電擊法磁性納米顆粒作為水稻轉(zhuǎn)基因載體的研究

摘 要 建立了以磁性納米顆粒為載體，由電擊法介導(dǎo)基因?qū)胫参锛?xì)胞的優(yōu)化方法。制備了粒徑小于10 nm的磁性納米顆粒，與綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein，GFP)基因融合制備基因載體，同時，制備水稻懸浮細(xì)胞，加入電極杯中，調(diào)節(jié)電擊條件為：電壓分別是800，1000和1200 V，電容25 μF，電阻200 Ω， 直徑10 mm，電擊數(shù)次。利用倒置熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)化后的懸浮細(xì)胞，可以明顯看到綠色熒光蛋白在水稻細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。說明納米顆粒基因載體在電擊作用下能有效進(jìn)入細(xì)胞，利用磁性納米顆粒作為基因載體電擊法轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞初步成功。

關(guān)鍵詞 磁性納米顆粒；基因載體；電擊；基因轉(zhuǎn)導(dǎo)；水稻細(xì)胞