玉環柚脫毒苗關鍵技術

徐森富，汪恩鋒，王普形，柯 勝

(1.臺州科技職業學院，浙江臺州 318020;2.浙江省玉環縣綠野農業科技有限公司，浙江 玉環 317600)

玉環柚原名楚門文旦、文旦，產地浙江玉環，是中國四大名柚之首，連續8次奪得全國柚類評比冠軍，是浙江省的特色優勢農產品，也是玉環縣對外宣傳的一張金名片。同時玉環柚營養價值高，全身是寶，果皮可制蜜餞、果皮糖和提取芳香油，果中富含檸檬苦素和類黃酮等多種活性成分，柚中黃酮含量高純度大極具開發競爭力。“九五”時期玉環縣有玉環柚0.305萬 hm2，產量6萬 t，從業人員3萬余人，產值超億元，占農業總收入的1/3以上。2006年由于受柑橘黃龍病的影響，玉環縣砍了大批文旦樹，文旦種植面積下降到0.183萬hm2，而真正有一定產量的只有0.1萬 hm2左右，文旦產量也降到1.5萬 t。玉環柚種植面積逐年減少，文旦販銷、文旦飲品、文旦深加工等相關產業面臨嚴重威脅，部分農民收入明顯減少，形勢十分嚴峻。據統計目前全縣有效結果面積已不足667 hm2，總產量只有近 1萬 t，一些產區此病仍以15%～20%速度蔓延，玉環柚產業面臨生存危機，鑒于黃龍病感染力強，老區難以繼續種植，給玉環柚的發展帶來了威脅，故進行了玉環柚脫毒苗關鍵技術的探討。

1 選址

選址要符合浙江省有關特色農產品種子種苗工程發展規劃。繁殖區為黃龍病隔離區，利于脫毒苗安全繁育。我們選在產地生態環境條件良好，遠離污染源，并有可持續生產能力的農保區作為實施區，也是玉環柚唯一柑橘黃龍病隔離區，水、電、路配套，園路與76省道相通，交通方便。

2 危險性病害脫除與病毒檢測

首先對玉環柚優選良種進行脫毒，采用莖尖嫁接、試管胚胎培育等脫毒手段培育的玉環柚優選良種脫毒純種，經過指示植物與系統檢測手段檢測后，確認為無衰退病、裂皮病、碎葉病與黃龍病等病毒后，置于鋼架大棚40目網室內培植，3道以上隔離門、專人負責，并經數年培育，每年秋冬多次用OTBIA檢測，確認該種苗培育安全。

3 大棚網室隔離技術

脫毒苗快繁選址遠離玉環柚大田產區2～3 km，傳毒昆蟲較難遷飛，有利育苗安全。

鋼架大棚牢固，垮度5.5 m，抗風抗壓能力強。

育苗場地區塊隔離，網室設計中設立3道緩沖門隔離，避免傳毒昆蟲潛入育苗室。3道緩沖門僅能進入育苗室外通道，經第4道門才可進入采穗圃、育苗室、練苗室，并分別用40目避蟲網隔離，母本園經過第5道門，層層隔離，在一定程度上提高了脫毒苗繁育過程中的安全性。

制訂脫毒苗安全生產操作技術規程。生產操作人員經清潔消毒后方可進入避蟲網室，未清潔消毒者與閑人一律免入。用于生產的基質要經溴甲烷滅菌消毒，并在安全期內運入，病蟲活動期不得開門運入。種子與植物活體 (樹枝、草把、蔬菜及瓜苗)等一律不得帶入避蟲網室。刀、剪等工具用前要經1%次氯酸消毒，或高溫沸水中燒煮5～10 min。專業工具專項生產，鋤頭等工具一律采用5%漂白粉液處理3 min后使用。遇臺風雨，如有避蟲網破損，要立即更換新網，待風靜雨止后立即全面噴藥，藥劑選用2%菌克毒克200倍，加20%甲氰菊酯1 000倍或加48%樂斯本800倍，每7 d 1次，連續2次。

4 建立母本園和采穗圃

優選良種脫毒苗工廠化繁育工作的前提是建立上規模的良種母本園。在網室大棚進行母本園和采穗圃的分離，并對母本園進行隔離，同時對采穗圃首批采自非黃龍病區作砧木用的香拋種子經過熱處理消毒后，播于網室內預先以溴甲烷消滅病菌后的基質中，并當年秋季經OTBIA檢測確認為無危險性病害砧木后，從玉環柚脫毒1號與3號母本上分別剪取接穗，分株、分區嫁接，培育玉環柚一代純種。

5 砧木種子采集與熱處理

培育無病毒砧木苗的種子必須來自非黃龍病區，用的香拋種子選于浙西健康母樹，至12月中下旬果實充分成熟后采摘，采后后熟10～15 d取出種子，先在清水中漂洗種皮上果膠、酸液后置0.1%高錳酸鉀液清洗3～5 min，再用清水漂洗后蔭干至種皮發白，立即熱處理后摧芽播種，經熱處理后的種子發芽率高達95%以上，根系發達，發根量幾乎是常規苗的50倍，也是脫毒苗表現速生、早產的保證。

6 基質滅菌消毒

溴甲烷是一種常用的熏蒸殺蟲劑，具有殺蟲、殺線蟲、殺螨滅菌、除草、滅鼠、防病等多種功效，應用極廣泛。脫毒苗培育與土壤環境滅菌消毒少不了溴甲烷，但它又是一種高毒化學品，滲透性極強，要嚴格按照溴甲烷應用技術操作規程進行。

7 網室小氣候調節

玉環柚為蕓香科柑橘屬柚類果樹，該樹種性喜溫濕環境，又是一種半耐蔭果樹，在網室內栽培育苗，冬季蓋膜，平均氣溫達11～13℃，加上種子經熱處理刺激，根系生長旺盛，表現速生。入春后膜內氣溫回升快，春分前后午間膜內氣溫常超過35℃，過高氣溫又在一定程度上抑制了脫毒苗的安全生產，因此，網內加蓋黑色或銀灰色遮陽網(遮光率達50% ～60%)。4月至10月上旬遮光，可有效控制高溫對脫毒苗的危害。3月下旬開始分步揭膜，先揭頂膜，至4月下旬再揭圍膜，結合午間遮陽網的應用，保持網室內氣溫穩定在20～30℃，十分有利脫毒苗快速生長對溫度的需求。至10月下旬氣溫逐漸下降至10℃左右時，要及時圍膜保溫，防止脫毒苗過早停止生長。至11月下旬，氣溫降至5～8℃時要適時蓋上網室頂膜保溫防凍。脫毒苗基質含水量狀況不僅影響著肥液分解供苗木吸收，而且基質中足夠的含水量，高溫時因水分蒸發帶走熱量，可維護網室內正常的氣溫，防止高溫傷苗;為此，夏季高溫采用噴水散熱法，結合遮陽網的應用，創造網室內良好的小氣候環境條件，是脫毒苗繁育中一項必不可少技術措施。冬季保持室內基質60%～80%的含水量，又可維護脫毒苗正常生理活動對水分和肥液的需求，穩定網室內正常氣溫，創造良好的小氣候環境條件，使水與光熱的調節同步進行。

8 脫毒苗肥水調控

玉環柚脫毒苗培育由于基質疏松得體，保肥持水力強，網室內氣溫相對穩定，成為幼苗到嫁接大苗快速生長的重要條件，因此基質的干濕度大小成為控制脫毒苗生長的主要因素。幼苗定值后澆施0.3%尿素水溶液定根，不僅有利成活，供給速效肥可防止緩苗促進生長。此后每隔15 d追施0.3%～0.5%復合肥、尿素水溶液，以薄肥勤施，既保持基質60%～80%的含水量，促進基質中的有機養分水解供給種苗吸收，有利于快速生長。進入盛夏高溫季節，充分供水，以增加蒸發量散熱，可維持室內脫毒苗生長適宜溫度，避免苗木因高溫造成危害。9－10月份停止施肥，適當控水，可防止肥水過多而抽發冬梢造成空耗養份降低苗木抗寒力。冬季充分供給肥水，又縮短了脫毒苗的半休眠狀態，延長生長期，并充分吸收肥水，使早春提前進入生長活動期，對提高苗木質量，縮短種苗扶育周期，提前進入樹冠造型搭架，促進早產等均具現實意義。

9 生產流程

良種種子熱處理→玉環柚良種→莖尖嫁接(砧木種子熱處理)→嫁接苗→生物分子檢測→無病毒苗木→供大田種植、建立無病毒柚園新區。每一生產流程都要嚴格遵循規程，確保任何環節無病毒侵入的機會。

10 小結和討論

綜觀國際柑橘生產，先進國家均對柑橘 (含柚類)病毒病十分重視，美國、西班牙、土耳其、南非、以色列均已推行“株系保護計劃”，并實行苗木注冊制度，采取法規保護從而使生產上了新臺階。我國的廣東、廣西、福建等省原是黃龍病區，由于重視病毒病控制工作，加大了無毒化種苗生產管理力度，從而使病毒病得到了有效控制，生產取得快速發展。因此控制病毒病是促進生產發展的重要措施，特別是無病毒苗的培育尤為關鍵。玉環縣政府近幾年連續出臺政策，同時確定了玉環柚的發展目標，那就是近期采取玉環柚種植面積穩定在0.2萬 hm2左右，其中重點基地面積確保0.1萬hm2，產量確保2萬t;新區發展和老區改造0.1萬hm2，將在現有一定規模的苔山塘、楚北塘、紅沙塘等建立10個玉環柚重點基地。近期需要大量的無病毒苗木，按600株·hm－2計，至少需80萬株無病毒苗，市場前景廣闊，經濟和社會效益巨大，開展對脫毒苗產業化關鍵技術研究是重在發揮品種土地等資源優勢，保護玉環柚種質資源，促進特色產業可持續發展必然選擇，同時為同類柑橘黃龍病的防治提供較好的探索與示范。

［1］裘維蕃.植物病理學 ［ M］.北京:科學出版社，1985.

［2］張天苗.柑橘病毒病 ［M］.北京:中國農業出版社，2004.