6種殺菌劑對馬鈴薯晚疫病菌的室內毒力測定

丁明亞，秦宇軒,朱杰華，楊志輝*，陶 晡，丁紅田

（1.河北省圍場縣馬鈴薯研究所，河北 圍場 068550；2.河北農業大學食品科技學院，河北 保定 071001；3.河北農業大學植物保護學院，河北 保定 071001；4.河北省動物衛生監督所，河北 石家莊 050081）

近年來在政府的鼓勵、專家技術支持、農民協會的積極推動下，我國的馬鈴薯栽培面積不斷擴大。而馬鈴薯晚疫病是最具毀滅性的病害之一，常常造成馬鈴薯的絕產，該病是制約馬鈴薯生產和實現產業化一大障礙。

在我國，種植抗病品種是馬鈴薯晚疫病防治的基礎，藥劑防治是馬鈴薯晚疫病防治的關鍵。而在藥劑的選擇時，最重要的是要考慮藥劑對病原菌的殺滅能力，也要考慮病害的發生時期，同時還要考慮藥劑的抗藥性。由于引起馬鈴薯晚疫病的致病疫霉在演化上與真菌相差甚遠，其分類地位屬于卵菌[1]，其代謝途徑與真菌有很大不同，因此，傳統上用于防治真菌的藥劑對卵菌往往效果并不一定很好。在防治馬鈴薯晚疫病的藥劑篩選中，田間藥效試驗相對較多，涉及的藥劑種類也很多，主要包括甲霜靈、甲霜靈錳鋅、金雷多米爾、霜脲錳鋅（克露）、大生（代森錳鋅）、乙磷鋁錳鋅、瑞撲、安克、殺毒礬、普力克、可殺得、瑞凡和銀法利（氟吡菌胺·霜霉威）[2-8]。而通過測定殺菌劑的室內毒力可以更清楚的了解殺菌劑對馬鈴薯晚疫病菌的作用大小。

為了更好的指導馬鈴薯晚疫病的化學防治，本試驗選擇了6種當前生產上常用于晚疫病防治的殺菌劑，在室內采用菌落直徑法測定其對晚疫病菌的毒力，同時選用了4株馬鈴薯晚疫病菌來測定殺菌劑的毒力，該研究可為馬鈴薯晚疫病化學防治綜合治理方案的制定提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

分別選用2007年采自河北省承德市圍場縣克勒溝鄉的菌株JW07-39和JW07-27以及河北省張家口市崇禮縣獅子溝鄉的菌株JC07-3和JC07-9，共計4株馬鈴薯晚疫病菌菌株用于6種殺菌劑藥劑毒力評價試驗。

1.2 供試藥劑

試驗選擇了生產上防治馬鈴薯晚疫病常用的金雷多米爾（瑞士先正達作物保護有限公司）、殺毒礬（瑞士先正達作物保護有限公司）、克露（美國杜邦公司）、克霜氰（天津市東方農藥廠）、大生M-45（南通德斯益農化工有限公司）、進富（河北雙吉化工有限公司）6種殺菌劑，其有效成分見表1。

表1 供試殺菌劑的有關信息Table 1 Information on six tested fungicides

1.3 供試培養基

黑麥培養基：黑麥60 g，瓊脂粉12 g，蔗糖20 g，補充蒸餾水至1 000 mL。

1.4 菌落直徑法測定殺菌劑對晚疫病菌的抑菌效果

為了準確測定供試6種殺菌劑對晚疫病菌的室內毒力，在預試驗的基礎上，于含有6種殺菌劑的平板上分設5 μg·mL-1，2.5 μg·mL-1，1 μg·mL-1，0.1 μg·mL-1和0μg·mL-15個濃度梯度來進行抑菌試驗，每個藥劑測定其對4個菌株的EC50值，并求其平均值作為該藥劑對晚疫病的EC50值。以清水作為空白對照，每處理設4次重復。

用直徑為5 mm的打孔器從在溫度18℃預培養10 d左右的馬鈴薯晚疫病菌的菌落邊緣打取菌盤，將其接種到含藥培養皿中央，在18℃恒溫培養箱黑暗培養，待對照菌落直徑至少50 mm時，采用十字交叉法測定菌落直徑并記錄。根據以下公式計算6種殺菌劑對菌絲生長的抑制百分率（%），其中：

菌落增長直徑（mm）=菌落測量直徑（mm）-菌盤直徑（mm）

抑制率（%）=[對照菌落增長直徑（mm）-含藥培養基上菌落增長直徑（mm）]/對照菌落增長直徑（mm）×100

根據濃度對數與幾率值回歸法求各藥劑對馬鈴薯晚疫病菌的劑量反應曲線的回歸方程、抑制中濃度EC50值。

2 結果與分析

從測定的6種殺菌劑對4個晚疫病的毒力結果可知，被測6種殺菌劑對晚疫病菌都有很強的抑制作用，其對4株晚疫病菌的抑制中濃度（EC50）和平均抑制中濃度見圖1。從毒力測定結果可知，被測每種藥劑在4個不同菌株間有一定的差異，因此，本研究用殺菌劑對4個菌株的平均EC50代表該藥劑對馬鈴薯晚疫病菌的毒力高低，可知克露對晚疫病菌毒力最強，其EC50值為0.16 μg·mL-1，而大生的毒力最差，其EC50值為2.89 μg·mL-1，其余4種藥劑按毒力大小依次為克霜氰、金雷多米爾、進富和殺毒礬，其EC50值分別為0.24 μg·mL-1、0.28 μg·mL-1、0.43μg·mL-1和 1.17μg·mL-1。克露和克霜氰有效成分相同，其對被測4株晚疫病菌毒力相當，而大生M45和進富有效成分盡管都是代森錳鋅，但毒力相差較大，進富毒力是大生的6.7倍。

3 討論

本研究室內毒力測定表明，馬鈴薯生產上防治晚疫病常用藥劑克露、克霜氰、金雷、進富、殺毒礬和大生6種殺菌劑對晚疫病菌都有很強的抑制作用，但相同成分不同劑型的殺菌劑對病原菌的毒力差異很大，如有效成分均為代森錳鋅的大生和進富對4株供試晚疫病菌的毒力（EC50）相差6.7倍，這可能與兩種藥劑的加工劑型有關，大生為可濕性粉劑，而進富為水分散顆劑，但不同劑型如何影響其對晚疫病的毒力以及在其它病原菌中的抑菌效果仍需進一步試驗驗證。

6種殺菌劑對晚疫病菌的毒力與前人其他研究結果存在一定的差異。本研究測定了兩個不同廠家的72%霜脲·錳鋅：克露（美國杜邦公司）和克霜氰（天津市東方農藥廠）對4株馬鈴薯晚疫病菌的毒力，其EC50分別為0.16 μg·mL-1和0.24 μg·mL-1，與朱桂寧等[9]測定由美國杜邦公司提供95%霜脲氰原藥對晚疫病菌的抑制效果一致，而與吳仁峰[10]測定的由北京華戎生物激素廠生產的72%霜脲·錳鋅對晚疫病菌的毒力（EC50=5.33μg·mL-1）相差22倍，有效成分相同的藥劑毒力相差如此之大，說明不同廠家生產的藥劑質量有明顯差異。而本研究測定殺毒礬對馬鈴薯晚疫病菌 EC50為1.17 μg·mL-1，與吳仁峰[10]測定結果相當（EC50=2.05 μg·mL-1），殺毒礬都是瑞士先正達作物保護有限公司生產，以上藥劑間的微小差異反應了不同研究者使用的晚疫病菌菌株對結果的影響。

采用平板法測定的殺菌劑室內毒力僅代表藥劑與病原菌直接接觸時，藥劑對病原菌絲生長的抑制作用，而藥劑在田間對病害的防治效果不僅與藥劑對病原菌菌絲生長抑制有關，還與對孢子產生、孢子萌發、藥劑的持效期、施藥技術、施藥時期等因素有關，因此，本研究的室內毒力測定結果可能與田間的藥劑防治效果不同，但仍可對防治晚疫病藥劑的選擇提供理論支持。

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