6種殺菌劑對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

丁明亞，秦宇軒,朱杰華，楊志輝*，陶 晡，丁紅田

（1.河北省圍場(chǎng)縣馬鈴薯研究所，河北 圍場(chǎng) 068550；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院，河北 保定 071001；3.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，河北 保定 071001；4.河北省動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，河北 石家莊 050081）

近年來在政府的鼓勵(lì)、專家技術(shù)支持、農(nóng)民協(xié)會(huì)的積極推動(dòng)下，我國的馬鈴薯栽培面積不斷擴(kuò)大。而馬鈴薯晚疫病是最具毀滅性的病害之一，常常造成馬鈴薯的絕產(chǎn)，該病是制約馬鈴薯生產(chǎn)和實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化一大障礙。

在我國，種植抗病品種是馬鈴薯晚疫病防治的基礎(chǔ)，藥劑防治是馬鈴薯晚疫病防治的關(guān)鍵。而在藥劑的選擇時(shí)，最重要的是要考慮藥劑對(duì)病原菌的殺滅能力，也要考慮病害的發(fā)生時(shí)期，同時(shí)還要考慮藥劑的抗藥性。由于引起馬鈴薯晚疫病的致病疫霉在演化上與真菌相差甚遠(yuǎn)，其分類地位屬于卵菌[1]，其代謝途徑與真菌有很大不同，因此，傳統(tǒng)上用于防治真菌的藥劑對(duì)卵菌往往效果并不一定很好。在防治馬鈴薯晚疫病的藥劑篩選中，田間藥效試驗(yàn)相對(duì)較多，涉及的藥劑種類也很多，主要包括甲霜靈、甲霜靈錳鋅、金雷多米爾、霜脲錳鋅（克露）、大生（代森錳鋅）、乙磷鋁錳鋅、瑞撲、安克、殺毒礬、普力克、可殺得、瑞凡和銀法利（氟吡菌胺·霜霉威）[2-8]。而通過測(cè)定殺菌劑的室內(nèi)毒力可以更清楚的了解殺菌劑對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的作用大小。

為了更好的指導(dǎo)馬鈴薯晚疫病的化學(xué)防治，本試驗(yàn)選擇了6種當(dāng)前生產(chǎn)上常用于晚疫病防治的殺菌劑，在室內(nèi)采用菌落直徑法測(cè)定其對(duì)晚疫病菌的毒力，同時(shí)選用了4株馬鈴薯晚疫病菌來測(cè)定殺菌劑的毒力，該研究可為馬鈴薯晚疫病化學(xué)防治綜合治理方案的制定提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

分別選用2007年采自河北省承德市圍場(chǎng)縣克勒溝鄉(xiāng)的菌株JW07-39和JW07-27以及河北省張家口市崇禮縣獅子溝鄉(xiāng)的菌株JC07-3和JC07-9，共計(jì)4株馬鈴薯晚疫病菌菌株用于6種殺菌劑藥劑毒力評(píng)價(jià)試驗(yàn)。

1.2 供試藥劑

試驗(yàn)選擇了生產(chǎn)上防治馬鈴薯晚疫病常用的金雷多米爾（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司）、殺毒礬（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司）、克露（美國杜邦公司）、克霜氰（天津市東方農(nóng)藥廠）、大生M-45（南通德斯益農(nóng)化工有限公司）、進(jìn)富（河北雙吉化工有限公司）6種殺菌劑，其有效成分見表1。

表1 供試殺菌劑的有關(guān)信息Table 1 Information on six tested fungicides

1.3 供試培養(yǎng)基

黑麥培養(yǎng)基：黑麥60 g，瓊脂粉12 g，蔗糖20 g，補(bǔ)充蒸餾水至1 000 mL。

1.4 菌落直徑法測(cè)定殺菌劑對(duì)晚疫病菌的抑菌效果

為了準(zhǔn)確測(cè)定供試6種殺菌劑對(duì)晚疫病菌的室內(nèi)毒力，在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，于含有6種殺菌劑的平板上分設(shè)5 μg·mL-1，2.5 μg·mL-1，1 μg·mL-1，0.1 μg·mL-1和0μg·mL-15個(gè)濃度梯度來進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，每個(gè)藥劑測(cè)定其對(duì)4個(gè)菌株的EC50值，并求其平均值作為該藥劑對(duì)晚疫病的EC50值。以清水作為空白對(duì)照，每處理設(shè)4次重復(fù)。

用直徑為5 mm的打孔器從在溫度18℃預(yù)培養(yǎng)10 d左右的馬鈴薯晚疫病菌的菌落邊緣打取菌盤，將其接種到含藥培養(yǎng)皿中央，在18℃恒溫培養(yǎng)箱黑暗培養(yǎng)，待對(duì)照菌落直徑至少50 mm時(shí)，采用十字交叉法測(cè)定菌落直徑并記錄。根據(jù)以下公式計(jì)算6種殺菌劑對(duì)菌絲生長的抑制百分率（%），其中：

菌落增長直徑（mm）=菌落測(cè)量直徑（mm）-菌盤直徑（mm）

抑制率（%）=[對(duì)照菌落增長直徑（mm）-含藥培養(yǎng)基上菌落增長直徑（mm）]/對(duì)照菌落增長直徑（mm）×100

根據(jù)濃度對(duì)數(shù)與幾率值回歸法求各藥劑對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的劑量反應(yīng)曲線的回歸方程、抑制中濃度EC50值。

2 結(jié)果與分析

從測(cè)定的6種殺菌劑對(duì)4個(gè)晚疫病的毒力結(jié)果可知，被測(cè)6種殺菌劑對(duì)晚疫病菌都有很強(qiáng)的抑制作用，其對(duì)4株晚疫病菌的抑制中濃度（EC50）和平均抑制中濃度見圖1。從毒力測(cè)定結(jié)果可知，被測(cè)每種藥劑在4個(gè)不同菌株間有一定的差異，因此，本研究用殺菌劑對(duì)4個(gè)菌株的平均EC50代表該藥劑對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的毒力高低，可知克露對(duì)晚疫病菌毒力最強(qiáng)，其EC50值為0.16 μg·mL-1，而大生的毒力最差，其EC50值為2.89 μg·mL-1，其余4種藥劑按毒力大小依次為克霜氰、金雷多米爾、進(jìn)富和殺毒礬，其EC50值分別為0.24 μg·mL-1、0.28 μg·mL-1、0.43μg·mL-1和 1.17μg·mL-1。克露和克霜氰有效成分相同，其對(duì)被測(cè)4株晚疫病菌毒力相當(dāng)，而大生M45和進(jìn)富有效成分盡管都是代森錳鋅，但毒力相差較大，進(jìn)富毒力是大生的6.7倍。

3 討論

本研究室內(nèi)毒力測(cè)定表明，馬鈴薯生產(chǎn)上防治晚疫病常用藥劑克露、克霜氰、金雷、進(jìn)富、殺毒礬和大生6種殺菌劑對(duì)晚疫病菌都有很強(qiáng)的抑制作用，但相同成分不同劑型的殺菌劑對(duì)病原菌的毒力差異很大，如有效成分均為代森錳鋅的大生和進(jìn)富對(duì)4株供試晚疫病菌的毒力（EC50）相差6.7倍，這可能與兩種藥劑的加工劑型有關(guān)，大生為可濕性粉劑，而進(jìn)富為水分散顆劑，但不同劑型如何影響其對(duì)晚疫病的毒力以及在其它病原菌中的抑菌效果仍需進(jìn)一步試驗(yàn)驗(yàn)證。

6種殺菌劑對(duì)晚疫病菌的毒力與前人其他研究結(jié)果存在一定的差異。本研究測(cè)定了兩個(gè)不同廠家的72%霜脲·錳鋅：克露（美國杜邦公司）和克霜氰（天津市東方農(nóng)藥廠）對(duì)4株馬鈴薯晚疫病菌的毒力，其EC50分別為0.16 μg·mL-1和0.24 μg·mL-1，與朱桂寧等[9]測(cè)定由美國杜邦公司提供95%霜脲氰原藥對(duì)晚疫病菌的抑制效果一致，而與吳仁峰[10]測(cè)定的由北京華戎生物激素廠生產(chǎn)的72%霜脲·錳鋅對(duì)晚疫病菌的毒力（EC50=5.33μg·mL-1）相差22倍，有效成分相同的藥劑毒力相差如此之大，說明不同廠家生產(chǎn)的藥劑質(zhì)量有明顯差異。而本研究測(cè)定殺毒礬對(duì)馬鈴薯晚疫病菌 EC50為1.17 μg·mL-1，與吳仁峰[10]測(cè)定結(jié)果相當(dāng)（EC50=2.05 μg·mL-1），殺毒礬都是瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司生產(chǎn)，以上藥劑間的微小差異反應(yīng)了不同研究者使用的晚疫病菌菌株對(duì)結(jié)果的影響。

采用平板法測(cè)定的殺菌劑室內(nèi)毒力僅代表藥劑與病原菌直接接觸時(shí)，藥劑對(duì)病原菌絲生長的抑制作用，而藥劑在田間對(duì)病害的防治效果不僅與藥劑對(duì)病原菌菌絲生長抑制有關(guān)，還與對(duì)孢子產(chǎn)生、孢子萌發(fā)、藥劑的持效期、施藥技術(shù)、施藥時(shí)期等因素有關(guān)，因此，本研究的室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果可能與田間的藥劑防治效果不同，但仍可對(duì)防治晚疫病藥劑的選擇提供理論支持。

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