聯合應用腹水DNA含量測定鑒別腹水性質的診斷價值

武金寶 慧 妍 孟憲梅 黨 彤*

包頭醫學院第二附屬醫院內蒙古消化病研究所（014030）

1 材料與方法

1.1 一般資料

隨機選取包頭醫學院第二附屬醫院2008年11月至2009年11月入院進行治療的腹水患者25例，其中男性患者16例，女性患者9例，患者年齡在18～81歲，中位年齡為56歲。其中惡性腹水患者12例，并且有6例患者胃癌腹膜轉移，有3例患者為原發性肝癌，有2例結腸癌腹膜轉移，有1例卵巢癌腹膜轉移。剩下的為13例良性腹水患者，其中有6例為肝硬化腹水，有6例為結核性腹膜炎，有1例為細菌性腹膜炎。惡性腹水的診斷依據：腹水中發現惡性腫瘤原發灶，在腹水中找到惡性腫瘤細胞揮著唄腹腔鏡證實有腹膜發生轉移。良性腹水的診斷依據：在各項檢查中均未發現有惡性腫瘤現象，并且患者自身有明確的病因。

1.2 方法

運用行腹腔穿刺技術在患者體內抽取腹水100～500mL，對其進行腹水DNA含量的測定，并且運用腹水細胞學、癌胚抗原以及糖抗原19-9等技術對其進行檢查。運用流式細胞檢測法對腹水DNA含量進行測定與鑒別。在儀器方面選擇美國COULTER公司生產的EPTCS XLMCL流式細胞儀，以及DNA-PREP REAGENTS KIT試劑盒。每次檢測前要將變異系數調制3%以內，操作時必須要使用健康人新鮮外周血淋巴細胞校準儀器進行調制。然后按照以下步驟進行操作，首先進行DNA熒光染色取經抗凝以及細胞懸液制備的腹水操作，然后進行離心，并且在離心操作完成后對脫落細胞進行收集，再進行PBS洗滌操作。操作時，將細胞數調節至每升的規定數據之間，然后取100μL的細胞懸液，并在里面加入打孔液以及固定液100μL，加入含有Rnase的PI 100μL，最后對其染色30min。

1.3 統計學處理

采用COULTER公司的MCYCLE軟件進行分析，以JANET為參照標準，正常人淋巴細胞DNA含量為對照標準進行二倍體與異倍體的判斷。

2 結 果

FCM檢測出非整體為陽性，將其與CEA、CA19-9陽性率進行比較得出，腹水FCM的敏感性為91.7%，明顯的高于其他方法。FCM的假陽性率為7.7%，CEA與CA19-9的假陽性率分別為23.1%和15.4%，經過統計學處理后發現，各種檢測方法之間無顯著性差異，而運用腹水細胞學技術進行檢查時，雖然特異性為100%，但是敏感性卻比較低，僅為41.7%。

3 討 論

臨床上對良、惡性腹水的鑒別診斷仍然是一個比較棘手的問題，檢測者如果由于檢測方法或自身因素而誤把良性腹水診斷為惡性腹水，對患者來說，無疑會對他們的精神和肉體帶來嚴重傷害。而檢測者如果由于檢測方法或自身因素誤把惡性腹水診斷為良性腹水，則會延誤患者的治療時機，因此當前醫學上急需解決的重要課題就是如何能提高腹水的診斷準確率。

DNA含量的增多是腫瘤無限制迅速增長的物質基礎，而DNA的含量異常，且異倍體的存在則是惡性腫瘤的一個重要標志。本研究發現，腹水的細胞學檢查、腹水CEA以及CA19-9測定等檢測技術的陽性檢出率明顯低于FCM檢測技術的陽性檢出率。腹水DNA的敏感性指數低，僅為41.7%，雖然腹水DNA檢測技術的特異性指數高達100%，但是在腹水細胞學不典型時，診斷仍然會比較困難。而運用流式細胞檢測技術，敏感性指數為91.7%，明顯增高。如果將CEA或者CA19-9檢測技術并行聯合，敏感性指數則分別為95.2%和95.8%。因此，除常規檢測腹水脫落細胞、CEA、CA19-9等，在臨床工作中，還應積極開展對腹水DNA含量的測定工作，對于惡性腹水可能性較大的患者更應該如此，以此來對診斷的準確率進行提高[1-3]。

雖然在對腹水DNA含量進行測定時，會有一些不可控的因素產生，如一過性標本制備不當及數據分析誤差。但是對腹水DNA含量進行檢測相比其他方法有很多優點，標本容易收集，無創性，其次標本也易處理，值得在臨床推廣使用。

[1] 湯釗猷.現代腫瘤學[M].上海:上海醫科大學出版社,2003:124-125.

[2] 王強,吳清明.端粒酶對良、惡性腹水的鑒別診斷價值[J].中國實驗診斷學,2009,13(6):45-46.

[3] 孔超美,陳平南.癌標志物聯合檢測鑒別良、惡性腹水的價值[J].江蘇醫藥,1995,21(4):242-243.