一種促進動物胃腸蠕動的中藥復方注射液對小鼠精子畸形的影響

楊建省，羅永煌，黎曉敏

（西南大學動物科技學院，重慶 400715）

動物消化不良在臨床中經常發(fā)生，會導致動物生產性能下降甚至死亡，往往造成巨大的經濟損失，嚴重妨礙了畜牧業(yè)的發(fā)展。促進動物胃腸蠕動的西藥具有副作用大、長期使用易造成藥物在動物體內的殘留等缺點。中藥制劑恰恰可避免這些弊端，且具有價格低廉、毒性作用小等諸多優(yōu)點，有較好的應用前景[1]。

本實驗室自行研制的一種促進動物胃腸蠕動的中藥復方注射液，經藥效學試驗研究表明，其具有治療動物消化不良的作用。試驗通過小鼠對促進動物胃腸蠕動的高、中、低劑量中藥復方注射液進行了精子畸形試驗，以期了解此注射液對精子有無致畸變作用，從而為其臨床應用提供可靠的理論依據。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

促進動物胃腸蠕動的中藥復方注射液由西南大學藥學院藥理學實驗室提供。

1.2 試驗動物

昆明系SPF級小白鼠50只，由重慶騰鑫生物技術有限公司提供。

1.3 試驗試劑

注射用環(huán)磷酰胺，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產，產品批號09051921。

伊紅染色液，成都科龍化工試劑廠生產，產品批號 090103。

1.4 試驗方法

1.4.1 精子畸形試驗

試驗選取 8周齡、體重為 28～32 g昆明系雄性小鼠50只，隨機分為5組：陰性對照組（滅菌生理鹽水 0.2 mL·10 g－1）、陽性對照組（環(huán)磷酰胺80mg·kg－1）、低劑量組（30 g·kg－1）、中劑量組（60 g·kg－1）、高劑量組（120 g·kg－1）。連續(xù) 5 d 肌肉注射染毒，于首次給藥后第35天處死小鼠，取兩側附睪用眼科剪縱向剪開，置于裝有伊紅溶液2%的0.2mL小試管中，用吸管吹起于管底30～40次，使精子從附睪中充分游離出來，靜置染色 3～5 min，搖勻，吸取精子懸液滴于清潔薄片上，推片晾干，用甲醇固定5min，用水沖洗，干燥后先在低倍鏡下找到背景清晰、精子重疊較少的視野，再用高倍鏡順序檢查精子形態(tài)并計數，每只小鼠至少應檢查1 000個精子[2－3]。精子的畸形主要表現在頭部，其次在尾部，畸形類型有：無鉤、香蕉形、無定形、胖頭、尾折疊、雙頭、雙尾等。記錄異常的精子數。

1.4.2 精子畸形率

精子畸形按式（1）計算：

2 結果

各組小鼠的精子畸形情況見附表和附圖。

附表 一種促進動物胃腸蠕動中藥復方注射液對小鼠精子畸形試驗結果

由附表可知，各劑量組與陰性對照組比較，差異不顯著（P＞0.05）；各劑量組與陽性對照組比較，差異極顯著（P＜0.01）；各劑量組之間無顯著差異（P＞0.05）。說明這種促動物胃腸蠕動的中藥復方注射液對小鼠精子畸形率沒有顯著影響。

附圖 精子畸形試驗照片

3 討論與結論

有關資料證明，精子的發(fā)生受多基因控制，這些基因分布于多條染色體上。精原細胞后期或初級精母細胞早期是對化學誘變劑較為敏感的時期。當環(huán)境中化學物質使精子形成的某些基因發(fā)生突變或表達受到干擾，就會導致精子畸形，致使畸形率增高。因此，小鼠精子畸形實驗是評價環(huán)境理化因子對哺乳動物雄性生殖細胞遺傳學損傷和生殖毒性的一種有效檢測方法[4]。

環(huán)磷酰胺是臨床上廣泛應用的抗腫瘤藥物，同時也是一種生殖細胞毒物，能明顯誘導小鼠精子畸形率增加[5]。本試驗結果表明，在精子畸形試驗中，試驗組中有畸形精子出現，但各劑量組與陰性對照組比較差異不顯著（P＞0.05），各劑量組之間比較差異也不顯著（P＞0.05），且各劑量組、陰性組與陽性組比較差異極顯著（P＜0.01）。說明這種促動物胃腸蠕動的中藥復方注射液是安全的中藥制劑，對雄性小白鼠的精子無致畸變作用。

[1]張秀英,叢霞,張紅等.獸藥乳炎消的一般毒性研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2001（3）:32－33.

[2]盛彩霞,周萍.介紹一種改良伊紅染液的配制法[J].診斷病理學雜志,2006,13（2）:160.

[3]魏青,范瑞泉,陳鐵江,等.小鼠精子畸形試驗改良法和傳統(tǒng)法效果比較[J].華南預防醫(yī)學,2004,30（2）:51－52.

[4]溫得中,劉陽,朱玉琢.甘草對醋酸鉛誘發(fā)小鼠精子畸形的抑制作用[J].吉林大學學報（醫(yī)學版）,2004,30（6）:868－870.

[5]李鳳文,劉榮珍,趙鵬,等.環(huán)磷酰胺對小白鼠精子畸形影響的探討[J].廣西醫(yī)學,2003,25（3）:328－330.