大腸桿菌O152中wfgD基因編碼的β-1,3-葡萄糖基轉移酶產物結構的質譜表征

摘 要 大腸桿菌O152抗原的寡糖重復單位中含葡萄糖-β-1，3-N-乙酰葡萄糖胺(Glc-β-1，3-GlсNAc)連接鍵。本研究采用電噴霧離子化多級串聯質譜技術對以人工合成的天然受體底物的結構類似物苯氧基十一烷二磷酸-N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc-β-PO3-PO3-(CH2)11-O-phenyl(GlcNAc-PP-PhU))為受體底物，尿苷二磷酸葡萄糖(UDP-Glc)為給予體底物的酶促反應產物進行了詳細的結構表征。電噴霧離子化多級串聯質譜圖中觀察到的主要碎片源于磷酸二酯鍵部分和糖苷鍵的裂解。此外，由觀察到的二糖產物非還原端碎片獲得了序列信息；跨環斷裂碎片及源于吡喃環取代基消除的 ‘內在’ 碎裂離子可提供組成產物的單糖殘基連接方式信息。廣泛的碎裂信息表明wfgD基因編碼UDP-Glc: GlcNAc-pyrophosphate-lipid 中的β-1-3葡萄糖基轉移酶。

關鍵詞 糖基轉移酶；電噴霧離子化多級質譜；大腸桿菌