補腎通痹膠囊的提取工藝研究

毛祖輝

(湖南省武岡市中醫院 湖南 邵陽 422400)

補腎通痹膠囊為我院以劉謀升主任醫生為首的臨床醫師共同研究而成,由露蜂房、制川烏、當歸、赤芍、獨活、鹿茸、川芎、黃芪等12味中藥組成。露蜂房為方中君藥具有補腎壯骨、舒筋活絡、通痹止痛的功效。原方以藥材細粉裝膠囊而成。本方經我院醫生臨床20年來使用觀察,效果甚好,用量日益增大。因此擬將其研制成顆粒劑后再裝膠囊而成,這樣既能保證療效、提高制劑質量、減少服用數量又能方便患者使用。本人參考相關文獻[1]采取正交試驗,以蜂房總黃酮提取率為指標,優選提取工藝條件。

1 儀器與試藥

島津uv-2401型紫外分光光度計,BP-211D型電子天平。HHS-214型電熱恒溫水浴鍋,藥材由我院藥劑科提供,經鑒定符合中國藥典2005年版(第一部)標準。蘆丁對照品(批號100080-200906)購于中國藥品生物制品檢定所。試劑(亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇等為分析純。

2 實驗方法與結果

(1)提取方法稱取處方量置圓底燒瓶中加乙醇浸漬1h,按正交試驗設計進行提取。(2)提取條件的選擇:為了優化提取工藝,根據處方中藥材性質及提取過程中的影響因素。選取乙醇濃度,加醇量、提取時間及提取次數4個因素。選擇L9(34)正交表進行實驗,通過方差分析優選醇提取最佳工藝條件。(3)蜂房總黃酮的含量測定[2]:標準曲線的制備,精密稱取蘆丁置50mL的容量瓶中,標準品10.55mg加95%的乙醇溶解并稀釋制刻度,搖勻精密稱取此溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL分別置于25mL容量瓶中,各加水至6.0mL并加5%的亞硝酸鈉溶液1mL混勻放置6min,加10%硝酸鋁1mL混勻,放置6min,再加4%的氫氧化鈉試液10mL加水至刻度。搖勻,同時在另一個容量瓶中加相應試劑做空白對照。以在511波長外測定吸收度,以蘆丁含量為橫坐標,以吸收度為縱坐標,繪標準曲線:y=0.124x+0.011,r=0.9998。提出液中總黃酮的含量測定,將正交試驗所得樣品提取液用相應濃度的乙醇的定容至500mL,備用依照標準曲線制備項下方法制備。測定在511nm對應的吸收度,由標準曲線得出蜂房總黃酮的含量(表1)。(4)經SPSS 11.5統計軟件統計表1、2可知,D>A>B>C表明提取次數D對提取結果影響最大,其次為乙醇濃度A,再次為乙醇用量B而提取時間影響最小。故最佳工藝確定為A1、B2、C3、D1即用10倍量的75%的乙醇回流提取3次,每次1h。(5)醇提優選結果驗證:稱取2倍量的處方藥材,按所定的最佳提取工藝進行提取,測定總黃酮含量,計算總黃酮的提取率,結果3次實驗的總黃酮提取率為(1.21±0.09)均為正交試驗的較高水平,且結果穩定。

表1 正交試驗方法與結果

表2 方差分析結果

3 討論

補腎通痹膠囊作為我院的一種院內制劑,在我院用于治療類風濕、坐骨神經病、腰頸椎盤突出已有10多年的臨床觀察。且療效確切,在患者中有較高信譽,故為提高質量,確保療效,方便病人而采取正交試驗法優選提取工藝。

[1]武鴻翔.露蜂房中化學成份的研究與臨床運用概況[J].云南中醫中藥雜志,2001,22(3):29.

[2]屈紅明,尹鵬.冬凌藥中總黃酮提出工藝研究與含量測定[J].時珍國醫國藥,2006,17(1):1929.

[3]中國藥典,2005.