IRIS iQ200與Sysmex UF-1000i自動尿沉渣分析儀檢測尿液紅、白細胞的性能評價

謝文鋒，林 川，嚴海燕，梁穆興，黃松音，鮑藴文

(1、中山大學孫逸仙紀念醫院檢驗科，廣東 廣州 510120；2、浙江大學附屬第一醫院腎病中心實驗室，浙江 杭州 310003)

尿液中有形成分的檢查對臨床診治泌尿系統疾病及全身相關疾病具有極其重要的作用。沉渣中有形成分檢查的經典方法是顯微鏡人工判別。人工鏡檢的不足之處是速度慢、敏感度低、重復性差，在當前臨床尿液檢查標本不斷增加的情況下，每份尿液標本都進行人工鏡檢難以做到。為此，尿沉渣自動分析儀應運而生，自動化尿液分析儀在幾分鐘之內就能將尿液的有形成分進行定量分析，從而大大提高了臨床上尿液檢測的速度。歷經多年發展，現今已形成兩大類型產品：一類是以IRIS iQ200為代表的采用平面流式成像分析技術原理的自動尿沉渣分析儀；另一類是采用流式細胞術結合熒光染色技術的Sysmex UF系列自動尿沉渣分析儀。目前由于UF-1000i是其系列的最新產品，國內尚未有對其進行性能評價和與iQ200比對分析的報道。故我們通過對RBC和WBC的檢測參數進行統計分析，對iQ200與UF-1000i自動尿沉渣分析儀檢測性能進行評價，為實驗室尿沉渣檢查的復檢提供參考。

1 材料與方法

1.1 標本來源 隨機收集2009年10月20日至2009年11月29日中山大學孫逸仙紀念醫院就診患者和健康體檢人群尿液標本102例，年齡6～78歲，男性62例，女性40例。

1.2 實驗方法

1.2.1 儀器 iQ200和UF-1000i自動尿沉渣分析儀、XE-2100血細胞分析儀及相關配套試劑。

1.2.2 方法 用一次性潔凈塑料杯收集我院患者送檢尿液標本20ml以上，充分混勻后分3管，分別用于iQ200、UF-1000i自動尿沉渣分析儀和尿沉渣人工鏡檢計數。尿沉渣人工鏡檢：用毛細吸管吸取混勻后的尿液滴入牛鮑氏定量計數板中鏡檢，計數10個大方格體積(1μl)尿液中的紅、白細胞等有形成分，結果以個數/μl報告(此法部分參考全國臨床檢驗操作規程第3版[1])；iQ200和UF-1000i尿液分析按儀器操作說明書進行檢測。iQ200、UF-1000i及人工鏡檢對尿沉渣的判讀以雙盲方式進行。以人工鏡檢作為標準，對兩種儀器的3類結果(iQ200自動分析結果、iQ200人工修正后結果、UF-1000i自動分析結果)進行分析比較。

1.3 有關性能指標評估

1.3.1 精密度 取RBC數約為4～5×1012個/L新鮮EDTA抗凝全血及經裂解液裂解RBC制得的高濃度WBC懸液，用血細胞稀釋液配成RBC數約為220個/μl、WBC 數約 60 個/μl的細胞懸液， 分別在iQ200與UF-1000i上重復檢測10次進行精密度檢查。

1.3.2 準確性和線性 取RBC數為5.0×1012個/L新鮮EDTA抗凝全血用血細胞稀釋液配成高值RBC懸液，經稀釋換算和人工計數得該RBC懸液含RBC為4932個/μl。取10ml該懸液用血細胞稀釋液倍比稀釋 2、4、8、16、32、64、128、256、512 倍共10個濃度，各濃度分成2管，每管約5ml，由RBC懸液低值到高值分別在iQ200與UF-1000i儀器上進行檢測，以評價檢測RBC的線性和準確性。挑選含WBC大于20×109個/L且中性粒細胞超過90%的新鮮EDTA抗凝全血2ml，加入10ml的RBC裂解液15min后用1200r/min離心5min，棄上清后加入5ml PBS，1200r/min離心5min，重復洗滌2次，最后用血細胞稀釋液配成WBC數為3150個/μl的WBC懸液。取10m l該懸液用血細胞稀釋液倍比稀釋2、4、8、16、32、64、128、256、512 倍共 10 個濃度， 各濃度分成2管，每管約5ml，由WBC懸液低值到高值分別在iQ200與UF-1000i儀器上進行檢測，以評價檢測WBC的線性和準確性。

1.3.3 攜帶污染率 用新鮮EDTA抗凝全血加血細胞稀釋液配成高值RBC懸液3份，與3份空白管(均為血細胞稀釋液)。先取高值樣品連續測定3次，隨后立即連續測定低值樣品3次，計算攜帶污染率。

計算公式：攜帶污染率 (%)＝L1-L3/H3-L3×100%。其中的L1、L3分別為第1次和第3次低值樣品的測定結果，兩者相減所得的差取其絕對值；H3為第3次高值樣品的測定結果[2]。

1.4 統計學方法 各組資料采用SPSS 13.0統計軟件進行分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 精密度

UF-1000i和 iQ200測定RBC和WBC 10次均值(個/μl)、標準差(個/μl)和變異系數(%)結果見表 1。

表1 UF-1000i和 iQ200測定 RBC、WBC 精密度結果±s，n=10)

表1 UF-1000i和 iQ200測定 RBC、WBC 精密度結果±s，n=10)

組別 RBC(CV%) WBC(CV%)UF-1000i iQ200 iQ200修正后216.57±12.12(5.6)198.67±11.50(5.8)217.20±7.60(3.5)57.74±2.83(4.9)55.40±2.60(4.7)60.20±0.85(1.4)

2.2 準確性和線性

UF-1000i和 iQ200測定RBC和WBC準確性和線性結果見表2。

表2 UF-1000i和iQ200測定RBC、WBC的準確率和線性關系(n=10份梯度濃度)

2.3 攜帶污染率

iQ200 測得 RBC 3 個高值(個/μl)為 3987、4069、3983，3 個低值 (個/μl) 為 1、0、0， 攜帶污染率為0.025%，結果與文獻報道相近[3]。UF-1000i測得RBC 3 個高值(個/μl)為 4097、4037、4428，3 個低值(個/μl)為 2、0、0，攜帶污染率為 0.045%。

2.4 102 例尿液標本 UF-1000i和 iQ200測定RBC和WBC與人工鏡檢比較

UF-1000i、iQ200和iQ200修正后的RBC與人工鏡檢RBC的相關性分別為(相關系數γ為0.845，0.897，0.952)，UF-1000i、iQ200 和 iQ200 修 正 后 的WBC與人工鏡檢WBC的相關性分別為 (相關系數γ 為 0.983，0.981，0.995)， 而 UF-1000i和 iQ200 測定RBC和WBC的相關性分別為 (相關系數γ為0.862，0.968)。

102 例尿液樣本檢測結果(見表3)經兩兩配對的秩和檢驗，UF-1000i測得RBC的含量明顯高于iQ200與人工鏡檢測得的 RBC含量 (P＜0.01)，而iQ200修正后的RBC與人工鏡檢結果相比差異無統計學意義(P＞0.05)。 UF-1000i、iQ200 和人工鏡檢三者檢測WBC的含量差異無統計學意義(P＞0.05)。

表3 102例尿液標本UF-1000i、iQ200和人工鏡檢測定RBC和WBC的含量的比較(M，P25～P75)

3 討論

目前，自動尿沉渣分析儀主要有兩種類型：一類是根據成分檢測的電阻及對光散射的變化，結合熒光染色技術，間接分析尿液中的有形成分含量，稱為流式熒光技術；另一類是運用數碼攝影成像技術，通過計算機形態識別軟件，根據有形成分圖像的形態、大小和對比度等參數進行定量分析，稱之為成像分析技術。采用流式熒光技術的儀器，可在計算機屏幕上顯示各成分的直方圖和光學散點圖，操作者可根據圖形參數判斷樣本是否應進行人工鏡檢。而采用成像分析技術的儀器，在計算機屏幕上可顯示各成分的形態圖像，操作者可根據圖像對分類成分進行人工復核，直接修正計算機錯判或誤判的分類成分，一定程度上實現了人工鏡檢的功能。

通過實驗，我們對采用流式熒光技術的UF-1000i和采用成像分析技術的iQ200自動尿沉渣分析儀進行了RBC和WBC檢測性能的評價。結果發現，iQ200修正后的 RBC、WBC準確率高于 UF-1000i和iQ200自動分析結果；iQ200自動分析檢測的RBC結果準確率較低，為57.4%；UF-1000i和iQ200測定RBC、WBC的精密度、線性良好，攜帶污染率低。結果見表1、表2。

通過對102例臨床尿液標本的檢測結果發現，UF-1000i測定RBC的含量明顯高于iQ200與人工鏡檢測定RBC的含量，iQ200修正后測定的RBC含量與人工鏡檢結果差異無統計學意義。而UF-1000i、iQ200和人工鏡檢三者在檢測WBC的結果上差異無統計學意義，但經修正后的iQ200測定結果的準確率有提高。說明兩類儀器測定的結果上，自動分析的WBC結果準確性高，可以互認；RBC方面，由于UF-1000i測定RBC的含量明顯高于iQ200與人工鏡檢測定的RBC含量，這樣我們有必要結合干化學等參數，判斷是否對樣本進行人工鏡檢[4]。

綜上所述，UF-1000i、iQ200和iQ200修正后的WBC與人工鏡檢結果具有良好的相關性，差異無統計學意義；iQ200修正后的RBC與人工鏡檢結果差異無統計學意義，且iQ200修正后的RBC和WBC的準確性明顯好于UF-1000i和iQ200自動分析結果；UF-1000i、iQ200測定RBC和WBC的精密度、線性良好，攜帶污染率低。故我們可以對UF-1000i、iQ200測定WBC的結果直接進行互認；而RBC方面，我們不能直接確認這兩臺儀器的自動分析結果，必須結合干化學等參數進行人工復核。iQ200采用的成像分析技術，由于能在計算機屏幕上顯示有形成分的圖像信息，一定程度上實現了鏡檢功能，給人工復核帶來了便利。

[1]葉應嫵,王毓三,申子瑜,等.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版,南京:東南大學出版社,2006:293-294.

[2]England JM.Guidelines for evaluation of blood cell analysers including those used for differential leucocyte and reticulocyte counting and cellmarker applications.International council for Standardization in Hematology[J].Clin Lab Heam,1994,50(16):154-175.

[3]陳 津,王 德,王 丹,等.IRIS iQ200全自動尿沉渣分析儀與SysmexUF-100分析儀及人工鏡檢的比較和評價[J].中華檢驗醫學雜志,2006,29(4):374-375.

[4]叢玉隆.尿液沉渣檢查標準化的建議[J].中華檢驗醫學雜志,2002,25(4):249-250.