陳皮不同提取工藝橙皮苷提取率分析

蔡慶順， 鐘小群， 余 華

(1.江西省婦幼保健院，江西南昌330006;2.江西省藥物研究所，江西南昌330029)

陳皮為蕓香科植物橘Citrμs reticμlata Blanco及其栽培變種的干燥熟果皮［1］。富含揮發油如α-側柏烯、α-三茚烯、辛醛、α-水芹烯等，含量達1.5% ～2.0%。另還含橙皮苷，新橙皮苷、柑橘素、右旋檸檬烯、枸櫞醛麝香草酚、β-谷甾醇、對羥福林及其它3種黃酮等成分。具有理氣健脾，燥濕化痰的功效。用于胸脘脹滿，食少吐瀉，咳嗽痰多等癥。其提取工藝一般為提取揮發油后再水煎煮、直接水煎煮、乙醇回流或滲漉等方法，一般用中國藥典的檢測成分橙皮苷為指標對提取工藝進行優化。作者亦以橙皮苷為指標對陳皮進行系統的提取工藝研究，結果發現用上述工藝提取藥材，橙皮苷的提取率均比較低，大部分的橙皮苷依然殘留在陳皮藥渣中;對其中的水提取工藝進行了過程監控，發現各過程中橙皮苷的提取率很低，大部分還殘留在藥渣里;作者分析了2005年后發表的多篇相關文獻資料，發現有標準的相關中成藥中橙皮苷最大提取率為從3%至30%，顯示用橙皮苷為指標成分來控制中成藥質量有不妥之處。

1 儀器與試藥

儀器:高效液相色譜儀(大連依利特P200Ⅱ.高壓恒流泵;大連依利特UV200Ⅱ紫外可變波長檢測器;千譜色譜工作站)。色譜柱:Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×200 mm，大連依利特)。

對照品:橙皮苷(購買于中國藥品生物制品鑒定所。供含量測定用，編號為110721-200512)。陳皮藥材:購于本省南華醫藥公司。試劑:流動相所用溶劑為色譜純，其它試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 檢測方法 系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-醋酸-水(30∶4∶66)為流動相;檢測波長為284 nm。理論板數按橙皮苷峰計算應不低于2000。

對照品溶液的制備 精密稱取橙皮苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含40 μg的溶液，搖勻，即得。

供試品溶液的制備 取相當生藥材0.1～1.5 g的供試品粉末或供試品溶液，精密稱定(或量取)。粉末置圓底燒瓶中，精密加入甲醇100 mL，密塞，稱定重量，加熱回流30 min，放冷，密塞，精密稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，棄去初濾液，收集續濾液，即得;溶液至100 mL量瓶中，加甲醇至刻度，濾過，棄去初濾液，收集續濾液，即得。

測定法 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

2.2 標準曲線的制備 精密稱橙皮苷對照品適量，用甲醇制成每1 mL中401.76 μg對照品溶液。從對照品溶液中吸取 0.25、0.5、1.0、1.5、2、10 mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得系列對照品溶液。分別吸取上述對照品系列溶液各10 μL，在相同色譜條件下測定峰面積，以峰面積為縱坐標，對照品進樣量為橫坐標，繪制標準曲線并計算回歸方程。結果回歸方程為:y=1216247.201x+5731.9，r=0.9996，說明橙皮苷進樣量在0.1004～0.8035 μg范圍內線性關系較好。

2.3 供試品的制備

2.3.1 不同提取工藝提取的供試品制備 取經過檢驗合格的陳皮生藥材500 g若干份。采用如下工藝進行提取，平行2份。工藝1:水煎煮法(12倍水煎煮2 h，3次，濾過，合并濾液，濃縮至4000 mL，備用);工藝2:提取揮發油法(加8倍水提取揮發油5 h后，濾出藥液，藥渣再加12倍水煎煮2 h，2次，濾過，合并濾液，濃縮至4000 mL，備用);工藝3:70%乙醇回流法(12倍70%乙醇回流2 h，3次，濾過，合并濾液，濃縮至4000 mL，備用);工藝4:70%乙醇滲漉法(藥材粉碎成粗粉，加70%乙醇浸泡24 h后滲漉，收集滲漉液至濾液幾乎無色，約20倍生藥量，回收乙醇，濃縮至4000 mL)，依上述法進行橙皮苷含量測定，并分別計算轉移率。結果見表1。分別收集各藥渣，烘干，粉碎稱定重量，依上述法進行橙皮苷含量測定，并分別計算殘留率，結果見表2。

表1 陳皮藥材不同提取工藝含量測定結果(n=2)

表2 陳皮藥材不同提取工藝后藥渣中的橙皮苷含量測定結果(n=2)

2.3.2 水提取工藝各過程樣品的制備 取經過檢驗合格的 陳皮生藥材500 g，加12倍水煎煮2 h，3次，濾過，濾液分別濃縮至4000 mL，2000 mL、1500 mL，分別取出50 mL備用;藥渣烘干，粉碎成細粉，稱定重量;除備用外的濾液合并(相當藥材490 g)，濃縮至500 mL時，加乙醇調含醇量為50%，放置24 h，濾過，沉淀烘干，粉碎，稱定重量(45.5 g);上清醇液1500 mL，取20 mL備用，余下醇液，回收乙醇后濃縮得清膏(相對密度為1.20，60℃)，減壓干燥，粉碎成細粉，稱定重量(120.2 g)，將上述的各個樣品溶液、藥渣粉末、沉淀粉末、浸膏粉末依法測定橙皮苷含量，記錄HPLC色譜圖，結果見表3。

表3 陳皮水提醇沉工藝中各過程的含量測定結果

結果顯示:水煎煮第1次、與第2次、第3次的提取率幾乎相似為6%左右，3次總的提取率為18.94%，而藥渣中的橙皮苷含量依然達到69.097 mg/g，相當于80.83%的橙皮苷還殘留在藥渣里，說明陳皮藥材的提取工藝單純以橙皮苷含量為檢測指標是不合適的。

2.4 對2005年后發表的一些文獻資料進行分析處理，以藥典規定陳皮的橙皮苷最低含量為3.5%計，計算了含陳皮中成藥橙皮苷最大提取率，結果發現最大提取率從3.65%至31.78%，還有一些不可信的數據，說明流通中的相關中成藥橙皮苷含量限度參差不齊，橙皮苷作為控制藥品質量的指標是不妥的。結果見表4。

3 討論

3.1 本文采用的HPLC法測定橙皮苷含量，是參照中國藥典2005年版一部陳皮項下的方法，流動相做了適當調整，對照品濃度及供試品濃度是原標準的十分之一左右，目的是使樣品在能達到有效分離，峰型好。標準曲線研究也顯示橙皮苷進樣量在0.1004～0.8035 μg范圍內線性關系較好。

3.2 各提取工藝是常規工藝，亦為中成藥制備中常采用的方法。不同工藝含量測定結果顯示:用常規工藝，常規溶劑及常規用量很難將橙皮苷從陳皮藥材中提取出來，用橙皮苷作為指標來指示陳皮的提取過程作者認為不妥。

表4 一些含陳皮藥材的中成藥橙皮苷含量測定結果

3.3 水提取工藝的過程監控及HPLC圖顯示:橙皮苷與其相鄰未知峰的比例(以峰高之比來表示)不是恒定的:藥材比例最大，第1次的提取物中比例最小，第2次提取物比例較第1次大，第3次提取物較第2次大，在藥渣中的比例最大，說明橙皮苷提取率不及其相鄰成分。

3.4 文獻資料中的一些相關中成藥橙皮苷含量結果分析顯示:最大提取率為3.65%至31.78%，結果相差比較大。作者認為陳皮為價格便宜的常用藥材，橙皮苷含量還都比較高，都會足量投料，但是成品中的橙皮苷含量的確不會很高，成品質量的好壞不能以橙皮苷含量高低來確定。

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