式EI源；電子能量70 eV；離子源溫度220℃；接口溫度250℃；掃描范圍(m/z)30～550 amu；掃描速率：3000 amu·s-1。

2 結果與討論

2.1 青皮揮發油總離子流圖

在設定的實驗條件下，對青皮揮發油進行GC-MS測定，得其總離子流圖(TIC)見圖1。

圖1 青皮揮發油總離子流圖

本實驗是對超臨界CO2萃取青皮揮發油成分的研究初探，由圖1可見隨著溫度的升高，基線呈上升趨勢，這可能是由于實驗條件設定的原因，有待進一步的分析研究。

2.2 青皮揮發油GC-MS分析

對圖1中的各峰經質譜掃描后的質譜圖經質譜數據庫檢索，并與標準圖譜對照，結合有關文獻[2,3,6～8]，確定青皮揮發油的化學成分及其相對含量，見表1。

表1 青皮揮發油化學成分GC-MS分析結果

由表1可知，經GC-MS測定，從超臨界CO2萃取的青皮揮發油中總共鑒定出19種化合物，占揮發油總量的85.24%。主要為萜烯類、醇類、酯類以及長鏈烷烴類化合物，其中萜烯類1種，占3.69%；醇類3種，占8.62%；酯類5種，占19.45%；長鏈烷烴類10種，占53.48%。相對含量在3%以上的主要成分有：正二十烷(13.53%)、正二十四烷(12.12%)、(Z,Z,Z)-9,12,15-十八碳三烯酸-2,3-二羥丙基酯(9.09%)、(Z)-9-十八碳烯酸甲酯(5.05%)、7-己基二十二烷(4.84%)、γ-谷甾醇(4.81%)、11-(1-乙基丙基)-二十一烷(4.81%)、7-己基二十烷(4.45%)、11-癸基二十四烷(4.13%)、正二十一烷(3.78%)、d-檸檬烯(3.69%)；相對含量在1%～3%之間的組分有：1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)-1,2-環己二醇(2.60%)、9-甲基十九烷(2.49%)、油酸-3-(十八烷氧基)丙酯(1.90%)、棕櫚酸甲酯(1.81%)、正四十四烷(1.77%)、硬脂酸-3-(十八烷氧基)丙酯(1.60%)、2,6,10,15-四甲基十七烷(1.56%)、2-甲基-1-鯨蠟醇(1.21%)。

3 結論

利用超臨界CO2流體可從青皮揮發油中萃取出低沸點、易揮發的小分子物質，如d-檸檬烯等，還可得到較多的酯類、長鏈烷烴類等沸點較高、揮發性較小的大分子化合物，如(Z)-9-十八碳烯酸甲酯、棕櫚酸甲酯、(Z,Z,Z)-9,12,15-十八碳三烯酸-2,3-二羥丙基酯、正二十烷等，為青皮的進一步研究利用提供了參考。

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