性別對小鼠高脂血癥動物模型的影響

劉 靖，陸大祥，戚仁斌，王彥平

（1.佛山科學技術學院醫學院生理病生教研室，佛山 528000；2.暨南大學醫學院病理生理學教研室，廣州 510632）

近年來糖尿病、心腦血管疾病的患病率迅速上升。大量研究表明，高脂血癥是促進心腦血管疾病發病的主要危險因素之一，還可導致脂肪肝、肝硬化［1，2］等，嚴重影響身體健康和生活質量。建立高脂血癥動物模型是篩選治療高脂血癥藥物的必要條件。

從文獻報道來看，多數與高脂血癥相關的實驗研究偏好選用雄性動物［［3，4］，也有部分研究選用雌性動物［5］。在對人類高脂血癥相關因素的研究中，普遍認為性別不同可造成高脂血癥的發病率差異［6，7］，但是也有部分研究認為性別不是高脂血癥的相關因素［8］。如果實驗動物的脂質代謝明顯受性別因素的影響，那么在復制高脂血癥模型時，就應該采用雌雄各半進行研究，劉亞平等［9］在2型糖尿病造模過程中發現，高糖高脂飼料喂養8周后，雄、雌性大鼠均可發生高血糖、脂質代謝紊亂，雌性大鼠造模成功率低穩定性差，但針對不同性別實驗動物對高脂血癥造模效果的實驗報道少見。故本實驗通過連續喂養高脂飼料建立高脂血癥模型，觀察不同性別小鼠在高脂血癥造模中血脂四項的變化，比較血脂變化的差異。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

健康成年昆明種小鼠40只，雌雄各半，體重（25±5）g，由廣東省動物實驗中心提供［SCXK（粵）2003-0002，粵監證字2004A019］。

1.2 藥物和試劑

膽固醇由上海伯奧生物科技有限公司提供，批號：040901。丙硫氧基嘧啶由廣州康和藥業有限公司提供，批準文號：國藥準字H44022824。

1.3 實驗儀器

美國Beckman公司CX系列全自動生化分析儀，德國Eppendorf公司5415D型高速離心機。

1.4 高脂血癥模型的建立

用自制高脂飼料連續喂養小鼠2周［10］來建立高脂血癥模型，高脂飼料［11］配方改良為10％自制豬油，1％膽固醇，0.2％丙硫氧基嘧啶，其余為基礎粉型飼料，由廣東省動物實驗中心提供。

1.5 分組及處理

隨機分為4組：雄性對照組、雌性對照組、雄性高脂組、雌性高脂組，每組各10只，對照組給予正常飼料喂養，高脂組給予自制高脂飼料喂養。

1.6 測定指標

實驗2周末，空腹12h，眼球取血處死動物，離心收集血清。用生化分析儀分別檢測血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）的含量。高脂血癥主要是指血清總膽固醇（TC）或甘油三酯（TG）水平過高和（或）血清高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）水平過低。

1.7 統計學處理方法

2 結果

2.1 高脂飲食對小鼠血清總膽固醇的影響

雌雄高脂組小鼠血清TC均明顯高于自身對照組（P＜0.01），雌雄組之間無顯著性差異（表1）。

表1 高脂飲食對小鼠血清總膽固醇的影響（n=8）Tab.1 Effect of high-fat diet on serum TC in mice（n=8）

2.2 高脂飲食對小鼠血清甘油三酯的影響

各組小鼠血清TG間無明顯差異（表2）。

表2 高脂飲食對小鼠血清甘油三酯的影響（n=8）Tab.2 Effect of high-fat diet on serum TG in mice（n=8）

2.3 高脂飲食對小鼠血清高密度脂蛋白膽固醇的影響

雄性高脂組小鼠血清HDL-C明顯高于自身對照組（P＜0.05），雌性高脂組小鼠血清HDL-C明顯高于自身對照組（P＜0.01），雌雄組之間無明顯差異（表3）。

表3 高脂飲食對小鼠血清高密度脂蛋白膽固醇的影響（n=8）Tab.3 Effect of high-fat diet on serum HDL-C in mice（n=8）

2.4 高脂飲食對小鼠血清低密度脂蛋白的影響

雌雄高脂組小鼠血清LDL均明顯高于自身對照組（P＜0.01），雌雄組之間無明顯差異（表4）。

表4 高脂飲食對小鼠血清低密度脂蛋白的影響（n=8）Tab.4 Effect of high-fat diet on serum LDL in mice（n=8）

3 討論

目前，冠心病（CHD）、高血壓等心腦血管疾病已經成為危害人類健康的主要病因。研究表明，高脂血癥引起的動脈粥樣硬化（AS）是造成冠心病、高血壓和腦血管疾病的主要原因。高脂血癥主要是指血清總膽固醇（TC）或甘油三酯（TG）水平過高和（或）血清高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）水平過低。

建立高脂血癥模型的方法以化學物質誘導法最為常用，即經消化道給予實驗動物高脂飼料或脂肪乳劑，與人類由于膳食結構改變而形成的高血脂癥相似，對于研究高血脂癥的形成以及調脂藥物的開發具有一定價值。

實驗動物常選取血脂蛋白構成、肝臟膽固醇與脂蛋白代謝酶的調節方面應盡可能地與人相近的動物品種，如家兔、大鼠、小鼠、金黃地鼠、豚鼠等［3，4，12，13］，特別是小鼠成本低廉、易于飼養管理、取材方便，又能較好地反映各種實驗因素對其脂質的吸收、分解及合成等代謝環節的影響，因而被作為高脂血癥模型動物廣泛用于降脂藥物的研究開發。

在對高脂血癥相關因素的研究中，普遍認為性別不同可造成高脂血癥的發病率差異，女性絕經前高脂血癥的發病率一般低于男性，其原理可能和雌雄激素對脂質代謝的不同作用有關［14，15］。

本實驗連續2周給予小鼠高脂飲食，實驗末雌性對照組血脂四項與雄性對照組之間無顯著性差異，可見雌雄小鼠正常飲食時血脂指標接近，雌雄高脂組小鼠血清TC、LDL含量均明顯高于自身對照組，證實用高脂飼料喂養2周無論選用成年雄性小鼠或是雌性小鼠均可成功誘發高脂血癥，兩組間TC及LDL升高程度一致雌雄小鼠血中TG含量無明顯變化及HDL-C含量升高可能和高脂飼料喂養時間有關，如果延長造模周期，實驗動物的血脂紊亂可能更為明顯。

綜上，建立高脂飼料誘導形成的高脂血癥模型時，喂養2周后的雌雄小鼠血脂變化基本一致，性別差異沒有影響到高脂血癥模型的效果。

［1］程朝英，盧仙娥，鐘朝暉，等.重慶市不同職業人群中脂肪肝現況調查與分析［J.重慶醫學，2005，34（12）：1807.

［2］Zhang Y，Proence R，Maffei M，et al.Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue［J］.Nature，1994，372：425.

［3］張若曦，苑望，伍曉雄，等.共軛亞油酸對高脂血癥大鼠脂質代謝及visfatin基因表達水平的影響［J］.中國實驗動物學報，2009，17（6）：452-456.

［4］唐世英，胡桂才，李可基，等.金黃地鼠高脂血癥動物模型的應用研究［J］.承德醫學院學報，2002，19（3）：173-175.

［5］肖軍霞，彭光華，張聲華.大豆皂甙預防小鼠高脂血癥的作用及其分子機制研究［J］.營養學報，2005，27（2）：147-150.

［6］楊宏云，李淑葵，曾平，等.北京市城區人群血脂異常的分布和相關因素分析［J］.中國預防醫學雜志，2002，3（4）：265-268.

［7］白偉，黃付敏，斯琴，等.黑龍江省血脂異常人群相關因素調查分析［J］.中國動脈硬化雜志，2009，17（11）：950-953.

［8］張鶴，張琳，丁素英，等.高脂血癥相關因素病例對照研究［J］.鄭州大學學報（醫學版），2004，39（5）：801-802.

［9］劉亞平，季虹，榮海欽，等.不同性別大鼠在2型糖尿病造模過程中的穩定性［J］.中國實驗動物學報，2008，16（1）：52-55.

［10］劉靖，陸大祥，王華東，等.甘氨酸對小鼠體重及脂質代謝的影響［J］.中國病理生理雜志，2005，21（6）：1143-1146.

［11］Huber，Deb A.Nonalcoholic steatohepatitis（NASH）syndrome［J］.Gastroenterol Nursing，2004，27（2）：55-58.

［12］李大偉，張玲，夏作理.建立高脂血癥模型的動物選擇與常用造模方法分析及改進［J］.中國臨床康復，2006，10（48）：145-147.

［13］汪運坤，李小敏，史福喜.豚鼠高脂蛋白血癥模型的復制［J］.上海實驗動物科學，1995，15（3）：166-168.

［14］陳海平，楊文軍，邱招漲，等.雌性激素及脂質代謝異常在膽囊結石發病中的作用［J］.肝膽胰外科雜志，2009，21（4）：282-284.

［15］顧明標，丁鴻鈞，秦永文.睪酮對雄性高脂血癥大鼠血漿脂質代謝的影響［J］.中國現代醫學雜志，2002，12（6）：75-77.