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辛芩口服液抗過敏作用的實驗研究

2010-05-31 02:51:22王麗英
中國藥業 2010年18期
關鍵詞:小鼠

籍 濤,王麗英

(1.中國人民解放軍北京軍區衛生干部訓練中心,北京 102300;2.中國人民解放軍第322醫院,山西 大同 037006)

辛芩口服液是由辛夷、黃芩、蒼耳子、金銀花、荊芥5味藥材加工而成的復方中藥制劑,具有清熱解毒、消炎排膿、散風寒、通鼻竅等功效,臨床用于治療急、慢性鼻炎,鼻竇炎,過敏性鼻炎等癥。筆者對辛芩口服液的抗過敏作用進行了相關研究,現報道如下。

1 材料

藥品與試劑:辛芩口服液(含辛夷200 g、黃芩250 g、蒼耳子250 g、金銀花150 g、荊芥150 g),將辛夷、蒼耳子、荊芥水蒸氣蒸餾收集蒸餾液,藥渣與黃芩、金銀花加水煎煮兩次并濃縮,加乙醇沉淀后過濾,合并蒸餾液,過濾,100℃ 40 min流通蒸氣滅菌即得;供試品溶液(濃度為100%,中國人民解放軍第322醫院制劑室提供,批號為080524);息斯敏(西安楊森制藥有限公司,批號為080221);地塞米松(山東魯抗振興藥業有限公司,批號為080413)。磷酸組胺(中國科學院上海生化所東風生化技術公司,批號為030711);卵蛋白(OA,美國 Sigma公司);百日咳疫苗(菌株 CS,1.040×1012/mL,北京生物制品所)。伊文思藍(中國醫藥公司北京采購供應站進口分裝,批號為020223);2,4-二硝基氯代苯(DNCB,北京化學試劑廠,批號為040718)。

動物:SD大鼠,雄性,體重180~200 g,6~7周齡,動物合格證號為 SCXK(京)2002-0003;NIH小鼠,雌雄各半,體重18~20 g,6~7周齡,動物合格證號為SCXK(京)2002-0010;豚鼠,雌雄各半,體重150~200 g,動物合格證號為SCXK(京)2002-0026。均由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。

儀器:Jasco U-530型紫外可見分光光度計(日本);Sartorius BP-2110型電子分析天平(德國);XSB-3型顯微鏡(上海物理光學儀器廠)。

2 方法與結果

2.1 對大鼠同種被動皮膚過敏反應的影響[1]

取雄性SD大鼠,每側大腿肌肉注射1%卵蛋白生理鹽水0.2mL,同時腹腔注射生理鹽水稀釋的百日咳疫苗2×1010/mL,1mL/只,于第13天眼眶靜脈叢取血,500 r/min轉速離心,分離血清,置-4℃冰箱備用。取同種雄性大鼠40只,隨機分為4組,即空白對照組(A組),辛芩口服液高、低劑量組(B1組及B2組),陽性對照組(C組)。灌胃給藥,空白對照組給予生理鹽水10 mL/kg(下同),1次/d,連續14 d。末次給藥次日,大鼠背部中線兩側距脊柱1.5 cm處剃毛,以1∶10稀釋的抗血清背部皮內注射,每側兩點,間隔1.5~2 cm,每點0.1 mL。48 h后,尾靜脈注射1%伊文思藍、2%卵蛋白生理鹽水各0.5 mL,30 min后脫頸處死,翻轉背部皮膚,剪下帶有藍色的部分,置入盛有5 mL丙酮-生理鹽水(7∶3)的試管內浸泡48 h,2 500 r/min轉速離心,取上清液于610 nm波長處測定吸光度(OD值),計算平均 OD值及抑制率。抑制率(%)=(100-實驗組 OD值)/對照組OD值×100。結果見表1。可見,辛芩口服液高、低劑量均能明顯抑制48 h同種被動皮膚過敏反應,與空白對照組比較有顯著性差異(P<0.01或 P<0.05),并呈一定的量效關系。

表1 辛芩口服液對大鼠同種被動皮膚過敏反應的影響(X ± s,n=10)

2.2 對豚鼠鼻黏膜過敏反應的影響[2]

取豚鼠40只,雌雄各半,隨機分為4組,每只腹腔注射卵蛋白福氏不全佐劑(10 mg/mL),0.5 mL致敏,按表2方法灌胃給藥,1次/d,連續14 d。末次給藥60 min后,靜脈注射1%伊文思藍生理鹽水每100 g體重0.5 mL,隨后立即以1 mg/mL卵蛋白生理鹽水溶液自雙側鼻孔注入,每側0.05 mL,20 min后脫頸處死,沿雙眼內眥連線,剪下鼻部,用濾紙吸干血液,剝去皮膚,將鼻甲及黏膜一起剪碎,浸入5 mL 70%丙酮生理鹽水48 h,2 500 r/min轉速離心10 min,取上清液在600 nm波長處測定 OD值,以平均 OD值表示過敏程度。結果見表2。可見,高、低劑量辛芩口服液均能非常顯著抑制卵蛋白誘發的豚鼠鼻黏膜過敏反應,與空白對照組比較,有非常顯著性差異(P<0.01)。

表2 辛芩口服液對豚鼠鼻黏膜過敏反應的影響(X ± s,n=10)

2.3 對磷酸組胺致過敏反應的影響[3]

取豚鼠40只,雌雄各半,隨機分為4組,按表3方法灌胃給藥,1次/d,連續10 d。于第9天所有動物脫去背部4 mm×4 mm面積毛發,末次給藥1 h后,用5號針頭輕輕劃破脫毛處表皮,避免出血。在劃痕部位順序滴入不同體積分數的磷酸組胺(0.01%~0.1%),每次留置2 min,觀察豚鼠舌舔劃痕部位、前爪搔抓頭或甩頭、后爪搔抓軀干、嘴咬全身各部位、全身劇烈抖動、躁動不安、打滾或休克等現象,以引起反應的最低磷酸組胺質量作為致敏閾并記錄各組平均致敏閾及反應持續時間。結果見表3。可見,高、低劑量辛芩口服液均可明顯提高豚鼠對磷酸組胺的致敏閾(P<0.01或 P<0.05),高劑量辛芩口服液還能顯著縮短過敏反應的持續時間。

表3 辛芩口服液對磷酸組胺致過敏反應的影響(X ± s,n=10)

2.4 對小鼠遲發型超敏反應的影響[4]

取NIH小鼠40只,隨機分為4組,按表4方法灌胃給藥,1次/d,連續9 d。第5天給藥后,將小鼠腹部去毛,范圍3 cm×3 cm,將用1%DNCB丙酮中性麻油(1∶1)溶液50 μL均勻涂于去毛部位致敏,次日強化1次。給藥第9天后,再以1%DNCB溶液均勻涂于小鼠右耳激發過敏反應,左耳為對照。涂耳24 h后,脫頸椎處死,剪下雙耳耳廓,以直徑8 mm打孔器摘取左右耳片稱重,以兩側耳重的差值作為遲發型超敏反應值,計算腫脹度;并摘取胸腺、脾臟稱重,以10 g體重之胸腺和脾質量表示脾指數和胸腺指數。結果見表4。可見,高、低劑量辛芩口服液組均可抑制DNCB所致小鼠遲發性超敏反應,與空白對照組比較有顯著性差異(P<0.01或 P<0.05);高劑量辛芩口服液還可增加胸腺和脾臟質量,提示其可能具有免疫增強作用。

表4 辛芩口服液對小鼠遲發型超敏反應的影響(X ± s,n=10)

3 討論

辛芩口服液可顯著抑制卵蛋白誘發的大鼠同種皮膚和豚鼠鼻黏膜過敏反應;并能有效拮抗磷酸組胺的致敏作用,顯著降低豚鼠的致敏閾,高劑量時可縮短過敏反應的持續時間;同時還能顯著抑制DNCB誘導的小鼠耳殼腫脹。試驗結果顯示,該藥物不僅可顯著抑制速發型過敏反應,對遲發型過敏反應亦有明顯的拮抗作用。此外,大劑量辛芩口服液還能增加免疫器官的質量,提示其可能具有免疫調節作用。

[1]徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實驗方法學[M].北京:人民衛生出版社,2002:1 407-1 416.

[2]周龍強,饒偉源,李 茂,等.蒼鵝鼻炎片的藥效學研究[J].中藥藥理與臨床,2004,20(4):39.

[3]鄭詠秋,戴 敏,陳光亮,等.消風散顆粒抗過敏作用及其機制研究[J].中國實驗方劑學雜志,2002,8(6):28.

[4]潘經媛,邱銀生,嚴漢池,等.鹽酸塞多平乳膏的止癢和抗過敏作用[J].中國藥理學通報,2005,21(12):1 506.

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