五種大孔樹脂對舒胸片6種成分的靜態吸附性能的考察

顏 紅， 夏新華， 羅 堃， 雷志丹

（湖南中醫藥大學藥學院，湖南長沙 410208）

舒胸片系《中國藥典》2005版一部收載的復方中藥制劑［1］，由三七、川芎、紅花三味中藥制備而成。三七含皂苷類成分（人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1），川芎含生物堿類成分（川芎嗪）與有機酸類成分（阿魏酸），紅花含黃酮類成分（羥基紅花黃色素A）。為便于應用大孔樹脂對該制劑混合提取液進行精制，本文對舒胸片混合提取液中上述6 種有效成分在 LSA－7、LSA－10、LSA－30、D101A、HPD－100 五種大孔樹脂上的靜態吸附性能進行了研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 島津高效液相色譜儀;SPD－10A vp型紫外檢測器;LC－10AT vp色譜泵;N3000色譜工作站;島津AY120型托盤電子分析天平;98－1－B型電熱恒溫套（天津市泰斯特儀器有限公司）。

1.2 試藥 人參皂苷 Rg1（批號110703－200322，供含量測定用）、人參皂苷Rb1（批號110704－200318，供含量測定用）、三七皂苷 R1（批號 110745－200312）、川芎嗪（批號 110817－200305，供含量測定用）、阿魏酸（批號 07733－9910，供含量測定用）、羥基紅花黃色素A對照品（批號111637－200502，供含量測定用），均由中國藥品生物制品檢定所提供。乙腈為色譜純（Caledon Laboratories LTD.），水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。三七、川芎、紅花藥材由湖南三湘中藥飲片有限公司提供。

LSA－7、LSA－10、LSA－30 型大孔吸附樹脂，由西安藍深交換吸附材料有限責任公司提供;D101A大孔吸附樹脂由天津市骨膠廠提供;HPD－100型大孔吸附樹脂由滄州寶恩化工有限公司提供。

2 方法與結果

2.1 舒胸片提取液的制備 按《藥典》舒胸片處方各藥味比例，取三七細粉，加50%乙醇浸泡2.5 h，回流提取2次，加醇量分別為藥材的8倍、6倍量，提取時間分別為2.5 h、2.0 h，收集醇提液，回收乙醇，備用;取川芎，加10倍量水煎煮2 h，濾過，濾液另存，藥渣與紅花加8倍量水煎煮2次，每次1 h，合并煎液，60℃減壓濃縮至每1 mL含1 g生藥，在攪拌下緩緩加入乙醇使含醇量達70%，靜置24 h，濾過，濾液回收乙醇，與上述醇提濃縮液合并，60℃減壓濃縮至適當濃度（0.3 g生藥/mL），濾過，即得。

2.2 不同樹脂的靜態吸附實驗 稱取LSA－7、LSA－10、LSA－30、D101A、HPD－100五種預處理好的大孔吸附樹脂各2 g（濕重），置于具塞三角錐形瓶中，分別加入濃度為0.3 g生藥/mL的舒胸片提取液（pH為4.0）50 mL，密封置于25℃恒溫水浴中并定時振搖，24 h后精密吸取上清液各2 mL，分別用HPLC法測定三七皂苷 R1、人參皂苷 Rg1、人參皂苷Rb1、川芎嗪、阿魏酸及羥基紅花黃色素A的含量，同時測定原液（未經吸附的舒胸片提取液）中上述各有效成分的含量，并按下式計算各有效成分在大孔樹脂上的比吸附量（A）與相對比吸附量（RA）。結果見表1、表2。

式中:A為比吸附量（absorbtion ratio，mg/g），即單位質量干樹脂吸附某成分的量;M1為起始濃度（mg/mL）;M2為剩余濃度（mg/mL）;V為溶液體積（mL）;W為干樹脂重量（g），可根據樹脂的含水量由濕樹脂重量折算得到。

采用Excel中的數據分析工具對表2中的數據進行雙因素無重復的方差分析（ANOVA），結果見表3。

采用Tukey法［2］對6種有效成分的RA進行多重比較檢驗（即兩兩比較），若顯著性水平（α）定為5%，對于6種有效成分，誤差自由度為20（見表3），查Q界值表［2］可知Q值為4.45，則:

表1 6種有效成分在5種樹脂上的比吸附量

表2 6種有效成分在5種樹脂上的相對比吸附量

表3 雙因素無重復的方差分析

式中:s2為上述方差分析中誤差的均方（MS），n為樣本容量。任意二種有效成分RA平均值之差若大于0.15，則兩者之間存在顯著性。結果見表4。

表4 6種有效成分RA的兩兩比較結果（Tukey法）

3 小結與討論

3.1 根據表1可知，復方提取液中不同組分在大孔樹脂上的比吸附量存在較大的差異，它與各組分在藥液中的初始濃度關系密切，如人參皂苷Rg與人參皂苷Rb在藥液中的初始濃度比三七皂苷R1大得多，其比吸附量也高得多。而同一組分在不同類型大孔樹脂上的比吸附量，亦有不同程度的差異，可能與成分、樹脂的性質有關，如水溶性強的羥基紅花黃色素A在極性樹脂LSA－7上具有相對高的比吸附量，而極性較低的川芎嗪在非極性樹脂（LSA－30、HPD－100、D101A）上有相對高的比吸附量。

3.2 對于復方提取液，由于不同組分在大孔樹脂上的比吸附量受初始濃度影響較大，故根據比吸附量難以直觀地評價大孔樹脂對不同性質組分的吸附性能。為此，本文提出了相對比吸附量（RA，relative absorbtion ratio，g－1）的概念，即某組分的比吸附量相對于初始藥液中該成分總量的比率，它可在一定程度上消除復方提取液中各組分由于初始濃度不同而引起的比吸附量差異，從而對不同組分在樹脂上吸附能力的大小作出較為合理的評價。一般地對于一定濃度的復方提取液，若在同一樹脂上各組分的RA值相近，則可認為它們彼此在該樹脂上的吸附性能接近，并有可能在相同的吸附工藝條件下使各成分同時達到較好吸附分離。反之，對于RA值相差太大的各組分，則難以在相同的條件下同時使它們獲得較滿意的吸附分離。由表2中不同組分的RA值可知，本實驗所考察的舒胸片6種有效成分在LSA－7、LSA－10、LSA－30、D101A、HPD－100五種樹脂上的吸附能力的大小依次為:人參皂苷Rb1、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、川芎嗪、阿魏酸＞羥基紅花黃色素A。對表2進行雙因素無重復的方差分析（見表3）表明，5種樹脂的RA之間未見顯著性差異（P＞0.05），而6種有效成分的RA之間存在顯著性差異（P＜0.05）。進一步采用Tukey法對6種有效成分的RA進行多重比較檢驗，表明人參皂苷Rb1、羥基紅花黃色素A的RA與其它各成分均有顯著性，而三七皂苷R1、人參皂苷 Rg1、川芎嗪、阿魏酸4種成分RA之間差異不顯著（見表4）。

3.3 上述實驗研究表明，舒胸片提取液中不同組分在大孔樹脂上的吸附能力，有些相近，有些則差異很大。因此，在采用大孔樹脂精制中藥復方提取液時，要注意復方中不同有效成分在樹脂上吸附性能的差異。若差異大，則應特別注意相對比吸附量（RA）小的組分在上柱吸附過程中是否容易產生泄漏而損失。

［1］中國藥典［S］.一部.2005:636.

［2］徐秉玖編.藥物統計學［M］.北京:北京醫科大學出版社，1999:128－129.