摘 要:由于荔枝白粉病在廣東省茂名地區首次發生,為了指導果農正確認識該病害,采取有效防治措施,采用常規植物病理學方法描述該病害在果實上的危害癥狀,鑒定該病害的病原菌并研究病原菌生長的最適濕度、溫度、pH值,采用孢子萌發法測定不同殺菌劑對白粉菌的毒力。結果表明,荔枝白粉病在果實上的危害癥狀表現為發病初期,白粉菌在果實的龜裂片縫隙間呈稀疏的短絨毛狀,后病癥逐漸發展呈白色粉層蔓延至龜裂片上,龜裂片同時變成褐色;荔枝白粉菌分生孢子橢圓形,單孢無色,單生于分生孢子梗頂端,分生孢子梗無色,由3個細胞組成;分生孢子在濕度為10%~100%的條件下均能萌發,當濕度為100%時萌發率最大,為73.74%;最適萌發溫度和pH值分別為25~30℃,3~7。當妙丹和一噴凈濃度為200mg·L-1時,對白粉菌孢子萌發的抑制作用最好。研究為正確防治荔枝白粉病提供依據。
關鍵詞:荔枝白粉病:生物學特性:殺菌劑毒力
中圖分類號:S667.1 文獻標識碼:A 文章編號:1009-9980(2010)04-641-04
荔枝(Litich chinenisi Sonn.)是原產于我國的熱帶、亞熱帶特色水果,我國栽培面積和產量居世界之首。據報道荔枝霜疫霉病和炭疽病在荔枝栽培和采后貯運上造成嚴重損失。然而,2009年5月初,于廣東省茂名地區首次發現荔枝白粉病。由于荔枝果實上的白粉病在國內未見報道,導致果農誤以為霜疫霉病,使用甲霜靈類農藥來防治,結果浪費人力、物力,錯過了防治該病的最佳時期。
荔枝白粉病由粉孢屬(Oidium sp.)真菌引起,在澳大利亞和泰國是常見病害。粉孢屬真菌屬于專性寄生菌,在世界各地都有分布,僅我國就可侵染近900種植物。夏季干旱無雨常常引起該病害爆發流行,主要危害植物的葉片和果實,被害部位表面生白色粉層,發生嚴重時引起葉片皺縮卷曲、退綠,果皮失去光澤,著色變差,果實品質下降。據報道,桃樹由于白粉病減產超過50%,葡萄減產33%~90%。可見白粉病流行時可造成水果嚴重的損失。
作者描述了荔枝白粉菌的發病癥狀,研究了荔枝白粉病菌孢子萌發的生物學特性,探討了荔枝白粉病菌對不同殺菌劑的敏感性,簡要分析了該病害流行的原因,為該病害的藥劑防治技術提供參考。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 供試菌種 荔枝白粉菌,采自茂名市根子鎮。洗下荔枝果實上自然發病的白粉病菌配制孢子懸浮液備用。
1.1.2 供試藥劑 粉銹安,1.5%多抗可濕性粉劑為威海韓威生物科技有限公司產品;20%妙丹可濕性粉劑(2%腈菌,18%福美雙)為江蘇三泉農化有限責任公司產品;30%一噴凈可濕性粉劑(30%福美雙,稀唑醇)為西安文遠化學工業有限公司產品:5%己唑醇懸浮劑為河北冠龍農化有限公司產品:50%醚菌酯可濕性粉劑為青島勁農生物科技有限公司產品;50%銹粉寧(45%硫磺,5%三唑酮)懸浮劑為江門市大光明農化有限公司產品:50%多菌靈可濕性粉劑為沙隆達蘄春有限公司產品。
1.2 方法
1.2.1 荔枝白粉病田問病害調查 在高州市根子鎮的南沖果場及附近果園,選取樹勢、樹齡、種植密度一致的白糖罌、白蠟、黑葉荔枝園,分別調查白粉病發生和危害情況。具體調查方法為:在果園內采用五點取樣法,每一點隨機選擇3株樹,每株樹東南西北四個方向隨機選擇3個果穗,調查果穗發病率和單果發病率。
1.2.2 濕度對孢子萌發影響的測定 從采回的發病果實上洗下分生孢子,用無菌水配制成孢子懸浮液,在低倍鏡下,每視野約10個孢子(以下病原菌分生孢子懸浮液配制相同)。在干燥器內用不同濃度的硫酸調制成RH10%~75%6種濕度,將孢子懸浮液滴于載玻片上,快速風干后置于不同濕度的干燥器內;以滴在水滴中的孢子懸浮液作為100%濕度。在25℃下培養24h后鏡檢萌發率,每次檢查10個視野,約100個孢子,重復3次。
1.2.3 溫度對孢子萌發影響的測定 將孢子懸浮液滴于凹玻片上,分別置于5~35℃的7種溫度下保濕培養,24h后鏡檢萌發率,每次檢查10個視野,約100個孢子,重復3次。
1.2.4 pH值對孢子萌發影響的測定用0.1mol.L-1檸檬酸、0.2tool·L-1磷酸鹽、0.1mol·L-1鹽酸、0.05mo1.L-1硼砂、0.1mol·L-1氫氧化鈉配制pH3~11的5種pH值緩沖液,用1%氫氧化鈉配制成pH值為13的溶液,然后用不同pH值溶液配制孢子懸浮液,滴于凹玻片上,在25℃下保濕培養24h鏡檢萌發率。每次檢查10個視野,約100個孢子,重復3次。
1.2.5 數據統計 以上試驗數據均采用鄧肯氏新復極差法(DMRT)進行差異顯著性分析。



1.2.6 殺菌劑對孢子萌發抑制作用的測定 分別配制有效濃度為400mg·L-1的上述殺菌劑,與孢子懸浮液等體積混合(殺菌劑終濃度減半),滴于凹玻片上,25℃培養24h后鏡檢萌發率,以與滅菌水等體積混合的孢子懸浮液為對照。每次檢查10個視野,約100個孢子,重復3次。計算不同殺菌劑對荔枝白粉菌孢子萌發的抑制率。公式如下:
抑制孢子萌發率(%)=[(對照萌發率-處理萌發率)/對照萌發率]×100
2 結果與分析
2.1 荔枝白粉病的發生
2.1.1 荔枝白粉病癥狀與病原菌形態 2009年5月初在茂名地區主栽品種白糖罌和黑葉的青果上發現該病害,發病癥狀表現為:發病初期,白粉菌在果實的龜裂片縫隙間呈稀疏的短絨毛狀(圖版-A),后病癥逐漸發展呈白色粉層蔓延至龜裂片上,龜裂片同時變成褐色(圖版-B.C);隨著果實的成熟,果皮因白粉菌危害變成褐色,果皮僵硬,著色較差,嚴重影響了果實的外觀和品質(圖版D)。
經顯微鏡觀察,荔枝白粉菌的分生孢子橢圓形,單孢無色,大小為22.75~39.6um×19.8~20.79um,單生在分生孢子梗上(圖版-E,F);分生孢子梗無色,由3個細胞組成(圖版-E);分生孢子芽孔位于孢子基部,且一個分生孢子只萌發成一根芽管,剛萌發的芽管較為粗壯,呈二叉狀分枝,后其中一個分枝不斷延長成菌絲(圖版G)。
2.1.2 不同品種間荔枝白粉病的發生情況 參照
1.2.1 的調查方法,選取茂名地區管理水平一致的荔枝園,調查3個主栽品種荔枝園的白粉病發生情況。由表1可知,黑葉的果穗和單果的發病率最高,分別達94.45%、65.10%,白蠟的果穗和單果的發病率最低,分別為5.55%、1.87%。
2.2 濕度對孢子萌發的影響
從圖1可以看出,荔枝白粉菌分生孢子在相對濕度10%~100%條件下均能萌發,隨著濕度增加,萌發率增大。在相對濕度10%條件下24h后萌發率為15.2%;在相對濕度25%~50%條件下萌發率分別為19.6%、27.6%、30.1%,經鄧肯氏新復極差法分析,差異不顯著(P=0.05);相對濕度75%以上時,萌發率沒有顯著差異;當濕度為100%時萌發率達到最大,為73.7%。
2.3 溫度對孢子萌發的影響
結果表明(圖2),荔枝白粉病菌分生孢子萌發的溫度為5~35℃,但是在5、35℃下萌發率極低,僅有2.5%和4%:最適萌發溫度為25~30℃,在25℃下培養24h后孢子萌發率為64%。
2.4 ph值對孢子萌發的影響
荔枝白粉病菌分生孢子在pH值為3~11均可以萌發,最適萌發pH值為3~7,在培養24h后孢子萌發率分別為51.3%、52.4%、47.6%,無顯著差異;pH值為9和11時,萌發率分別為44.9%和42.2%,2者無顯著差異,但是比pH值為3~7時孢子萌發率顯著降低(圖3)。
2.5 荔枝白粉菌對不同殺菌劑的敏感性
當殺菌劑有效濃度為200mg·L-1時,復配型殺菌劑妙丹和一噴凈對白粉菌萌發的抑制作用最好,抑制率可達到98.6%和96.2%;其次是粉銹安、銹粉寧和醚菌酯、己唑醇,抑制率超過78%;而多菌靈對荔枝白粉菌萌發的抑制率只有39%,進一步證實多菌靈不是防治白粉菌的適宜藥物。
3 討論
在廣東省茂名地區,荔枝白粉病是荔枝果實上新發生的病害,未見報道。果農誤以為霜疫霉病。事實上。荔枝白粉病發病初期癥狀與霜疫霉病是不同的。白粉菌在荔枝果實上形成粉層,菌絲短,平鋪在果皮龜裂片間縫隙內,危害嚴重的可擴展至果皮龜裂片上,果實成熟后果皮變褐、僵硬;而霜疫霉危害的果實,病斑多自果蒂開始發生,褐色,不規則,無明顯的邊緣,潮濕時果皮上長有稀疏霉層,菌絲長,呈絨氈狀,病斑擴展極迅速,往往全果變褐,果肉發酸,流出褐水。在防治這2種病害時,所選殺菌劑截然不同,白粉病適宜的殺菌劑為妙丹、一噴凈、粉銹安、銹粉寧等,而霜疫霉特效藥為克露、雷多米爾等殺菌劑,市面上出售的多菌靈對荔枝白粉菌孢子萌發抑制率為39%,不可用該藥劑防治荔枝白粉病。
本研究表明該菌對干旱環境的適應力較強,而荔枝霜疫霉、炭疽菌孢子萌發對濕度要求較高,霜疫霉在侵染過程的各個時期,都要求高濕度,否則不能危害;炭疽菌在相對濕度低于85%時不能萌發。2009年茂名地區4—5月份,果園內平均溫度為24.28℃,平均相對濕度75.5%,這正是荔枝白粉病成為果園內優勢菌群,大面積發生的原因之一。故建議逢少雨的年份,在青果期及時噴施白粉菌特效藥,達到提前預防的目的。
本文調查了茂名地區主栽品種白糖罌、白蠟、黑葉果實上白粉病發生情況,結果表明白蠟品種白粉病發生最輕,果穗發病率僅為5.6%,黑葉品種發病率最重,果穗發病率為94.5%。白蠟品種的龜裂片隆起,裂片峰銳尖,龜裂片之間縫隙深,而黑葉和白糖罌龜裂片峰鈍或缺失,龜裂片之間縫隙寬而淺㈣,不同品種對該病的抗性機理是否與果皮結構有關有待于進一步研究。
4 結論
荔枝白粉病是我國荔枝產區發生的一種新病害。發病初期,白粉菌在果實龜裂片縫隙間呈稀疏的短絨毛狀,后病癥逐漸發展呈白色粉層蔓延至龜裂片上。龜裂片同時變成褐色。該病菌分生孢子萌發的濕度為10%~100%,最適萌發溫度為25~30℃,最適pH值為3~7。當殺菌劑終濃度為200mg·L-1時,妙丹和一噴凈對白粉菌孢子萌發的抑制效果最好。(本文圖版見封4)