楊梅水提液鎮痛抗炎作用的實驗研究

【摘要】:目的:探討楊梅水提液的鎮痛與抗炎作用。方法:提取楊梅水提液;每個實驗均分為阿司匹林組，楊梅水提液組和空白對照組。鎮痛實驗通過應用熱板刺激法和用冰醋酸致小鼠扭體反應法;抗炎實驗采用二甲苯引起小鼠耳廓腫脹致炎造模方法，觀察并記錄小鼠耳廓腫脹程度。結果:在鎮痛實驗中楊梅水提液能非常明顯地提高小鼠的痛閾，并對醋酸致小鼠扭體反應有明顯抑制作用(與生理鹽水組相比:P<0.01，P<0.05);在抗炎實驗中楊梅水提液能抑制二甲苯對小鼠所致的耳廓腫脹(與生理鹽水組相比:P<0.05);結論:楊梅水提液具有明顯的鎮痛和抗炎作用。

【關鍵詞】:楊梅水提液;鎮痛作用;抗炎作用

【中圖分類號】R29【文獻標識碼】A【文章編號】1007-8517(2010)06-047-2

楊梅(Myrica.rubra Sieb.et Zucc)為楊梅科楊梅屬植物，為我國特產，主要分布于長江流域以南，以浙江、江蘇、福建等省為主要產區[1]。楊梅水提液中含多種酚類化合物，主要由黃酮類化合物及原花色素類化合物組成，這兩類化合物均有顯著的生物活性。近代醫學進一步證明，楊梅除具有抗菌、防止便秘、提高食欲、止瀉等功效外，同時對高血壓、心血管病等也有一定的療效，還有防癌、治癌的功效[2]。然而目前還很少發現有關楊梅水提液的抗炎鎮痛作用的文獻報道，為此，我們提取了楊梅水提液進行鎮痛和抗炎作用的實驗研究。

1材料

1.1楊梅為楊梅科楊梅屬植物楊梅的成熟果實，購于廣東潮汕地區的楊梅果園。

1.2動物昆明種小鼠90只，體重(20.0±2.1)g，雌雄兼用，由湖北民族學院醫學院提供。

1.3試藥楊梅水提液的制備[1]:楊梅→常溫解凍→打漿→壓榨→離心→取上清液，然后用蒸餾水稀釋至1g/ml，即得;二甲苯為武漢市江北化學試劑有限公司產品(批號:20040806);1%醋酸溶液(CH3COOH)的配制:取2.8ml 36%乙酸(武漢市江北化學試劑廠，批號:20020425)，加蒸餾水至100ml，即得;阿司匹林溶液(Aspirin)的配制:取復方乙酰水楊酸片(山東新華制藥股份有限公司產品，批號:0903252)一片，含阿司匹林0.22g，研磨后溶于110ml蒸餾水，得0.002g/ml阿司匹林溶液(即用0.002g/ml的阿司匹林溶液按2ml/10g灌胃給藥就相當于用阿司匹林制劑按0.2g/kg ig給藥)。

1.4儀器BS224S型電子天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司);80-2型電動離心機(金壇市富華儀器有限公司);GJ-8402型熱板測痛儀(寧海白石電子醫藥儀器廠)。

2方法和結果

2.1楊梅水提液對熱板致小鼠痛閾的影響選用雌性健康小鼠，在熱板測痛儀(55±0.5)℃上，以秒表記錄小鼠放入到出現舔足的時間段為痛閾指標(以秒記)。將每只小鼠進行預選，對痛閾小于5s，或大于30s及喜跳的小鼠剔除，選合格的小鼠30只，隨機分成3組，每組10只。給藥組、陽性組和空白組均以100ml/kg的劑量分別灌胃楊梅水提液、阿司匹林溶液和生理鹽水。給藥前先測定各小鼠痛閾值2次，求平均值為其正常痛閾值。測定給藥后30min，60min和90min出現舔足的潛伏期，進行統計學處理結果見表1。

由表1可以看出:楊梅水提液組小鼠在給藥后30min到90min平均痛閾值均高于生理鹽水組有統計學意義(P<0.01，P<0.05)。所以可以看出楊梅水提液對物理性疼痛模型有明顯鎮痛作用。

2.2楊梅水提液對醋酸致小鼠扭體反應的影響取健康小鼠30只，雌雄各半，隨機分成3組，分組和給藥同熱板法，給藥30min后，各組均ip 1%醋酸溶液0.2ml/10g，觀察10min內小鼠出現扭體反應次數，按下式求得扭體反應抑制率，進行統計學處理結果見表2。

抑制率(%)=(1—給藥組扭體反應次數/空白組扭體反應次數)×100%

表2 楊梅水提液對醋酸致小鼠扭體反應的影響()

組別動物/只扭體次數抑制率(%)

生理鹽水1022.1±3.67——

阿司匹林105.50±1.31**75.11%

楊梅水提液109.40±1.46**54.47%

與生理鹽水比較:**P<0.01

由表2可以知道:楊梅水提液組對醋酸致小鼠扭體反應的抑制率為54.47%，其小鼠對醋酸致扭體反應次數明顯低于生理鹽水組(P<0.01)，具有統計學意義，因此看出楊梅水提液對化學性疼痛模型有明顯鎮痛作用，且其作用發揮迅速明顯。

2.3楊梅水提液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響選用昆明小鼠30只，隨機分成3組，每組10只。給藥組、陽性組和空白組均以100ml/kg的劑量分別灌胃楊梅水提液、阿司匹林溶液和生理鹽水。給藥1h后以50μl二甲苯涂于小鼠的右耳廓兩面致炎，左耳廓為對照，4h后剪下兩耳，用直徑6mm的打孔器打下兩耳耳片，于BS224S型電子天平分別稱兩耳的重量，以兩耳差表示炎癥反應的強度[3]。按下式求得炎癥反應抑制率，進行統計學處理結果見表3。

抑制率(%)=空白組與給藥組平均腫脹率之差/空白組平均腫脹度×100%

由表3可以知道:楊梅水提液組對二甲苯致小鼠耳廓腫脹炎癥的抑制率為59.83%，其小鼠對兩耳的重量差低于生理鹽水組(P<0.05)，具有統計學意義，因此看出楊梅水提液具有抗炎作用，但其抗炎作用沒有阿司匹林作用明顯。

3討論

實驗中我們采用了經典的急性動物模型，其病理反應主要表現為局部充血、水腫及滲出等，是研究藥物抗炎作用的主要模型之一。醋酸致小鼠扭體模型主要是間接通過產生腹腔急性炎癥反應所致，是篩選非甾體抗炎藥鎮痛作用的一種敏感而簡便的方法。而楊梅中含有黃酮類、甾醇類、多糖類等化合物，且黃酮類化合物含量較高，很多文獻報道[4-5]黃酮類化合物是其抗炎鎮痛作用的主要有效成分。

物理和化學性致痛實驗證實:楊梅水提液能明顯提高小鼠熱板所致痛閾值，對醋酸所致小鼠扭體反應有明顯對抗作用，看出楊梅水提液具有明顯的鎮痛作用，其機制可能是與楊梅水提液中含豐富的生物活性的物質，如花色苷、黃酮、甾醇類等化合物等[6]有關，其鎮痛作用機制有待于進一步研究。

楊梅水提液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響的實驗中，楊梅的抗炎作用明顯，其抗炎作用機制可能與楊梅水提液中含有豐富的抗炎成分有關，如楊梅素、有機酸等，其抗炎作用機制有待于進一步研究。

楊梅為我國特產，其不僅具有較高的營養價值，而且有著潛在的藥理研究價值，有報道[7]楊梅核仁成分對胃癌細胞具有殺傷抑制作用，這是由于楊梅核含有豐富的維生素B17，是一種抗癌物質。所以說楊梅是一類值得關注的天然藥物資源，有待于進一步開發研究。

參考文獻

[1] 陳健初，夏其樂，等.楊梅水提液的抗氧化特性研究[J].浙江大學學報(農業與生命科學版)2004，30(6):657-661.

[2] 遲文，徐靜，譚巍，等.Protective effect of bayberry polyphenol onplatelet damatges in mice and rat[J].中國藥房，2002，13(1):16-17.

[3] 陳奇.中藥藥理研究方法學[M].北京:人民衛生出版社，1993:70-271.

[4] 何愛民.垂盆草的黃酮成分[J].中草藥，l997，28(5):27l-276.

[5] 李建新.高山紅景天莖葉的化學成分研究[J].中草藥，1998，29(10):659-661.

[6] 吳亞梅，陳健，等.楊梅的綜合研究與利用[J].食品科技，2007，(10):75-76.

[7] 張文敏，王利民，等.楊梅核仁對胃癌細胞的殺傷抑制作用的初步研究[J].中醫藥學報，1993(10):38.