雌孕激素藥物與中老年女性體內氧化應激反應的相關性

于永玲 劉 超 初海鵬

(中國石化集團勝利油田石油管理局勝利醫院婦產科,山東 東營 257055)

女性絕經體內氧化應激反應致使心血管循環系統紊亂風險增加〔1〕。目前普遍應用雌孕激素治療來減輕或消除更年期前后臨床癥狀〔2〕。雌孕激素治療能否影響蛋白質氧化、減緩細胞老化目前沒有確切的結論，本研究評估絕經期女性，雌孕激素治療后體內羰基化水平，為臨床治療提供依據。

1 資料與方法

1.1對象 研究對象為就診于我院婦產科的絕經期女性，既往無血栓、高血壓、糖尿病、代謝疾病等影響心血管系統的疾病，血漿17-β-雌二醇均≤50 pg/ml的健康絕經后女性，無吸煙史、飲酒史、甲狀腺疾病、肝臟疾病。研究前未服用降膽固醇藥物、抗氧化維生素制劑及影響新陳代謝的性激素藥物。隨機分成三組，各組受試者平均年齡、絕經時間、體重指數(BMI)無統計學差異。見表1。口服藥物組予17-β-雌二醇1 mg，1次/d，去氧孕酮5 mg,1次/d。經皮給藥組予17-β-雌二醇50 μg，1次/d，19-炔諾酮250 μg，1次/d；對照組Ⅲ無治療措施。本研究經勝利油田醫院倫理委員會批準，征得納入研究患同意并簽署書面文件。

1.2實驗室檢查 研究開始前例行子宮頸細胞學分析、經陰道超聲評估生殖器官、乳房觸診及X射線等婦科檢查。只有乳腺X線成像及細胞學檢查正常的女性才可以接受激素治療。血液檢查標本采集于隔夜空腹后晨起8:00～9:00,采血位置為肘前靜脈。標本均去除血小板。本研究前儲存溫度為-70℃。使用Multifibren U-kit (Dade-BehringDiagnostics,Warsaw,Poland)測定葡萄糖、17-β-雌二醇、卵泡刺激素(FSH)、纖維蛋白原(Fg)濃度；使用Baker 810血小板計數儀測定血小板計數(PLT)；使用Pathromtin SL試劑(Dade-Behring)測定部分活化凝血酶原時間；血甘油三酯(TG)水平測定在勝利油田醫院檢驗科完成。按照Alamdari等〔6〕報道的方法,使用〔2～4〕-二硝基苯酚抗體試劑(Sigma-Aldrich)通過敏感ELISA法測定血漿羰基化蛋白水平。

2 結 果

各組血清纖維蛋白原濃度有顯著差異(P=0.000)。經治療后雌二醇水平顯著增加，而FSH水平在三組女性中無明顯差異。激素治療6個月后，其血漿蛋白羰基化水平〔口服給藥組(1.79±0.068)nmol/mg;經皮給藥組(1.81±0.074)nmol/mg〕低于對照組〔(2.20±0.107)nmol/mg〕(P=0.000)，但兩種給藥方式血漿蛋白羰基化水平沒有顯著差異(P=0.326)。見表2。

表1 各組一般情況

表2 各實驗室檢查指標比較

3 討 論

人體內的氧化應激反應取決于活性氧(ROS)的產生與抗氧化系統清除之間的平衡。ROS能夠與體內各種生物分子產生反應使之失去正常功能，尤其是蛋白質分子〔4〕。蛋白質分子超氧化、羥基化、過氧化、臭氧化、氧化、過氧硝酸鹽化等導致蛋白質功能紊亂〔5〕。氧自由基與氨基酸殘基相互作用產生酮或醛衍生物統稱為羰基化。羰基化蛋白質與二硝基苯肼(DNPH)誘導氧化應激反應〔6〕。機體老化及多種疾病過程體內的血漿蛋白羰基化均有增加〔7〕。很多神經退行性疾病與組織內抗蛋白質水解的羰基化蛋白質堆積直接相關〔8〕。已經證明氧自由基激活蛋白質氧化損傷在老化過程中主要作用〔9〕。多數的氧化應激研究都是通過測定蛋白的過氧化反應進行評估，并未關注血漿蛋白氧化反應。

雖然荷爾蒙激素可以減輕絕經期癥狀，能夠預防骨質疏松以及冠心病，但其抗氧化作用尚存在爭議。雌激素的類固醇環能夠有效清除羥自由基，產生羥基化產物。雌激素在體內外都能夠減少ROS種類，減輕氧化應激癥狀。絕經后女性卵巢產生雌激素減少可導致體內氧化應激反應的增加〔10〕。目前的研究部分解釋了雌激素如何起到抗氧化作用，并解釋了雌孕激素口服給藥途徑作用強于經皮給藥。雌激素分子本身的化學結構特性決定了其本身具有抗氧化作用。另一方面，雌激素能夠間接增加如谷胱甘肽過氧化物酶(Gpx)和錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的活性。很多研究證實單純口服雌激素的抗氧化作用更強〔11〕。本研究也顯示雌激素經口服給藥途徑比經皮給藥途徑血漿蛋白羰基化水平要低，但是沒有顯著的統計學差異。雌激素口服后經消化道吸收入肝，在肝細胞內抑制催化蛋白1和k-B因子〔12〕從而中和氧化應激反應。本研究中口服給藥組和經皮給藥兩組患者均給予雌孕激素復合給藥，治療后羰基化水平降低，雌孕激素復合應用時作用明顯強于單獨應用〔13〕。多數研究通過不同方法關注脂質氧化易感性〔14〕，重點不在脂質氧化。本研究的重點關注女性荷爾蒙激素治療后血漿蛋白質氧化應激，發現絕經后女性未經荷爾蒙激素治療血漿蛋白質氧化應激水平高于治療組。因此得知，絕經后女性血漿蛋白質高羰基化是因為卵巢失功能，雌激素替代療法能夠使體內氧化還原反應重新達到平衡〔15〕。總之，無論通過何種給藥途徑，女性雌孕激素聯合治療均能減少血漿蛋白質氧化應激反應，而口服給藥效果更好。

4 參考文獻

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