明膠顆粒凝集(PA)法檢測HIV抗體假陽性因素分析

周志軍，豐 亮，王潤貴，喻 娜，高 慶

(江西省皮膚病專科醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 南昌 330001)

艾滋病病毒(HIV)及其相關(guān)標(biāo)志物的檢測是預(yù)防HIV感染和艾滋病臨床治療中重要的環(huán)節(jié)，在艾滋病的防治工作中具有重要作用。目前作為診斷手段使用的檢測主要包括抗HIV病毒抗體檢測、病毒培養(yǎng)、核酸檢測和抗原檢測，其中對病毒抗體的檢測是常規(guī)使用的方法。因HIV感染機(jī)體后，HIV抗體是最易檢出且持續(xù)時間最長的免疫標(biāo)志物，而且這類檢測特異性、敏感性較高，方法相對簡便、成熟。鑒于本實(shí)驗(yàn)室日常標(biāo)本量少，檢測周期短的情況，我們將明膠顆粒凝集(PA)法作為HIV抗體檢測首選初篩法，對于陽性標(biāo)本再用ELISA法進(jìn)行檢測，并送省疾控中心進(jìn)行確證，結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 所有血清標(biāo)本均來自我院2007年1月～2009年11月性病門診患者，共1680例。

1.2 方法 所有標(biāo)本均使用日本富士瑞必歐生產(chǎn)的人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒(PA法)進(jìn)行HIV抗體初篩檢測，陽性結(jié)果的標(biāo)本再用萬泰生物公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫試劑盒(ELISA)進(jìn)行檢測，最后送省疾病預(yù)防控制中心采用蛋白印跡法進(jìn)行確證。標(biāo)本檢測均嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作和判斷結(jié)果，且同時測定陰性和陽性對照血清。

2 結(jié)果 1680份血清標(biāo)本檢測結(jié)果見表1。

表1 1680例血清標(biāo)本檢測結(jié)果

3 討論

1680 例血清標(biāo)本采用PA法檢測出12例陽性結(jié)果，采用ELISA法檢測后9例呈陽性，經(jīng)省疾病預(yù)防控制中心確證8例血清標(biāo)本陽性，采用PA法檢測有4例血清標(biāo)本出現(xiàn)假陽性，ELISA法1例假陽性。PA為迅速、簡便、敏感度高的一種篩選辦法，適合于標(biāo)本量少，不能批量檢測的實(shí)驗(yàn)室，且不需要任何特殊儀器，其結(jié)果用肉眼可判別，但多種因素可導(dǎo)致HIV結(jié)果呈假陽性：①試劑敏感度高：初篩所使用的試劑敏感度都比較高，但是特異性差一些，這樣雖然防止了“漏檢”，但卻不可避免地出現(xiàn)較多“可疑”樣本，據(jù)報道，目前醫(yī)院所使用的試劑在國家疾控中心指定的十余種試劑中，最高一種出現(xiàn)了6%的“誤差”，假陽性率很高；②實(shí)驗(yàn)室人員操作方面，比如未嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作(反應(yīng)時間、加液量，孔間污染等)；③檢測環(huán)境等，如檢測溫度，PA法試驗(yàn)反應(yīng)板所處空間的溫度是一個重要的實(shí)驗(yàn)影響因素,所以，試驗(yàn)檢測時應(yīng)注意調(diào)節(jié)溫度,保證反應(yīng)板所處空間的溫度達(dá)到室溫(15～30℃)[1]。PA法4例陽性結(jié)果的標(biāo)本經(jīng)WB法確證，結(jié)果為陰性，其中有兩例梅毒血清學(xué)反應(yīng)陽性，且TRUST低度超過了1:32，說明了高低度的梅毒血清有可能是引起PA實(shí)驗(yàn)呈假陽性的一個重要因素，這方面也有相關(guān)報道[2-3]。眾多因素能引起PA法檢測HIV抗體出現(xiàn)假陽性，這就要求實(shí)驗(yàn)室檢測人員嚴(yán)格操作，避免可能影響結(jié)果的因素，將假陽性率減到最低。采用PA法檢測HIV抗體適合標(biāo)本量少，檢測周期短的實(shí)驗(yàn)室，但要強(qiáng)調(diào)的是PA法不能單獨(dú)作為常規(guī)使用，必須聯(lián)合其他方法如ELISA法進(jìn)行檢測，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

[1]季亞勇,尤鳳興,姜 永.HIV抗體檢測篩查試驗(yàn)假陽性原因分析[J].中國艾滋病性病,2008,14(1):68-69.

[2]符克英,鐘 娜,張麗芬,等.梅毒患者血清對HIV明膠顆粒凝集試驗(yàn)的影響[J].中國皮膚性病學(xué)雜志,2008,23(8):507-508.

[3]管文輝,嚴(yán)小平,朱銀霞,等.非特異性梅毒螺旋體抗體對HIV明膠顆粒凝集試驗(yàn)的影響[J].中國艾滋病性病,2005,14(1):25-27.