口蹄疫新型疫苗及免疫效果的研究

廣東省湛江市徐聞縣動物衛生監督所 王健亮

廣東省湛江市徐聞縣海安鎮畜牧獸醫站 王運華 王運新

口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，主要危害偶蹄獸。口蹄疫病毒的傳染性極強，往往呈流行性，其傳播既有蔓延式，又有跳躍式。安全有效的疫苗是預防、控制FMD的先決條件。近年來，隨著分子生物學技術的飛速發展，FMDV基因工程疫苗等多種新型的疫苗都在不斷的研究開發中。下面，我們就目前應用和正在研究中的疫苗進行綜述。

1.FMD亞單位疫苗。基因工程亞單位疫苗是將編碼病原微生物保護性抗原的基因導入受體菌或細胞，使其在受體中高效表達，獲取病原體主要免疫原蛋白而制成的一種疫苗。FMD亞單位疫苗利用多種表達系統表達FMDV結構蛋白和非結構蛋白，并以此制成疫苗。

這種亞單位疫苗是病毒粒子的一部分，但不含核酸，具有很好的安全性，能刺激機體產生足夠的免疫力。但亞單位疫苗免疫原性低，持續時間短，需要與佐劑合用。

2.核酸疫苗。動物體細胞具有攝取裸露DNA分子的能力，用裸露DNA免疫動物能夠激發體液和細胞免疫反應，并具有很好的保護作用。核酸疫苗能長時間表達抗原，可避免母源抗體的干擾，還可在質粒載體上根據要求設計或排除特定物質干擾構建復合疫苗。該疫苗易構建、易凍干，不帶生物及化學活性污染物，為口蹄疫綜合免疫帶來了契機。

3.重組活載體疫苗。重組活載體疫苗利用基因工程技術將病毒或細菌構建成一個載體，把外源保護性基因插入其中使之表達。該類疫苗可以模擬病毒攻擊的部分過程，其誘導產生的免疫反應，不僅包括體液免疫和細胞免疫，還包括黏膜免疫。

針對FMDV多血清型，而且型間無交叉保護作用，可將不同型FMDV的保護基因插入到同一活載體中，從而組成多價基因工程疫苗來預防、控制FMD及其他相關疾病。

4.合成肽疫苗。蛋白質的一級結構結合單克隆抗體分析，推導出蛋白質主要抗原表位的氨基酸順序，然后通過化學合成或者基因工程表達途徑獲得一段小肽，將這段小肽作為抗原免疫動物，即為合成肽疫苗。

FMDV抗原表位的研究為合成肽疫苗的研制提供了理論依據。早期研究主要是根據病毒衣殼表面的B細胞表位來設計合成肽疫苗。1982年，首次有學者根據O型FMDVVP1基因的氨基酸序列化學合成了20個氨基酸的肽段，并與載體蛋白相藕聯，接種豚鼠可產生中和抗體，并具有保護作用。隨后多方面的研究發現，單獨的化學合成肽也能誘導高水平的中和抗體，但由于多肽分子量很小，易被細胞內的蛋白酶降解。為克服其免疫原性較低的現象，研究者們針對不同使用目的選擇適合的表位傳遞系統來增強其免疫原性，例如，將表位多肽與不同的載體蛋白偶聯以增強免疫應答。

目前，我國已成功研制出了豬O型口蹄疫合成肽疫苗，并應用于實踐。疫苗利用化學方法合成O型毒株VP1結構中141～160氨基酸序列為抗原，同時為了增強疫苗的抗原性，在VP1上結合輔助T細胞表位的環狀構造，克服了VP1環狀多肽只有B細胞表位的缺點，借助內源性和外源性的Th位點，進一步加強了T細胞免疫，而且通過雙硫鍵提高了環狀構造的穩定性。此疫苗經實驗室檢驗和臨床試驗都顯示了高效的免疫力，同時無過敏等副反應，產品質量極其穩定。

5.植物疫苗。把植物基因工程技術與機體免疫機理相結合，將抗原基因整合于植物體上或重組于病毒載體后轉染于植物體上，使該抗原基因得以復制表達，生產出能使機體獲得特異抗病能力的疫苗，即為植物疫苗。雖然目前植物疫苗表達抗原的量低，而且在免疫效果上與常規滅活疫苗有一定的差距，但隨著分子生物學研究的不斷深入，新技術的不斷涌現和機理的闡明，它有希望開辟出一個生產口蹄疫廉價疫苗的全新領域。

6.展望。理想的疫苗必須安全、有效，同時還應具備價廉、易于推廣等優點。新型基因工程疫苗的研究雖然取得了很大的進展，但目前大部分還處于實驗室階段，還普遍存在抗原表位少、免疫原性差等缺點。為了克服基因工程疫苗的局限性，研制長效、能對多種亞型產生交叉保護、可減少對佐劑依賴的疫苗將是今后研究者需要努力的方向。