市售荷葉藥材中荷葉堿含量調查*

朱曉月，劉 虹，郝 彧，曾 森，張德芹，吳 帥

荷葉（Folium nelumbinis）為睡蓮科植物蓮（Nelumbo nucifera Gaertn）的干燥葉。夏、秋兩季采收，在中國湖南、湖北、浙江、江蘇等地均有廣泛的種植。荷葉中含有碳水化合物、脂質、蛋白質、無機鹽、生物堿、黃酮、精油、鞣質等多種成分，其中生物堿和黃酮是荷葉的主要活性成分。2005版《中華人民共和國藥典》規定，荷葉藥材以荷葉堿為含量測定指標，其含量不得低于0.10%。因此，為了了解現有市售荷葉藥材的合格率，筆者依據藥典，以荷葉藥材中荷葉堿為指標成分，對24批市售荷葉藥材進行含量測定[1-3]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 高效液相色譜儀：Agilent1100色譜系統（VWD檢測器）；數顯恒溫水浴鍋（HH-2，國華電器有限公司）；電子天平（METTLER TOLEDO AX-205）；微孔濾膜（0.45 μm）。

1.2 試藥 24批市售荷葉藥材（樣品保存于天津中醫藥大學中醫藥研究中心藥學部，經天津中醫藥大學中醫藥研究院郭俊華副研究員鑒定）；荷葉堿對照品（批號：121322-200301，中國藥品生物制品檢定所）；甲醇（色譜純，天津市康科德科技有限公司），甲醇（分析純，天津協和昊鵬色譜科學技術有限公司），乙腈（HPLC/SPECTRO，TEDIA），三乙胺（分析純，天津市化學試劑三廠），冰醋酸（分析純，天津市北方天醫化學試劑廠），超純水（經Millipore純水系統處理）。

2 方法與結果

荷葉藥材中荷葉堿的含量測定方法參考2005版中國藥典[1]。

2.1 對照品溶液的制備 取荷葉堿對照品適量，精密稱定，用甲醇配制成濃度為0.015 4 g/L的荷葉堿對照品溶液。

2.2 供試品溶液的制備 取荷葉藥材粗粉（過40目篩）約0.5 g，精密稱定，置100 mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定質量，置恒溫水浴鍋上加熱回流2.5 h，放冷，用甲醇補足損失質量，搖勻，微孔濾膜（0.45 μm）濾過，即得。

2.3 色譜條件色譜柱：PhenomsilC18（4.6mm×250mm，5 μm）；流動相：乙腈-水-三乙胺-冰醋酸（27∶70.6∶1.6∶0.78）；檢測波長：270 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：25℃。

2.4 標準曲線的繪制 取荷葉堿對照品適量，精密稱定，用甲醇配成系列濃度的對照品溶液。以峰面積（Y）為縱坐標，進樣量（X）為橫坐標作圖，得荷葉堿回歸方程為Y=3.22X+12.02，r=0.999 8，線性范圍為 9.56×10-3～0.478 μg。

2.5 樣品測定 取對照品溶液5 μL，供試品溶液各20 μL，依次注入高效液相色譜儀，測定荷葉堿峰面積，按外標一點法計算荷葉堿含量。見表1，圖1。

表1 樣品測定結果

圖1 荷葉堿對照品及荷葉藥材HPLC圖（1—荷葉堿）

由測定結果可見，在所測24個荷葉藥材樣品中，2個樣品合格，22個樣品不合格，合格率為8.3%。

3 討論

3.1 應規范荷葉藥材的種植 實驗中測定的24批荷葉藥材，只有2批合格，合格率僅為8.3%。由此可見，目前市售荷葉藥材中荷葉堿含量普遍低于藥典規定。因此，為了保證荷葉藥材的質量，應建立符合GAP標準的荷葉種植基地，規模化、規范化種植荷葉。

3.2 關于單一指標成分含量測定的科學性 荷葉中含有多種生物堿類物質，現代藥理學研究表明，荷葉生物堿具有降脂減肥、抑菌、抗病毒、抗氧化等活性[4]。而荷葉堿只是荷葉總生物堿中的一個化學成分，荷葉堿的含量并不能全面代表荷葉藥材的質量。雖然多指標成分的含量測定[5]可能是比較有效的質控途徑，但是缺少相關中藥化學對照品、荷葉中其他生物堿成分多含量較低的問題又使多指標的測定較難實現；而且增加了中藥生產企業的檢測成本。因此筆者建議在荷葉藥材的含量測定中增加荷葉總生物堿的測定，從而更真實、全面的反映荷葉藥材的質量。應建立符合中醫藥特點的質量標準體系，指標成分的含量測定結合大類成分的含量測定不失為一種經濟有效的方法。

3.3 關于中藥的入藥形式 傳統的中藥入藥方式為不論其指標成分（或活性成分）含量高低，均以處方中的藥材量入藥。藥材中指標成分含量的波動勢必影響到中成藥的質量。但作為藥品，必須要求其質量穩定、一致；但是作為中成藥原料的中藥材大都來源于生物，不管是野生的，還是栽培的，甚至是GAP基地生產的，其質量不可能穩定、一致。因此，應該改變傳統觀念，提倡以中藥提取物的形式入藥（投料量按活性成分的含量計算），保證中成藥的質量穩定可控。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京:化學工業出版社,2005:195-198.

[2]朱秀萍,徐 翔.荷葉生物堿研究進展[J].中國藥房,2008,19(6):459-461.

[3]孔文琦,李嚴巍.荷葉活性成分及藥理活性研究進展[J].中藥信息與研究,2005,7(6):22-24.

[4]肖桂青,盧向陽,田 云，等.荷葉生物堿藥理作用的研究進展[J].湖南農業科學,2006,(2):80-81.

[5]吳 昊,劉 斌,王 偉，等.HPLC法測定不同市售荷葉藥材中4種生物堿類成分的含量[J].北京中醫藥大學學報,2008,31(7):479-481.