我校國(guó)家自然科學(xué)基金《新型抗菌劑-重組雞β-防御素蛋白的制備及其生物學(xué)作用的初步研究》通過(guò)驗(yàn)收

由馬得瑩教授主持的《新型抗菌劑-重組雞β-防御素蛋白的制備及其生物學(xué)作用的初步研究》通過(guò)驗(yàn)收。

主要技術(shù)內(nèi)容：由于飼料中長(zhǎng)期使用抗生素，尤其是人類(lèi)常用抗生素會(huì)導(dǎo)致抗生素在畜產(chǎn)品中殘留及細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，通過(guò)食物鏈威脅人類(lèi)健康。因此，生產(chǎn)者們迫切需要一種既有效又有利于環(huán)保的新生物制劑來(lái)控制畜禽疫病、改善雞肉品質(zhì)。抗菌肽-雞β-防御素是雞體內(nèi)產(chǎn)生的一種具有廣譜抗菌活性的小分子多肽。課題組在前期研究的基礎(chǔ)上，在體外高效表達(dá)Gal-6、Gal-8和Gal-9蛋白。然后，分別以嚴(yán)重危害肉雞健康的細(xì)菌：大腸桿菌和沙門(mén)氏菌，病毒：禽流感，新城疫和傳染性支氣管炎等為研究模型，探討上述β-防御素在體內(nèi)、外的抗菌、抗病毒活性。另外，以常用飼用抗生素作對(duì)照，分別從添加途徑、添加劑量與添加階段三個(gè)方面研究上述雞β-防御素蛋白對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能、腸道微生態(tài)區(qū)系變化和免疫功能等的影響。以期能部分替代飼用抗生素，為生產(chǎn)綠色無(wú)公害雞肉提供新的途徑或思路。

禽類(lèi)是眾多人畜共患病，如沙門(mén)氏菌、禽流感等病原的攜帶者，這些病原不僅是造成畜產(chǎn)品污染的原因之一，同時(shí)也嚴(yán)重威脅人、畜的健康。因此，保證禽類(lèi)健康，最大潛力地發(fā)揮其先天性免疫功能，對(duì)維護(hù)人、畜健康，提高禽類(lèi)的生產(chǎn)性能與禽產(chǎn)品安全性等都有重要意義。雞抗菌肽屬β-防御素類(lèi)，為防御素三大亞類(lèi)（α、β與θ）之一，為雞先天性免疫的重要組成部分，在雞的防御系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。研究采用RT-PCR法，分別從雞組織中擴(kuò)增到 Gallinacin（Gal）Gal-2、Gal-4、Gal-6、Gal-8 與 Gal-9 等 5 個(gè)基因。Gal-2、Gal-4、Gal-6、Gal-8 和 Gal-9前體肽分別由64、67、66、67和66個(gè)氨基酸殘基組成。并發(fā)現(xiàn)上述基因在雞體內(nèi)各組織器官中廣泛地表達(dá)。我們?cè)谠吮磉_(dá)了這5株重組蛋白，這些重組蛋白在原核中均以包涵體形式存在，經(jīng)裂解、復(fù)性后，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌與陰性菌都有抗菌活性。并對(duì)溫度和酸堿度有很高的穩(wěn)定性。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，這5株重組蛋白在較低濃度便有抗雞傳染性支氣管炎病毒作用。經(jīng)口服上述5株重組蛋白后，與對(duì)照組相比，上述重組蛋白對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能有提高趨勢(shì)，但是差異不顯著。