定性檢測飼料中三聚氰胺便捷方法的探討

晉中職業技術學院 郭春燕 楊繼生

三聚氰胺是一種三嗪類含氮雜環有機化合物，是有機化工原料，簡稱三胺（又叫氰尿酰胺、三聚氰酰胺）。性狀為純白色單斜棱晶體，無味，呈弱堿性，能夠與各種酸反應生成三聚氰胺鹽；在強酸或強堿液中，胺基逐步被羥基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸，三氯氰胺具有弱毒性。

由于目前采用的凱氏定氮法估測食品和飼料中蛋白質含量方法存在缺陷，三聚氰胺被不法廠商摻進食品或飼料中，以提升食品或飼料中蛋白質含量的檢測值。自三聚氰胺事件后，高效液相色譜法（GB/T 2-22308088；倪沁顏，2008）、氣相色譜法（王征，2008）、試劑盒等多種方法被推出，然而這些方法都需要特定的檢測設備，在基層使用推廣存在很大困難。因此，本實驗探討采用簡單的實驗方法進行三聚氰胺最小含量的檢測，具有成本低、操作簡單等特點，為基層單位三聚氰胺的檢測提供可行的方法依據。

1 實驗原理

三聚氰胺與三聚氰酸并用，會在水中結合成異氰尿酸蜜胺鹽，異氰尿酸蜜胺鹽不溶性水，是白色沉淀物，形成乳濁液，白色物在溶液中的比例可以反映出異氰尿酸蜜胺鹽的多少，最后確定三聚氰胺的含量。

2 材料與方法

2.1 實驗設計 本實驗分為兩個實驗，每個實驗設3個處理，各處理添加不同濃度的三聚氰胺，具體見表1。

2.2 操作過程

2.2.1 實驗一 水溶液組：吸取10 mL蒸餾水于試管中，按照比例添加純品三聚氰胺，漩渦振蕩混勻，6000 r/min離心5 min，吸取5 mL上清液轉移到另一試管中，向上清液中滴加三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

魚粉組：稱取樣品5 g于燒杯中，加入室溫蒸餾水75 mL，按照比例添加純品三聚氰胺，加熱煮沸30 min，放置過濾，吸取10 mL濾液，6000 r/min離心20 min；吸取上清液5 mL入試 管中，加入三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

豆粕組：稱取樣品5 g于燒杯中，加入室溫蒸餾水75 mL，按照比例添加純品三聚氰胺，加熱煮沸30 min，放置過濾，吸取10 mL濾液，6000 r/min離心20 min；吸取上清液5 mL入試管中，加入三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

表1 實驗一和實驗二不同處理組中三氯氰胺的含量

2.2.2 實驗二 水溶液組：吸取10 mL蒸餾水于試管中，按照比例添加純品三聚氰胺；準確吸取50 mL三氯乙酸溶液（1%）和2 mL乙酸鉛溶液（2.2%）加入試管中，漩渦振蕩混勻10 min，6000 r/min離心5 min；吸取上清液5 mL，滴加三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

魚粉組：稱取魚粉5 g于燒杯中，加入室溫蒸餾水75 mL，按照比例添加純品三聚氰胺；準確吸取50 mL三氯乙酸溶液（1%）和2 mL乙酸鉛溶液（2.2%）加入試管中，漩渦振蕩混勻10 min，6000 r/min離心5 min；吸取上清液5 mL，滴加三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

豆粕組：稱取豆粕5 g于燒杯中，加入室溫蒸餾水75 mL，按照比例添加純品三聚氰胺；準確吸取50 mL三氯乙酸溶液（1%）和2 mL乙酸鉛溶液（2.2%）加入試管中，漩渦振蕩混勻10 min，6000 r/min離心5 min；吸取上清液5 mL，滴加三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

3 結果與分析

3.1 實驗一沉淀結果 見表2。

表2 實驗一組的沉淀現象

由表2可知，在水溶液組中，滴加5滴三聚氰酸飽和液后，1.1 mg/100 mL試管立即出現渾濁，隨著濃度增加渾濁度增加，0.1 mg/100 mL試管顯示不明顯。1 h后1.1 mg/100 mL試管底部出現白色沉淀，0.1 mg/100 mL試管仍無顯示。2 h后試管底部沉淀增多，上部溶液開始出現澄清，0.1 mg/100 mL試管仍無顯示。5 h后試管底部沉淀，上部溶液澄清，0.1 mg/100 mL試管無沉淀現象。由此可見，三聚氰胺在水溶液中含量為1.1 mg/100 mL時，用三聚氰酸飽和液滴定有沉淀現象產生。

實驗一的魚粉組和豆粕組滴加三聚氰酸后，魚粉組中三氯氰胺含量為50 mg/kg時，試管有較淡的分層界面；1 h后，可見200 mg/kg和250 mg/kg試管有明顯渾濁懸浮物，50 mg/kg到100 mg/kg試管可見分層面；12 h后160 mg/kg到250 mg/kg試管渾濁下沉，上部溶液開始澄清；36 h后渾濁全部沉淀至底部，但是50 mg/kg和100 mg/kg試管無沉淀。滴加到豆粕組后不顯示，0.5 h后200 mg/kg和250 mg/kg試管液面上層出現渾濁；5 h后 160 mg/kg到250 mg/kg試管液面上層出現明顯渾濁；36 h后140 mg/kg到250 mg/kg試管底部出現明顯沉淀晶體，但100 mg/kg試管無沉淀。結果表明，未經三氯乙酸處理的魚粉在160 mg/kg有沉淀現象，豆粕在140 mg/kg有沉淀現象。

3.2 實驗二沉淀結果 見表3。

由表3可見，此組實驗中水溶液處理組的沉淀現象與實驗一的水溶液組一致。三聚氰胺在經三氯乙酸和乙酸鉛處理的水溶液中含量為1.1 mg/100 mL時，可用三聚氰酸飽和液滴定有沉淀現象顯示。

表3 實驗二組的沉淀現象

采用三氯乙酸和乙酸鉛處理的魚粉組滴加三聚氰酸飽和液后，無明顯顯示，僅見110 mg/kg試管有輕微分層界面。18 h后可見70 mg/kg到110 mg/kg試管均有渾濁分層面。豆粕組滴加后無明顯顯示，僅110 mg/kg試管有輕微分層界面。0.5 h后，60 mg/kg試管開始出現上層混濁物。1 h后60 mg/kg到110 mg/kg試管均出現上層混濁物。18 h后液面分層不明顯，但是可見試管底部有少許沉淀生成。因此，經三氯乙酸和乙酸鉛處理的樣品，魚粉和豆粕分別在70 mg/kg和60 mg/kg有沉淀現象產生。

4 小結

通過本實驗得知：在使用三氯乙酸和乙酸鉛處理樣品時，可在一定程度上去除樣品中的干擾因素，提高反應的靈敏度。當魚粉和豆粕中三氯氰胺含量≥70 mg/kg和≥60 mg/kg時，可簡便快捷的定性測出。

[1]GB/T 2-22308088.原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法[J].生命科學儀器，2008，6.

[2]倪沁顏.高校液相色譜法測定飼料中三聚氰胺的含量[J].福建分析測試，2008，7（1）：57 ～59.

[3]王征.GC法測定動物食品中三聚氰胺[J].福建分析測試，2008，7（2）：1～4.