梁 鑫,漆 著,單旭東,黃明孔,余 顏
(成都中醫藥大學附屬第二醫院生殖醫學中心 610041)
睪丸活組織直接鏡檢法診斷無精子癥患者的臨床意義
梁 鑫,漆 著,單旭東,黃明孔,余 顏
(成都中醫藥大學附屬第二醫院生殖醫學中心 610041)
目的探討睪丸活組織直接鏡檢法診斷無精子癥患者臨床意義。方法對47例無精子癥患者進行睪丸活組織檢查,同一部位取睪丸組織兩份,一份做常規病理組織學檢查,另一份將組織撕碎后,立刻在倒置顯微鏡下檢查有無精子及活動精子,然后對兩種方法所得結果進行比較。結果47例中,病理組織學檢查可見精子生成16例(34.0%),組織撕碎后直接鏡檢發現精子30例(63.8%)。后者精子檢出率明顯高于前者。結論與常規病理組織學檢查方法相比,直接鏡檢法能更好地反映睪丸內有無精子或活動精子,且簡單易行。在進行病理學檢查的同時取睪丸組織直接鏡檢,可為準備進行卵胞漿內精子注射(ICSI)治療的患者提供更為確切的依據。
睪丸活檢;直接鏡檢;無精子癥
當前,無精子癥患者的診治依然比較困難,如何進行科學的估計、摸索一種行之有效的方法指導患者進一步檢查治療是擺在廣大男科醫生面前的一個難題。本研究主要目的是尋求一種合理的臨床診斷方法來指導患者的進一步治療。作者在經過倫理委員會同意及患者的知情同意后,對無精子癥患者進行睪丸活檢,以探討直接鏡檢法診斷無精子癥患者臨床意義。
1.1 一般資料 無精子癥患者47例,年齡21~42歲,平均31.4歲,全部由本院男科醫生進行體檢。納入標準:一側睪丸體積大于或等于8 mL,外周血染色體檢測正常,2次以上射出精液經離心后檢查均未發現精子者。
1.2 方法 用微創手術方法在一側同一部位取睪丸組織兩份,一份做病理檢查,另一份立即鏡檢,如果發現有活動精子,則不再提取另一側睪丸組織。如果一側直接鏡檢未發現活動精子,則同法取另一側睪丸組織檢查。常規病理檢查的睪丸組織取出后立即置Bouin′s液中固定,送病理科,石蠟包埋組織切片,常規HE染色,鏡下觀察。直接鏡檢法由本院生殖中心實驗室檢測,將取出的睪丸組織立即放在 HEPES緩沖的HTF培養液中洗去血細胞后,將組織置于培養皿中,加少量培養液,用折彎的1 mL空針針頭先將組織割成數段,然后再進行擠壓磨碎,最后在倒置顯微鏡(×200)下檢查有無精子及活動精子。兩種檢查先互盲,待出具正式報告后匯總比較。
47例經兩種方法檢測所得結果見表1。直接鏡檢法的精子檢出率(63.8%)高于病理檢查法,差異有統計學意義(χ2=8.344,P=0.004)。

表1 47例兩種方法檢測結果比較[n(%)]
我國男性不育的致病原因較多,其中很大一部分是無精子癥所致[1]。盡管超聲檢查可作為一種無創傷性的診斷睪丸疾病的方法[2],但是睪丸活檢仍是無精子癥病因診斷的主要方法之一。睪丸活檢雖為創傷性檢查,但能客觀地反映睪丸的生精狀況,對男性不育的臨床診斷、病因分析及治療措施的選定具有重要的臨床價值[3-4]。有研究表明,無精子癥患者血清FSH、LH、T和抑制素B水平及睪丸大小并不能完全預測能否從睪丸獲得精子[5]。卵胞漿內單精子顯微注射術(ICSI)前進行睪丸活組織檢查,查出是否有精子或活動精子對于無精子癥的治療很有必要,防止在輔助生殖技術(ART)治療中男方因取精失敗而造成不育,增加夫婦經濟上的損失和精神上的壓力[6]。
自從1992年ICSI開展以來,睪丸活檢已從一種診斷方法變成了治療手段[7]。本研究結果顯示,直接鏡檢法可見精子的患者,病理檢查中也發現精子,但在病理檢查中未發現精子的一部分患者中,直接鏡檢時卻可見精子。病理組織學檢查診斷有精子生成者為34.0%,無精子者為66.0%,而直接鏡檢法分別為63.8%和36.2%,說明直接鏡檢法在反映睪丸內有無精子方面更為準確,可以防止因病理檢查漏診的患者失去獲得血親后代的機會。二者差異可能與切片數量不夠、被觀察組織的大小及范圍等有關。
在用手術方法取得睪丸組織行病理學檢查的同時,做一次直接鏡檢,是十分有意義的,一則可以及時了解睪丸內有無精子或活動精子,二則可為以后是否可做ICSI提供重要信息。此外,若只在病理檢查中見到了精子,而未必一定有活動精子,需要謹慎施行ICSI治療。作者就見到只在病理檢查顯示有精子而進行ICSI的患者中,有2例未能找到足夠的活動精子行ICSI,經低滲膨脹試驗(HOS)[8],確認不活動精子中有存活精子后行ICSI,其受精率相當低。因此作者認為,直接鏡檢法具有簡便、快速、結果準確率高、可確認活動精子等優點。
一次睪丸活檢后對術側睪丸局部所帶來的影響需經6個月方能消除。若左右兩側睪丸同時活檢,手術取精行ICSI與前次睪丸活檢的時間間隔較短,可能對獲得足夠數量成熟的活動精子帶來困難。因此,作者的改良做法是,如果直接鏡檢法檢查到一側睪丸組織有活動精子,則不取另一側睪丸組織,這樣可保護患者另一側睪丸免受損傷,給ICSI時手術取精創造較好的條件。同時,有報道稱,用新鮮和冷凍的睪丸精子和附睪精子進行ICSI的妊娠結局差異無統計學意義[9]。故此,為防止睪丸活檢后ICSI取精失敗,造成患者精神上的痛苦和經濟上的壓力,也為防止反復手術取精給睪丸帶來不必要的損傷,還可將睪丸活檢結果為有活動精子患者的睪丸組織或精子凍存,作為備用。
[1] 湯召兵,陳在賢.78例男性原發不育的染色體分析[J].重慶醫學,2004,33(10):1557.
[2] 于潔.彩超在睪丸疾病診斷與鑒別診斷中的應用價值[J].重慶醫學,2006,35(9):863.
[3] 佟樹文,宋旭東,唐文君,等.男性不育睪丸活檢的臨床病理分析[J].中國綜合臨床,2006,22(5):456.
[4] 陳懷波.無精子癥患者睪丸活檢的臨床意義——附 70例報道[J].中國男科學雜志,1998,12(4):236.
[5] Hauser R,Botchan A,Yogev L,et al.Probability of sperm detection in nonobstructive azoospermic men undergoing testicular sperm extraction procedures unrelated to clinical parameters[J].Arch Androl,2002,48:301.
[6] Seo JT,Ko WJ.Predictive factors of successful testicular sperm recovery in nonobstructive azoospermia atients[J].Int J Androl,2001,24:306.
[7] 趙紫東,薛生娟,王宏,等.睪丸活組織玻璃壓片鏡檢對無精子癥的診斷價值[J].中國男科學雜志,2007,21(2):48.
[8] 世界衛生組織.人類精液及精子——宮頸黏液相互作用實驗室檢驗手冊[M].4版.北京:人民衛生出版社,2001:24.
[9] 歐建平,李陽,莊廣倫.無精癥睪丸活檢病理學特點及對男性不育診治的指導意義[J].中華泌尿外科雜志,2004,25(5):354.
R698.2;R361.2
B
1671-8348(2010)09-1118-02
2009-09-09
2009-10-19)
?經驗交流?