痰液細胞分類及炎癥因子測定在慢性阻塞性肺疾病治療中的價值*

夏鶯 郭韶梅 吳曉琴

（江西省人民醫院 南昌330006）

慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期是導致慢性阻塞性肺疾病患者發病和死亡最常見的原因。目前認為，COPD是不完全可逆性氣流受限為特征的慢性氣道炎癥，因此抗炎治療成為COPD治療中一個重要的方面。研究表明，急性期糖皮質激素能夠更快地改善臨床癥狀。但哪些COPD急性加重期患者能從全身短期應用糖皮質激素治療中獲益更多，尚無定論。本文旨在探討COPD急性加重期患者對糖皮質激素治療有反應的決定因素。

1 資料及方法

1.1 研究對象 40例COPD急性加重期患者均為我院2006年1～12月住院患者，所有病例均符合中華醫學會呼吸病學分會2002年制定的慢性阻塞性肺疾病診治指南標準[1]，排除有充血性心力衰竭、肺結核、惡性腫瘤、支氣管擴張癥、支氣管哮喘等其他疾病者。男23例，女17例，年齡55～85歲。根據第一秒鐘用力肺活量占預計值比例 (FEV1%)分級，II級29例，III級11例。

1.2 治療方法 所有患者常規給予吸氧、抗感染、平喘(氨茶堿、特布他林)及祛痰等治療。在常規治療基礎上，再給予地塞米松5mg靜滴，1次/d，連用3d，停用后改強的松30mg口服，1次/d，連用3d后逐漸減量至停用，療程10～14d，并加用奧美拉唑、硫糖鋁抑酸護胃。同時觀察有無高血糖、高血壓、胃腸不適、電解質紊亂、口咽部霉菌感染等副反應。

1.3 實驗方法

1.3.1 呼吸困難及運動耐力評定 (1)呼吸困難分級：采用英國醫學研究委員會呼吸困難量表評價[2]。0級：除非劇烈活動,無明顯呼吸困難；1級：當快走或上緩坡時有氣短；2級：由于呼吸困難比同齡人步行得慢，或者以自己的速度在平地上行走時需要停下來呼吸；3級：在平地上步行100m或數分鐘后需要停下來呼吸；4級：明顯的呼吸困難，不能離開房屋或者當穿脫衣服時氣短。(2)運動耐力指標：采用 6min步行距離測定。0級：≥350m；1級：250～349m；2級：150～249m；3級：≤149m。

1.3.2 痰標本的收集和處理 患者清晨漱口后咳痰，棄置第一口痰液，用無菌干燥塑料杯留取深部痰液，涂片鏡下觀察，如鱗狀上皮細胞占有核細胞比例＜20%，認為符合痰液標準。計量痰液，加入等量0.1%二硫蘇糖醇(DTT)溶液，玻棒輕攪拌，使痰液充分混勻呈均勻狀態，4℃3 000r/min離心10min，留取上清液，-30℃保存待測IL-8和ECP濃度。

1.3.3 痰液中白細胞總數、嗜酸性粒細胞和嗜中性粒細胞計數 取痰液加入等量0.1%DTT溶液，37℃下孵育30min，離心后棄上清，再用等量生理鹽水混合，制片后染色，光鏡下行細胞計數和分類，計嗜酸性粒細胞比例(E%)、嗜中性粒細胞比例(N%)。

1.3.4 痰中ECP檢測 采用熒光免疫法，用Pharmacia CAP變應原檢測系統(Kabi Pharmacia，瑞典，靈敏度 2μg/L，測定范圍 2～200μg/L)檢測。

1.3.5 痰中IL-8的檢測 IL-8檢測試劑盒(雙抗體夾心ELISA法)購自北京邦定泰克生物技術有限公司，靈敏度：最小可測值達31pg/mL。按說明操作。

1.3.6 肺功能的測定 在留取痰液24h內使用床邊肺功能儀測定肺功能指標。

2 結果

2.1 呼吸困難、運動耐力及肺功能療效 治療后呼吸困難評分及運動耐力評分較治療前下降＞20%，為治療顯效；10%～20%為有效；＜10%為無效。治療后FEV1%較治療前升高＞20%，為治療顯效；10%～20%為有效；＜10%為無效。全身皮質激素治療后，呼吸困難分級評分、運動耐力評分及肺功能均有不同程度的改善。臨床療效見表1。

表1 不同觀察指標對糖皮質激素治療效果的判定 例

2.2 痰液炎癥因子含量及細胞分類比例比較 三種觀察指標結果均一致的病例，代表真正顯效、有效或無效的病例。不同療效組痰液IL-8、ECP含量及嗜酸性粒細胞百分比與糖皮質激素治療的效果呈正相關，相關系數分別為0.63、0.58、0.66；而嗜中性粒細胞百分比則與糖皮質激素治療的效果無關。見表2。

表2 不同療效組痰液炎癥因子含量及細胞分類比例的比較 (±S)

表2 不同療效組痰液炎癥因子含量及細胞分類比例的比較 (±S)

注：與無效組比較，*P＜0.05；與有效組比較，△P ＜0.05。

IL-8(ng/L) ECP(μg/L) E% N%顯效 736.2±210.5*△ 148.9±69.2*△ 5.5±3.0*△ 41.6±8.0有效 552.6±185.8* 96.6±63.7* 4.3±2.7* 44.2±3.7無效 405.3±229.7 41.3±11.1 2.3±2.7 39.4±4.8

3 討論

慢性阻塞性肺疾病以呼氣流速受限為特征，不完全可逆，呈進行性發展。每一次發作可加重肺功能的損害，引起一系列并發癥，嚴重時危及生命。故使急性癥狀得到盡快控制是治療的關鍵問題。目前認為COPD的病理表現以慢性炎癥為特征。細胞類型以巨噬細胞、中性粒細胞為主，數量多于正常人呼吸道中的細胞數，可伴有嗜酸性粒細胞的增多。1980年，Albert等發表了糖皮質激素用于治療COPD急性期的文獻[3]。此后20余年，人們在這方面做了許多工作，大量的事實證明COPD急性期在標準治療的基礎上加用糖皮質激素能夠更快地緩解癥狀[4～6]。因此，糖皮質激素在治療COPD中的作用是肯定的。

一般認為，糖皮質激素改善COPD急性加重期患者肺功能一方面與減少嗜酸性粒細胞數量相關，更主要一方面與減少滲出、水腫、中性粒細胞浸潤，減少氣道分泌物，從而改善肺功能相關。然而，哪些COPD急性加重期患者能從全身短期應用糖皮質激素治療中獲益更多呢？Mapp研究發現，約10%的有哮喘特征的COPD急性加重期患者，經短期使用糖皮質激素治療后，肺功能明顯改善[7]。Pavord等的研究結果也顯示，某些COPD患者的氣道炎癥細胞除嗜中性粒細胞增多外，尚有巨噬細胞和嗜酸性粒細胞增多，痰液中嗜酸性粒細胞增多組COPD患者，糖皮質激素治療可明顯縮短呼吸困難的緩解時間[8]。本研究以COPD急性加重期患者為研究對象，靜脈短期應用地塞米松治療，治療前收集誘導痰液，對痰液中的炎性細胞進行分類，并分析痰液中IL-8及ECP的含量。結果顯示痰液中嗜酸性粒細胞、IL-8及ECP增多的COPD急性加重期患者，可從糖皮質激素治療中獲益更多。從而為臨床上更安全、合理、有效、經濟地使用糖皮質激素提供一定的參考。

[1]中華醫學會呼吸病學分會.慢性阻塞性肺疾病(COPD)診治指南[J].中華結核和呼吸雜志,2002,25(8)：453-460

[2]Celli BR,Macnee W.ATS/ERS Task force.Standards for the diagnosis and treatment of patients with COPD:a summary of the ATS/ERS position paper[J].Eur Respir J,2004,23(6):923-946

[3]AlbertRK,Martin TR,Lewis SW.Controlled clinicaltrialof methylprednisolone in patients with chronic bronchitis and acute respiratory insufficiency[J].Ann Intern Med,1980,92(6):753-758

[4]Niewoehner DE,Erbland ML,Deupree RH,et al.Effect of systemic glucocorticoids on exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease[J].N Engl J Med,1999,340(25):1 941-1 947

[5]Sayiner A,Aytemur ZA,Cirit M,et al.Systemic glucocorticoids in severe exacerbations of COPD[J].Chest,2001,119(3):726-730

[6]Davies L,Angus RM,Calverly PMA.Oral corticosteroids in patients admitted to hospital with exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease:a prospective randomized controlled trial[J].Lancet,1999,354(9177):456-460

[7]Mapp CE.Inhaled glucocorticoids in chronic obstructive pulmonary disease[J].N Engl J Med,2000,343(26):1 960-1 961

[8]Pavord ID,Pizzichini MM,Pizzichini E,et al.The use of induced sputum to investigate airway inflammation[J].Thorax,1997,52(6):498-501