鯊魚肝鐵蛋白亞基解離與組裝機理的研究
2010-04-12 00:00:00林青陳平季學濤柯才煥黃河清
分析化學 2010年2期
摘 要 小批量制備質譜純鯊魚肝鐵蛋白(Liver Ferritin of Sphyrna zygaena， SZLF)。在弱酸介質(pH 1.0)中，天然電泳結果顯示，SZLF蛋白質亞基20 min后開始解離。選用透射電子顯微鏡跟蹤SZLF亞基解離與重組裝全過程和蛋白殼與鐵核尺寸變化， 發現SZLF在亞基酸解離過程中，隨著pH值的降低，鐵核和蛋白殼的尺寸呈現相同的變化趨勢，這種變化趨勢可能與鐵核內層鐵的釋放和蛋白殼的解離與去折疊有關。SZLF蛋白殼的重組裝過程則是一個快速過程，并且是由松散熔球態向緊密態轉變的過程。SZLF由單類型亞基組成，而馬脾鐵蛋白(Horse Spleen Ferritin ， HSF)由H和L兩種亞基類型組成。在基質pH 3.0條件和激光輔助下，混合HSF和SZLF仍然可釋放各自的亞基且形成準亞基離子，供基質輔助激光解析電離飛行時間質譜分析，說明此時SZLF的亞基間相互作用強度減弱但并沒有去折疊。TEM技術在鐵蛋白解離和重組裝過程中的應用，為進一步研究鐵蛋白納米包裝的過程和機理提供新穎的、可行的和更加直觀的研究手段。
關鍵詞 鐵蛋白; 電子顯微鏡; 亞基解離與組裝; 基質輔助激光解析電離飛行時間質譜
