動物乳桿菌發(fā)酵液的體外抑菌試驗

羅 璠

（西南民族大學生命科學與技術學院，四川 成都 610041）

乳酸菌分布廣泛，是存在于人、畜腸道中的一種有益微生物。許多乳酸菌都能產(chǎn)生有機酸、過氧化氫以及乳酸菌素等化合物，這些物質(zhì)在抑制多種病原微生物和食物腐敗菌等方面具有重要意義，不僅可抑制與其親緣關系相近的乳酸菌，而且對非乳酸菌的革蘭氏陽性細菌也具有一定的抑制作用。因此，乳酸菌在醫(yī)藥、食品及飼料工業(yè)中有著廣泛的應用。

本試驗以分離自豬腸道的動物乳桿菌T12為試驗材料，測定其發(fā)酵液中各種化合物的抑菌效果，為開發(fā)新的食品添加劑及微生物飼料添加劑提供一定的理論基礎。

1 材料

1.1 樣品菌株 動物乳桿菌T12，分離自豬腸道，能夠產(chǎn)生乳酸菌素。

1.2 指示菌 大腸桿菌，鼠傷寒沙門氏菌，金黃色葡萄球菌，枯草芽孢桿菌，蠟狀芽孢桿菌，溶壁微球菌，黃曲霉，禾谷鐮刀霉，米曲霉，保加利亞乳桿菌，嗜酸乳桿菌，異常漢遜酵母。

以上菌株均由四川省資源微生物與微生物技術重點實驗室提供。

1.3 培養(yǎng)基 改良MRS培養(yǎng)基：大豆蛋白胨10.0 g，牛肉膏10.0g，酵母提取物5.0g，葡萄糖20.0g，乙酸鈉5.0 g，檸檬酸二胺 2.0 g，K2HPO42.0 g，MgSO4·7H2O 0.58g，Mn2SO4·H2O 0.25g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH值自然；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。

2 試驗方法

2.1 發(fā)酵液制備 將保存的動物乳桿菌T12菌種接種到MRS液體培養(yǎng)基中，30℃活化24h，再轉入液體培養(yǎng)基中相同條件下培養(yǎng)48h，8000r/min離心，取發(fā)酵上清液放冰箱中備用。

2.2 發(fā)酵液pH值的測定 用pH儀準確測定發(fā)酵液的pH值。

2.3 發(fā)酵液的抑菌譜研究 采用牛津杯法測定發(fā)酵液對各指示菌的抑菌作用，以未接種的MRS液體培養(yǎng)基為對照，每種指示菌做三次重復。……