外源激素PMSG HCG對休情期母貉卵巢組織的影響

劉 平,呂占軍,李明輝,黃偉平

(東北農業大學動物醫學學院,黑龍江哈爾濱150030)

貉是珍貴的毛皮動物,也是我國生產的主要毛皮動物之一,由于貉屬季節性一次發情動物,如果當年不能配種,則影響母貉的利用率。對此萬國有等曾采用絨毛膜促性腺激素(HCG)使兩年均未發情及發情不正常的母貉均發情配種[3];李志狀等用孕馬血清促性腺激素(PMSG)使繁殖率差空懷率高的母貉均交配,受胎率83.3%[2]。但這有關母貉生殖的研究多在繁殖季節進行,而本試驗則在母貉非繁殖季節(12月初)對初產貉肌肉注射不同劑量的PMSG和HCG,以其誘導發情,誘發卵泡發育,為今后母貉人工繁殖技術的普及、人工同期發情和配種、保存優良品種而進行的胚胎移植技術的研究等提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 哈爾濱市某貉場飼養的20只健康母貉。

1.2 藥物 PMSG、HCG(寧波第二激素廠)。

1.3 方法 20只健康母貉分為試驗組(共15只)和對照組(5只),試驗組又分為3個小組。試驗第1天各試驗組肌肉注射不同劑量PMSG,第6天改注HCG,各組注射劑量見表1。對照組肌肉注射生理鹽水。第7天取出各組動物的卵巢,置于10%中性福爾馬林溶液中固定,石蠟包埋,切片,H.E.染色,顯微鏡下觀察。

表1 各試驗組注射PMSG、HCG劑量

1.4 數據分析 采用Microsoft Excel數據分析工具處理后用表示,并用方差分析各組間的顯著性差異檢驗。

2 結果

2.1 卵巢形態變化 表2結果顯示,試驗1組和2組卵巢重量與對照組相比差異顯著(P＜0.05),試驗3組卵巢重量相當于對照組的3倍多,差異極顯著(P＜0.01);試驗2組和3組卵巢寬顯著高于對照組(P＜0.05);試驗3組卵巢大小與對照組相比差異極顯著(P＜0.01)。

表2 卵巢形態變化比較

2.2 卵泡發育變化 休情期母貉肌肉注射不同劑量的PMSG、HCG后,各組卵巢的卵泡均有不同程度的發育(見表3)。對照組卵巢的白膜層和皮質層均不發達,皮質層中分布有許多原始卵泡、初級卵泡和次級卵泡,未觀察到黃體和白體(見中插彩版圖1)。試驗1組卵巢的白膜層和皮質層均發達,初級卵泡和次級卵泡所占百分率與對照組相比差異不顯著(P＞0.05),三級卵泡所占百分率與對照組相比差異顯著(P＜0.05),還觀察到有閉鎖的初級卵泡,主要分布在皮質層淺層,髓質部有較多血管,充血現象明顯(見中插彩版圖2)。試驗2組卵巢的白膜層和皮質層均發達,在皮質層淺層觀察到很多呈聚集分布的原始卵泡和初級卵泡,次級卵泡所占百分率顯著低于對照組(P＜0.05),三級卵泡所占百分率與對照組相比差異顯著(P＜0.05),其周圍有較多血管,充血現象明顯,且可觀察到少量閉鎖的初級和次級卵泡(見中插彩版圖3)。試驗3組卵巢的皮質層很發達,皮質層淺層分布有許多原始卵泡和初級卵泡,次級卵泡所占百分率顯著低于對照組(P＜0.05),三級卵泡所占百分率與對照組相比差異極顯著(P＜0.01),其周圍分布有大量充血現象明顯的血管(見中插彩版圖4)。

表3 各級卵泡發育情況

3 討論

貉屬季節性一次發情動物,其卵巢大致從秋分開始發育,至1月底2月初可有近成熟的卵泡,整個發情期由2月初持續至4月上旬,以2月下旬到3月上旬為發情旺期。交配后受胎的母貉即進入妊娠期,產仔泌乳期。非受胎母貉和斷乳以后的母貉,又恢復到靜止期,直至秋分性器官再次發育[1],11月末黃體消失,卵巢逐漸增長,有許多原始卵泡和初級卵泡,及部分處于退化階段的次級卵泡。在發情周期的一定階段,注射適量的促卵泡素類激素制劑PMSG,能促進卵泡生長,使將要退化的卵泡發育成熟,于排卵前注射促黃體素類激素制劑HCG能促使成熟卵泡釋放,黃體生成。

試驗結果表明,不同劑量激素組合處理休情期母貉后,3個試驗組貉的卵巢重量與對照組相比差異顯著,其中以試驗3組卵巢最重,其重量相當于對照組的3倍多。

注射PMSG、HCG后各試驗組卵泡均有不同程度的發育,試驗1組和2組三級卵泡增多,但閉鎖的卵泡也較多,而試驗3組觀察有較多的三級卵泡,且部分三級卵泡擴展達卵巢皮質的整個厚度,從卵巢外觀來看甚至有個別卵泡突出于卵巢表面。可見,注射PMSG 1 000 IU和HCG 200 IU的劑量是比較合適的。

HCG對雌性動物能促進卵泡發育、成長,在卵泡成熟時能促使其排卵,并形成黃體,給予大劑量時能延長黃體存在時間,但在卵泡未成熟時并無這些作用[4]。而本試驗沒有觀察到卵巢中有血體和黃體出現,分析可能是由于注射PMSG促進卵泡生長發育,但在注射HCG時卵泡尚未發育至即將排卵,只是繼續促進卵泡發育生長,沒有起到促使成熟卵泡排卵并生成黃體的作用。因此,注射HCG的時間有待于進一步研究。

[1]華樹芳.貉的選配及繁殖特點[J].特種經濟動植物,2001(3):5.

[2]李志狀,黃顯銘,楊岐.應用孕馬血清促性腺激素提高母貉受胎率的試驗報告[J].經濟動物學報,1987(4):11-19.

[3]萬國有,李志狀.應用絨毛膜促性腺激素提高母貉繁殖力的觀察[J].經濟動物學報,1986(4):23-24.

[4]王建辰.家畜生殖內分泌學[M].北京:中國農業出版社,1993:130-135.